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公开(公告)号：CN116064668A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211408464.7
申请日：2022-11-10
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，其公开了一种重组腺病毒质粒，其核苷酸序列如SEQNO.1所示。该质粒以及基于该质粒的病毒利用1型猪捷申病毒(Porcine Teschovirus‑1)的P2A蛋白具有自我剪切的功能，将其作为连接肽将IBDV的VP2和FAdV‑4的Fiber2蛋白编码基因串联，置于复制缺陷型人5型腺病毒载体的表达盒中，通过一次转录和翻译，可以同时实现2个蛋白的表达，以期为IBD和FAdV‑4二联候选活载体疫苗的研发提供新的思路。该病毒能够稳定表达VP2和Fiber2蛋白，其病毒滴度高。同时，本发明还公开了该质粒的制备方法。
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公开(公告)号：CN116064668B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202211408464.7
申请日：2022-11-10
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，其公开了一种重组腺病毒质粒，其核苷酸序列如SEQNO.1所示。该质粒以及基于该质粒的病毒利用1型猪捷申病毒(Porcine Teschovirus‑1)的P2A蛋白具有自我剪切的功能，将其作为连接肽将IBDV的VP2和FAdV‑4的Fiber2蛋白编码基因串联，置于复制缺陷型人5型腺病毒载体的表达盒中，通过一次转录和翻译，可以同时实现2个蛋白的表达，以期为IBD和FAdV‑4二联候选活载体疫苗的研发提供新的思路。该病毒能够稳定表达VP2和Fiber2蛋白，其病毒滴度高。同时，本发明还公开了该质粒的制备方法。
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公开(公告)号：CN116254236A
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202211474706.2
申请日：2022-11-23
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C12N7/01 , C12N15/44 , C12N15/861 , C12N15/11 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达H9N2HA蛋白的重组腺病毒及其制备方法、疫苗，涉及生物工程技术领域。其中，制备方法包括：提取H9N2HA的基因组，扩增重组，得到重组穿梭质粒pAdTrack‑HA；线性化后与腺病毒骨架质粒重组，得到重组腺病毒质粒pAd HA；线性化后转染细胞，即得到表达H9N2HA蛋白的重组腺病毒。实施本发明，可得到表达H9N2亚型禽流感HA蛋白的重组腺病毒，为H9N2活病毒载体疫苗的研发奠定一定的基础。
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公开(公告)号：CN116218795A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202310223954.8
申请日：2023-03-09
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C12N7/01 , C12N15/44 , C12N15/62 , C12N15/85 , A61K39/295 , A61K39/145 , A61K39/17 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物领域，公开了一种表达H9亚型禽流感双拷贝HA基因的Ⅶ型致弱新城疫重组病毒，所述病毒为rDHN3mF‑2HA、rDHN3mF‑HA，rDHN3mF‑2HA的序列如序列表SEQ IDNO：1所示；rDHN3mF‑HA的序列如序列表SEQ ID NO：2所示。本发明的病毒在rDHN3‑mF病毒基因组的P基因和M基因之间的非编码区之间表达全长膜结合HA和另外一个带有截短跨膜结构域的可溶性HA蛋白，获得了能高效稳定表达H9N2AIV的HA蛋白的新城疫基因VII型减毒株重组病毒rDHN3mF‑2HA，经WB验证表明增加HA的可溶性表达与原HA基因相比，其表达效率更高。该重组病毒有望进一步开发成抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗；同时，本发明还提供了该病毒的制备方法、用途，此外还涉及关键质粒的制备方法。
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公开(公告)号：CN117969831B
公开(公告)日：2025-02-25
申请号：CN202311872122.5
申请日：2023-12-29
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒夹心ELISA抗体检测试剂盒的使用方法，包括以下步骤：(1)将纯化的猪流行性腹泻病毒重组S1蛋白进行包被，得到稀释后的抗原溶液，加入酶标板中包被过夜；(2)加入封闭液封闭酶标板；(3)在包被抗原的酶标板中分别加入待检样品、阳性对照样品和阴性对照样品，再加入酶标抗原进行共同孵育，所述酶标抗原为辣根过氧化物酶标记的猪流行性腹泻病毒S1蛋白；(4)共同孵育完成后加入底物显色液，显色反应完成后终止反应并采用酶标仪测定结果。本发明为检测猪流行性腹泻病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒的使用方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117969831A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202311872122.5
申请日：2023-12-29
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒夹心ELISA抗体检测试剂盒的使用方法，包括以下步骤：(1)将纯化的猪流行性腹泻病毒重组S1蛋白进行包被，得到稀释后的抗原溶液，加入酶标板中包被过夜；(2)加入封闭液封闭酶标板；(3)在包被抗原的酶标板中分别加入待检样品、阳性对照样品和阴性对照样品，再加入酶标抗原进行共同孵育，所述酶标抗原为辣根过氧化物酶标记的猪流行性腹泻病毒S1蛋白；(4)共同孵育完成后加入底物显色液，显色反应完成后终止反应并采用酶标仪测定结果。本发明为检测猪流行性腹泻病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒的使用方法。
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公开(公告)号：CN118421698A
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202410389072.3
申请日：2024-04-01
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及蛋白表达与细胞重组技术领域，公开了一种鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系的构建，该方案先将pXJ40质粒中原有的氨苄抗性基因删除并替换成新霉素‑卡那霉素抗性基因，得到真核表达载体pXJ40‑NeoR/KanR，再对IBV S1基因进行密码子优化，得到密码子优化后的IBV S1基因，随后将密码子优化后的IBV S1基因、IRES2、EGFP插入步骤1制得的真核表达载体pXJ40‑NeoR/KanR中，得到重组质粒pXJ40‑S1，最后将重组质粒pXJ40‑S1转染至CHO细胞中，得到表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系，此外，本申请还公开了上述鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白CHO细胞系的应用。
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公开(公告)号：CN113637647A
公开(公告)日：2021-11-12
申请号：CN202110822352.5
申请日：2021-07-21
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明公开了一种pSFVCs‑EGFP病毒样颗粒及其制备方法，包括：设计与合成引物：构建得到复制子质粒pSFVCs‑sp6‑EGFP；将复制子质粒pSFVCs‑sp6‑EGFP进行体外转录；再将其体外转录的mRNA共电转入BHK细胞中，得到pSFVCs‑EGFP病毒样颗粒。相应的，本发明在pSFVCs‑EGFP病毒样颗粒基础上构建了去除病毒衣壳蛋白结构的复制子质粒pSFV‑sp6‑EGFP，进而制备出病毒样颗粒pSFV‑EGFP。实施本发明，所述病毒样颗粒pSFV‑EGFP增强了EGFP蛋白的表达，成功建立了一种以塞姆利基森林病毒为载体高效表达其它重要外源蛋白的平台，为后续RNA疫苗研制奠定实验基础。
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公开(公告)号：CN114703207B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202210359526.3
申请日：2022-04-07
Applicant: 华南农业大学 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于生物领域，公开了一种重组质粒的制备方法，将F1片段、F2片段、HA片段或HA‑2P片段、F4片段同源重组得到重组质粒。通过将H9N2亚型禽流感的血凝素蛋白HA茎端C环上第403位异亮氨酸、第411位缬氨酸均突变为脯氨酸，并分别将突变前后的HA基因插在rDHN3‑mF病毒基因组的P基因和M基因之间的非编码区，获得了两株能稳定表达H9N2AIV的HA蛋白的新城疫基因VII型减毒株重组病毒rDHN3mF‑HA‑2P，经WB验证表明双脯氨酸突变后的HA基因与原HA基因相比，其表达效率更高。该重组病毒有望进一步开发成抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗。
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公开(公告)号：CN113652405A
公开(公告)日：2021-11-16
申请号：CN202110968210.X
申请日：2021-08-23
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种pSFV‑p54复制子颗粒及其制备方法与应用。所述pSFV‑p54复制子颗粒的制备方法，包括以下步骤：(1)以pSFV‑sp6‑EGFP质粒和flag‑p54基因为材料，构建得到pSFV‑sp6‑p54质粒；所述flag‑p54基因如SEQ ID NO：1所示；(2)分别将SFV‑helper辅助质粒和所述pSFV‑sp6‑p54质粒线性化并进行体外转录，将所得mRNA共电转入BHK细胞或Vero细胞中，得到pSFV‑p54复制子颗粒。本发明通过以塞姆利基森林病毒为载体，插入非洲猪瘟p54基因，所制得的pSFV‑p54复制子颗粒能够高效表达非洲猪瘟病毒p54蛋白，且具有较高的生物安全性，可应用于研制非洲猪瘟相关疫苗。
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