公开(公告)号：CN113005179B

公开(公告)日：2021-11-16

申请号：CN202110222482.5

申请日：2021-02-26

Applicant: 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

Inventor： 黄宪章 ,  张乔轩 ,  蔡志梁 ,  韩丽乔 ,  严君 ,  展敏 ,  欧阳芬 ,  王建兵 ,  柯培锋 ,  庄俊华

IPC: C12Q1/682 ,  C12Q1/6886

Abstract: 本发明属于生物快速检测技术领域，具体涉及一种基于DNA‑多肽探针技术定量核酸的质谱方法，包括如下步骤：以待测核酸的核苷酸序列为基础，设计DNA探针；筛选出特征多肽，并与所述DNA探针构建DNA‑多肽探针；将DNA‑多肽探针与待测核酸杂交；将杂交后的DNA‑多肽探针进行蛋白酶酶解，将DNA‑多肽探针中的特征多肽水解为报告肽；构建报告肽的LC‑MS/MS检测方法；利用构建的LC‑MS/MS检测方法对报告肽的浓度进行检测；由报告肽的浓度换算为待测核酸的拷贝数，实现对待测核酸的定量检测。基于上述方法，将核酸的定量转换为多肽的定量，具有检测效率高、特异性强的优势；此外，通过该方法对肝癌标志物HULC进行检测，更有利于对肝癌进行风险评估。

公开(公告)号：CN115960904A

公开(公告)日：2023-04-14

申请号：CN202211437918.3

申请日：2022-11-16

Applicant: 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

Inventor： 张乔轩 ,  黄宪章 ,  白开 ,  吴梅燃 ,  严君 ,  韩丽乔 ,  展敏 ,  张鹏伟 ,  王建兵 ,  林海标 ,  柯培锋 ,  庄俊华

IPC: C12N15/115 ,  G01N27/327 ,  G01N33/564 ,  G01N33/543 ,  G01N27/26

Abstract: 本发明提供了一种基于特异性核酸适配体的抗dsDNA抗体电化学检测方法。本发明采用分子对接和分子模拟等方法设计能与抗dsDNA抗体Fab片段异性结合的DNA适配体，并使用微量热电泳仪（MST）进行亲和活性验证。采用polyAn作为防污涂层用于阻断金电极表面的剩余活性位点，将DNA适配体固定在电极上作为亲和捕获配体。同时，制备二抗标记的金纳米颗粒作为信号放大标签，用于生物传感器电荷转移电阻的净增加。成功构建基于电化学阻抗谱（EIS）分析平台的金电极GE/DNA/polyAn生物传感器，用于快速准确地检测血清中的抗dsDNA抗体。

公开(公告)号：CN114705849A

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202210209521.2

申请日：2022-03-03

Applicant: 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

Inventor： 黄宪章 ,  张乔轩 ,  白开 ,  严君 ,  韩丽乔 ,  林海标 ,  展敏 ,  张鹏伟 ,  王建兵 ,  柯培锋 ,  庄俊华

IPC: G01N33/539 ,  G01N33/58 ,  G01N33/68 ,  G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/72 ,  G01N27/64

Abstract: 本发明涉及质谱检测技术领域，尤其涉及一种基于SILAC进行血清胱抑素C绝对定量的质谱方法。本发明公开了基于SILAC人血清胱抑素C绝对定量方法的建立与性能评价，首次使用15N标记的CysC完整蛋白作为内标进行目标蛋白的绝对定量，极大的降低了在样本前处理过程中由样本损失，酶切不完全等造成的结果误差。样本前处理采用特异性抗体‑M270环氧树脂磁珠免疫共沉淀，提取效率较现有方法高，提高了实际样本检测灵敏度和抗干扰能力。本发明首次采用CysC国家标准物质GBW09870联合氨基酸分析法进行血清中CysC检测的量值溯源。

公开(公告)号：CN119901852A

公开(公告)日：2025-04-29

申请号：CN202510145158.6

申请日：2025-02-10

Applicant: 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

Inventor： 韩丽乔 ,  黄宪章 ,  张乔轩 ,  展敏 ,  严君 ,  张鹏伟

IPC: G01N30/06 ,  G01N30/88

Abstract: 本发明公开了一种基于LC‑MS/MS技术同步测定生物样品中多种药物成分的方法，所述多种药物为苯妥英钠、帕潘立酮、伏立康唑、茶碱、氟伏沙明、利多卡因，所述方法包括以下步骤：获取生物样品，并对其进行前处理；采用液相色谱质谱联用技术同步检测样品中的苯妥英钠、帕潘立酮、伏立康唑、茶碱、氟伏沙明、利多卡因。本发明的方法可以实现对苯妥英钠、帕潘立酮、伏立康唑、茶碱、氟伏沙明、利多卡因的快速同步测定，具备较高的灵敏度和准确度。

公开(公告)号：CN117471007B

公开(公告)日：2024-08-09

申请号：CN202311425937.9

申请日：2023-10-31

Applicant: 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

Inventor： 张乔轩 ,  黄宪章 ,  展敏 ,  严君 ,  韩丽乔 ,  张鹏伟

IPC: G01N30/06 ,  G01N30/72

Abstract: 本发明提供了一种血浆β‑淀粉样蛋白检测方法，本发明方法以血浆Aβ42和Aβ40作为检测对象，选择Aβ40蛋白的特征肽段为肽段GAIIGLMVGGVV，Aβ42蛋白的特征肽段为肽段GAIIGLMVGGVVIA，肽段GAIIGLMVGGVV的定量子离子为968.56（b11+），肽段GAIIGLMVGGVVIA的定量子离子为1067.63（b12+），采用15N同位素标记的完整蛋白作为内标，通过免疫沉淀富集纯化样本，并酶解产生特征肽段，建立ID‑LC‑MS/MS靶向检测特征肽段的方法，从而实现血浆Aβ42和Aβ40的准确定量。本发明方法避免了血浆中与Aβ40和Aβ42众多结构相似的亚型对检测的干扰，有利于提高检测方法的准确度，并且特征肽段的质谱母离子、质谱子离子具有更强的响应信号，使得血浆β‑淀粉样蛋白检测方法的准确度、重复性、灵敏度更佳。

公开(公告)号：CN115960904B

公开(公告)日：2023-08-01

申请号：CN202211437918.3

申请日：2022-11-16

Applicant: 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

Inventor： 张乔轩 ,  黄宪章 ,  白开 ,  吴梅燃 ,  严君 ,  韩丽乔 ,  展敏 ,  张鹏伟 ,  王建兵 ,  林海标 ,  柯培锋 ,  庄俊华

IPC: C12N15/115 ,  G01N27/327 ,  G01N33/564 ,  G01N33/543 ,  G01N27/26

Abstract: 本发明提供了一种基于特异性核酸适配体的抗dsDNA抗体电化学检测方法。本发明采用分子对接和分子模拟等方法设计能与抗dsDNA抗体Fab片段异性结合的DNA适配体，并使用微量热电泳仪（MST）进行亲和活性验证。采用polyAn作为防污涂层用于阻断金电极表面的剩余活性位点，将DNA适配体固定在电极上作为亲和捕获配体。同时，制备二抗标记的金纳米颗粒作为信号放大标签，用于生物传感器电荷转移电阻的净增加。成功构建基于电化学阻抗谱（EIS）分析平台的金电极GE/DNA/polyAn生物传感器，用于快速准确地检测血清中的抗dsDNA抗体。

公开(公告)号：CN117471007A

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202311425937.9

申请日：2023-10-31

Applicant: 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

Inventor： 张乔轩 ,  黄宪章 ,  展敏 ,  严君 ,  韩丽乔 ,  张鹏伟

IPC: G01N30/06 ,  G01N30/72

Abstract: 本发明提供了一种血浆β‑淀粉样蛋白检测方法，本发明方法以血浆Aβ42和Aβ40作为检测对象，选择Aβ40蛋白的特征肽段为肽段GAIIGLMVGGVV，Aβ42蛋白的特征肽段为肽段GAIIGLMVGGVVIA，肽段GAIIGLMVGGVV的定量子离子为968.56（b11+），肽段GAIIGLMVGGVVIA的定量子离子为1067.63（b12+），采用15N同位素标记的完整蛋白作为内标，通过免疫沉淀富集纯化样本，并酶解产生特征肽段，建立ID‑LC‑MS/MS靶向检测特征肽段的方法，从而实现血浆Aβ42和Aβ40的准确定量。本发明方法避免了血浆中与Aβ40和Aβ42众多结构相似的亚型对检测的干扰，有利于提高检测方法的准确度，并且特征肽段的质谱母离子、质谱子离子具有更强的响应信号，使得血浆β‑淀粉样蛋白检测方法的准确度、重复性、灵敏度更佳。

公开(公告)号：CN114674961A

公开(公告)日：2022-06-28

申请号：CN202210382756.1

申请日：2022-04-13

Applicant: 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

Inventor： 韩丽乔 ,  黄宪章 ,  张乔轩 ,  展敏 ,  严君 ,  王建兵 ,  张鹏伟 ,  万泽民 ,  杜园园 ,  王智超 ,  柯培锋 ,  庄俊华

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/72 ,  G01N30/88

Abstract: 本发明涉及激素检测技术领域，尤其是涉及一种非衍生化同步检测血清中17种类固醇激素的试剂盒及其应用。试剂盒包括洗脱液、稀释液、萃取剂、质控品和色谱柱，萃取剂为乙酸乙酯/正己烷；该试剂盒具有简单、方便、高通量、耗时显著缩短的优点，同时检测结果更佳准确；其中采用ID‑LC‑MS/MS(高效液相色谱‑串联质谱)检测血清17种类固醇激素，样品前处理更加简单、方便，仅仅需要一步液液萃取过程，就能有效提取样本中17种类固醇激素，时间大大缩短，不需要衍生化和/或固相提取步骤，通过色谱条件优化，能将生物体内存在的17种类固醇激素实现基线分离，提高了定量的特异性和准确性。

公开(公告)号：CN113005179A

公开(公告)日：2021-06-22

申请号：CN202110222482.5

申请日：2021-02-26

Applicant: 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

Inventor： 黄宪章 ,  张乔轩 ,  蔡志梁 ,  韩丽乔 ,  严君 ,  展敏 ,  欧阳芬 ,  王建兵 ,  柯培锋 ,  庄俊华

IPC: C12Q1/682 ,  C12Q1/6886

Abstract: 本发明属于生物快速检测技术领域，具体涉及一种基于DNA‑多肽探针技术定量核酸的质谱方法，包括如下步骤：以待测核酸的核苷酸序列为基础，设计DNA探针；筛选出特征多肽，并与所述DNA探针构建DNA‑多肽探针；将DNA‑多肽探针与待测核酸杂交；将杂交后的DNA‑多肽探针进行蛋白酶酶解，将DNA‑多肽探针中的特征多肽水解为报告肽；构建报告肽的LC‑MS/MS检测方法；利用构建的LC‑MS/MS检测方法对报告肽的浓度进行检测；由报告肽的浓度换算为待测核酸的拷贝数，实现对待测核酸的定量检测。基于上述方法，将核酸的定量转换为多肽的定量，具有检测效率高、特异性强的优势；此外，通过该方法对肝癌标志物HULC进行检测，更有利于对肝癌进行风险评估。

公开(公告)号：CN117316461A

公开(公告)日：2023-12-29

申请号：CN202311179053.X

申请日：2023-09-13

Applicant: 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

Inventor： 万泽民 ,  石静 ,  李可 ,  张秀娟 ,  王建兵 ,  张乔轩 ,  韩丽乔 ,  严君 ,  张鹏伟 ,  展敏 ,  柯培锋 ,  黄宪章

IPC: G16H50/70 ,  G16H50/20 ,  G16H20/90 ,  G06F18/27

Abstract: 本发明公开了一种类风湿性关节炎中医证候预测模型的构建方法及系统，包括：将若干个RA患者的第一基本信息、第一常规检测结果和第一中医证候实际结果，分为多个类风湿性关节炎症候组，并获取各个症候组对应的若干个第一检验指标；对所有第一检验指标进行Lasso回归分析，以筛选出与各个症候组的中医证候相关的第一检验指标，作为第二检验指标；对各个症候组进行划分而得到训练集，并对训练集中各第二检验指标进行统计学意义验证，然后利用通过验证的第二检验指标，训练多因素l ogi st i c回归模型而得到类风湿性关节炎中医证候预测模型。本发明先后经历两次不同类型的指标筛选，并基于筛选出的指标训练模型，以提升模型的预测准确性。