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公开(公告)号：CN117969831B
公开(公告)日：2025-02-25
申请号：CN202311872122.5
申请日：2023-12-29
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒夹心ELISA抗体检测试剂盒的使用方法，包括以下步骤：(1)将纯化的猪流行性腹泻病毒重组S1蛋白进行包被，得到稀释后的抗原溶液，加入酶标板中包被过夜；(2)加入封闭液封闭酶标板；(3)在包被抗原的酶标板中分别加入待检样品、阳性对照样品和阴性对照样品，再加入酶标抗原进行共同孵育，所述酶标抗原为辣根过氧化物酶标记的猪流行性腹泻病毒S1蛋白；(4)共同孵育完成后加入底物显色液，显色反应完成后终止反应并采用酶标仪测定结果。本发明为检测猪流行性腹泻病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒的使用方法。
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公开(公告)号：CN118356484A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202410472407.8
申请日：2024-04-19
Applicant: 华南农业大学 , 广东温氏大华农生物科技有限公司 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心
IPC: A61K39/255 , C12N7/00 , C12N5/077 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本申请属于生物制药技术领域，公开了一种MD疫苗的制备方法，该方法先挑选鸡胚、消毒、取鸡胚细胞并培养，得到鸡胚成纤维细胞；再将病毒毒株接种至鸡胚成纤维细胞培养并收获感染细胞，随后将收获得到的感染细胞配苗、分装、冻存，其中冻存时使用程序降温仪冻存，所述程序降温仪的程序为：将箱体预冻至4℃，放入安瓿瓶预冷30min，以0.8～1.2℃/min的速率将苗温降至‑40℃；再以8～12℃/min的速率将苗温降至‑100℃，移入液氮保存，本申请通过上述设计得到了一种MD疫苗的制备方法，该方法具有制备速度快，疫苗数量大等优点，更加适合MD疫苗的大规模制备，此外，本申请还公开了一种MD疫苗。
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公开(公告)号：CN118496325A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410623114.5
申请日：2024-05-20
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: C07K14/165 , C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/62 , C12N5/10 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种用于PEDV亚单位疫苗的抗原及其制备方法、疫苗。其中，抗原的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，其可通过CHO‑K1细胞稳定表达。本发明还基于该抗原制备了PEDV亚单位疫苗，该疫苗相对于其他疫苗具有刺激机体产生抗体快、免疫副反应小、免疫抗体水平高、免疫保护效率高以及生物安全性更优等优点，有利于PEDV防控和净化。
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公开(公告)号：CN117969830A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202311862123.1
申请日：2023-12-29
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/531 , G01N33/535 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒IgA抗体检测试剂盒，所述的试剂盒包括：抗原包被板、样品稀释液、浓缩洗涤液、酶标试剂、显色液、终止液、阳性对照和阴性对照。本发明提供的猪流行性腹泻病毒IgA抗体检测试剂盒，可同时检测血清和乳汁样品，灵敏度高，特异性强。
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公开(公告)号：CN116479045A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310232502.6
申请日：2023-03-13
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程及生物检测技术领域，公开了一种禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系的构建与应用。所述构建方法为：根据禽白血病病毒p27蛋白基因序列信息，在起始密码子ATG之前添加Kozac序列，在序列N端连接小鼠IgGκ链信号肽序列，在序列C端设计组氨酸标签与Flag标签，得到改造后的p27序列；然后将改造后的p27序列克隆至pCMV‑EGFP载体，构建得到重组表达质粒pCMV‑EGFP‑p27；将重组表达质粒经转化后转染CHO‑K1细胞，然后通过G418加压筛选，得到单克隆细胞，扩大培养，得到禽白血病病毒重组p27蛋白基因工程细胞系。该基因工程细胞系可用于禽白血病病毒的检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119643856A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202411533409.X
申请日：2024-10-31
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东精捷检验检测有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供一种猪流行性腹泻病毒IgG抗体的检测试剂盒及其制备方法和应用，其包括抗原包被板、样品稀释液、浓缩洗涤液、酶标试剂、显色液、终止液、阳性对照以及阴性对照，其中：抗原包被板为包被有PEDV‑S蛋白的酶标板；样品稀释液为含有1％BSA和10％FBS的1×PBST溶液；浓缩洗涤液为20×PBST溶液；酶标试剂为兔抗猪IgG酶标抗体；显色液为TMB单组分溶液；终止液为硫酸溶液。本发明提供的试剂盒具有灵敏度高、特异性强、且工艺简单，制造成本低的优点，且能够用于猪流行性腹泻病毒IgG抗体的检测。
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公开(公告)号：CN117969831A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202311872122.5
申请日：2023-12-29
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒夹心ELISA抗体检测试剂盒的使用方法，包括以下步骤：(1)将纯化的猪流行性腹泻病毒重组S1蛋白进行包被，得到稀释后的抗原溶液，加入酶标板中包被过夜；(2)加入封闭液封闭酶标板；(3)在包被抗原的酶标板中分别加入待检样品、阳性对照样品和阴性对照样品，再加入酶标抗原进行共同孵育，所述酶标抗原为辣根过氧化物酶标记的猪流行性腹泻病毒S1蛋白；(4)共同孵育完成后加入底物显色液，显色反应完成后终止反应并采用酶标仪测定结果。本发明为检测猪流行性腹泻病毒抗体提供了特异、敏感、快速、操作简便的试剂盒的使用方法。
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公开(公告)号：CN116064668B
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202211408464.7
申请日：2022-11-10
Applicant: 华南农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，其公开了一种重组腺病毒质粒，其核苷酸序列如SEQNO.1所示。该质粒以及基于该质粒的病毒利用1型猪捷申病毒(Porcine Teschovirus‑1)的P2A蛋白具有自我剪切的功能，将其作为连接肽将IBDV的VP2和FAdV‑4的Fiber2蛋白编码基因串联，置于复制缺陷型人5型腺病毒载体的表达盒中，通过一次转录和翻译，可以同时实现2个蛋白的表达，以期为IBD和FAdV‑4二联候选活载体疫苗的研发提供新的思路。该病毒能够稳定表达VP2和Fiber2蛋白，其病毒滴度高。同时，本发明还公开了该质粒的制备方法。
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公开(公告)号：CN116444654A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310268334.6
申请日：2023-03-20
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司
IPC: C07K16/08 , C12N15/70 , C12N5/20 , C07K14/01 , G01N33/569 , G01N33/577 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种抗非洲猪瘟病毒p72蛋白单克隆抗体及制备方法和应用。本发明采用重组质粒pET28b‑p72进行表达纯化后得到p72蛋白免疫小鼠，选择血清抗体效价最高的小鼠进行腹腔注射p72蛋白加强免疫，然后取加强免疫后小鼠脾细胞与sp2/0细胞进行融合，筛选出分泌抗p72抗体的阳性杂交瘤细胞，对阳性杂交瘤细胞株进行亚克隆，得到抗非洲猪瘟病毒p72蛋白单克隆抗体细胞株。本发明利用原核表达系统表达ASFV p72蛋白，成功制备了能稳定分泌与ASFVp72蛋白特异性结合的单克隆抗体的细胞株，该抗体纯度高、亲和性和特异性强。
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公开(公告)号：CN119530170A
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202411533407.0
申请日：2024-10-31
Applicant: 岭南现代农业科学与技术广东省实验室肇庆分中心 , 华南农业大学 , 广东精捷检验检测有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , C12N15/70 , C12N15/50 , C07K14/165 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供一种一种PEDV N蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用，该方法包括对PEDV N蛋白进行原核表达，并进行纯化，得到PEDV N蛋白；将纯化后的PEDV N蛋白与等体积弗氏佐剂乳化，多点位注射8周龄的雌性BALB/c小鼠，两周免疫一次；按5：1比例取已加强免疫3天后的小鼠的脾细胞与对数生长期的SP2/0细胞混合均匀，在PEG1500作用下进行细胞融合，融合后的细胞混合液使用HAT培养基培养；采用间接ELISA方法筛选出分泌抗体能力强的阳性孔，并采用有限稀释法进行亚克隆，获得6株分泌抗体的细胞株；采用体内诱生腹水法对PEDV N蛋白mAb进行制备。本发明制备得到的PEDV N蛋白单克隆抗体均可特异性高效结合，能够作为PEDV病毒感染和抗感染机制研究的抗体工具。
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