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公开(公告)号：CN119876350A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202411971788.0
申请日：2024-12-30
Applicant: 广东工业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/689 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种荧光定量PCR引物组合物及其应用。本发明针对β‑内酰胺类抗生素耐药基因blaCMY、blaTEM、blaCTX‑M和blaDHA，分别获得了可准确、灵敏地检测出所述4种耐药基因的荧光定量PCR引物，可用于细菌对β‑内酰胺类抗生素的耐药性检测。除单独使用外，也可将所述4种耐药基因的荧光定量PCR引物混合用于细菌对β‑内酰胺类抗生素的耐药性检测，由于其可以通过单次反应同时检测4种耐药基因，提高了对细菌的β‑内酰胺类抗生素耐药性的检测效率，缩短了检测等待时间。
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公开(公告)号：CN116004872B
公开(公告)日：2025-05-23
申请号：CN202310084952.5
申请日：2023-01-17
Applicant: 广东工业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测耐药基因的引物组合物及其应用，包含引物A和引物B，其中引物A选自引物对1～2，引物B选自引物对3～5；所述引物对1为核苷酸序列如SEQ IDNO.1～2所示的引物；所述引物对2为核苷酸序列如SEQ ID NO.3～4所示的引物；所述引物对3为核苷酸序列如SEQ ID NO.5～6所示的引物；所述引物对4为核苷酸序列如SEQ ID NO.7～8所示的引物；所述引物对5为核苷酸序列如SEQ ID NO.9～10所示的引物。本发明提供的引物特异性强，灵敏度高，用于检测的操作流程简单，成本低廉，同时能够大批量、快速且精确地从核酸含量低的环境样本中检测出多重耐药基因，大大节约了检测的时间和成本，可推广用于抗生素污染的监测。
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公开(公告)号：CN115572698A
公开(公告)日：2023-01-06
申请号：CN202211335264.3
申请日：2022-10-28
Applicant: 广东工业大学
Abstract: 本发明属于微生物技术领域，公开了一种在宿主细胞存在条件下诱导形成活的不可培养状态细菌的方法及其应用，该方法是将处于3～20代的细胞转移孔板中，得到诱导细胞；将处于对数增长期的细菌经缓冲液洗涤，改性细胞培养液重悬，得到细菌悬液。将细菌悬液加入诱导细胞中，在恒温培养箱中孵育1～5h后，后加入含10～500mg/L庆大霉素改性细胞培养液，经细胞处理3～10d后，加入细胞裂解液收集胞内的细菌再洗涤、离心、重悬，得到活的不可培养状态的细菌。本发明在宿主细胞存在条件下可以诱导细菌进入活的不可培养状态，不仅拓展了对活的不可培养状态细菌的认识，也为临床中的复发性、慢性感染疾病提供理论与技术支持。
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公开(公告)号：CN119799859A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202510024112.9
申请日：2025-01-07
Applicant: 广东工业大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/689 , C12Q1/14 , C12Q1/10 , C12Q1/06 , C12N15/11 , C12R1/385 , C12R1/19 , C12R1/445
Abstract: 本发明公开了一种定量检测宿主呼吸道内活的不可培养状态细菌的方法及应用。所述方法利用设计好的特异性引物，结合PMA染料和实时荧光定量PCR技术来处理呼吸道细菌样品，这种方法可以准确定量检测宿主呼吸道内处于活的不可培养状态的特定细菌。相较于流式细胞仪和ATP检测活的不可培养细菌的方法，本发明的优势在于可以实现对宿主体内提取到的浓度低且有其他微生物成分干扰的复杂细菌样品中某一目标细菌进行精确定量，实验准确度和可重复性高，可弥补传统检测方法无法区分单一细菌的活的不可培养状态细菌的检测的缺陷。本发明所述方法可以实现对临床样本中多种活的不可培养细菌的快速精确检测，并可以在人体健康风险评估中应用。
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公开(公告)号：CN116380756A
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202310415237.5
申请日：2023-04-18
Applicant: 广东工业大学
Abstract: 本发明属于环境微生物技术领域，公开了基于流式细胞术检测活的不可培养状态细菌抗生素耐药性的方法及其应用。该方法通过消毒技术获得纯的活的不可状态细菌，调整细菌浓度，并和不同浓度的抗生素等体积混匀孵育。完成孵育后，离心、洗涤、重悬，按照比例加入SYTO 9和PI染色剂在适宜温度中避光孵育，调整流式细胞仪的FSC、SSC、FITC和PI的电压参数，分析活的不可培养状态细菌的存活率来确定其抗生素耐药性。该方法具有可操作性强、快速、高通量、准确度高、灵敏度高且应用范围广的优势，可检测不同种类活的不可培养状态细菌对不同种类抗生素的耐药性，可应用在环境微生物技术领域中。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115753568A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211336508.X
申请日：2022-10-28
Applicant: 广东工业大学
Abstract: 本发明属于细胞内微生物检测领域，公开了一种细胞内活的不可培养细菌的检测方法及其应用。该方法是从宿主细胞分离出的细菌进行样品洗涤，后用荧光染料SYTO9和PI分别与细菌悬液共孵育标记细菌，随后通过流式细胞仪检测待测细菌悬液样本中的活的不可培养细菌和死细菌的含量。本发明使用灵敏的检测仪器流式细胞仪标记不同状态的细菌、确定最佳实验条件以及调整仪器参数，可以提高对细胞内活的不可培养细菌鉴别的准确度，该方法不仅具有广谱识别性和操作简便性，还能快速、准确检测出活的不可培养细菌，对于临床样品中的活的不可培养细菌的检测具有重要意义。
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公开(公告)号：CN115612683A
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202211399613.8
申请日：2022-11-09
Applicant: 广东工业大学
Abstract: 本发明属于环境微生物技术领域，公开了一种光催化诱导获得细菌小菌落变异体的方法及其应用。该方法将细菌菌种接种到营养肉汤中复苏培养，使细菌生长至对数生长期；离心后去除上清液得到菌体，用生理盐水洗涤并重悬菌体，调整细菌的光密度，用生理盐水进行梯度稀释，得到初始菌悬液，将初始菌悬液调节pH至5.5～9.2，溶解氧浓度为1～9mg/L，再插入片状TiO2纳米管，使用LED紫外灯进行光催化诱导，得到细菌小菌落变异体。该方法通过调整初始菌悬液浓度、片状TiO2纳米管、紫外灯光强以及诱导时间等不同理化参数，适用不同种类和浓度下的细菌小菌落变异体体的诱导，实现小菌落变异体的稳定诱导，可应用在环境微生物领域。
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公开(公告)号：CN114350740A
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202210085908.1
申请日：2022-01-25
Applicant: 广东工业大学
Abstract: 本发明属于环境微生物和水消毒领域，公开了一种运用亚致死光催化调控耐药基因接合转移频率的方法及其应用。该方法将调控的供体菌溶液和受体菌液混合，在20～40℃的恒温摇床中震荡培养，再将所得接合转移菌液稀释涂布在双抗板上，并将受体菌耐链霉素的大肠杆菌液稀释涂布在含有链霉素的平板上，调整接合转移菌液中接合子的浓度以及受体菌液中受体菌的浓度，通过接合子浓度和受体菌浓度计算接合频率，实现调控耐药基因接合转移频率。该方法通过调整亚致死光催化条件下光强，温度，浓度等不同理化参数，适用不同种类和浓度下的耐药菌中耐药基因的结合转移研究，实现对耐药基因的接合转移频率进行调控，达到有效控制耐药细菌传播的目的。
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公开(公告)号：CN119971809A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202510110326.8
申请日：2025-01-23
Applicant: 广东工业大学
IPC: B01F23/10 , G01N15/06 , G01N33/00 , B01F23/213 , B01F33/82 , B01F33/81 , B01F35/213 , B01F35/80 , B01F101/23
Abstract: 本发明公开了一种生物气溶胶与挥发性有机化合物的发生、平衡和共暴露系统及其使用方法。所述系统包括共暴露平衡箱以及通过管路系统与所述共暴露平衡箱连接的挥发性有机化合物气体平衡箱和生物气溶胶平衡箱，以及生物气溶胶采集装置等。利用所述系统，可通过调控VOCs气体和生物气溶胶的气路配比，改变生物气溶胶中的微生物以及VOCs的种类和浓度等，快速实时控制多组分多梯度VOCs和多种类多浓度生物气溶胶的发生平衡，实现VOCs暴露生物气溶胶的实时调控，模拟不同自然场景中不同浓度、不同种类及多种VOCs的释放和不同种生物气溶胶的发生，以此评估VOCs与生物气溶胶的相互作用，以利于后续对VOCs和生物气溶胶的处理。
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公开(公告)号：CN119432684A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202411921191.5
申请日：2024-12-25
Applicant: 广东工业大学
Abstract: 本发明公开了一种在宿主体内诱导细菌进入活的不可培养状态的方法及其应用。所述诱导方法为利用大鼠的呼吸道环境作为诱导条件，使细菌进入VBNC休眠状态，不同于体外环境压力或体外细胞体系的诱导方式，本方法使用完整的生物个体成功有效地诱导细菌进入VBNC状态，操作简便，易于制备；所述诱导方法可有效实现在宿主体内的VBNC状态细菌的诱导，对于进一步研究活的不可培养细菌的诱导以及其后续的健康风险的评估具有非常重要意义，可以开展在多种先天免疫途径相互作用的条件下分析细菌及宿主反应的研究，探究宿主体内诱导得到的VBNC状态细菌的耐药性变化等，对于理解细菌在宿主体内环境中的耐药性发展机制具有重要意义。
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