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公开(公告)号：CN114539379B
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202210214020.3
申请日：2022-03-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C07K14/465 , C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/113 , A61K39/12
Abstract: 本发明公开了鸡AQP1突变型基因，突变型蛋白、该基因突变细胞系及其在细胞悬浮培养中的应用。本发明还公开了AQP1突变型细胞系的制备方法。本发明通过敲除了鸡胚成纤维细胞系DF‑1细胞AQP1蛋白第一个跨膜区后间隔序列，获得的AQP1突变型细胞系更易于悬浮驯化，且遗传性状稳定，不具有致瘤性，增殖病毒能力不受影响，应用到家禽病毒疫苗生产中，替代固相培养的疫苗生产工艺，可大幅度提高生产效率。
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公开(公告)号：CN111849990B
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202010770696.1
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N15/90 , C12N15/39 , C12N7/01 , C07K14/065 , C12Q1/70 , C12Q1/686 , G01N33/569 , A61K39/275 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种gRNA，所述gRNA序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示，本发明还公开了重组质粒、ORF016基因缺失型山羊痘病毒株及其制备方法和应用。本发明首次通过基因敲除方法获得了ORF016基因缺失型山羊痘病毒株，该方法是首次将CRISPR技术在山羊痘病毒中进行应用，同时本发明采用了反向转染方法对ORF016基因进行了敲除，该方法的敲除效率达到了31.6%，远远高于现有技术中的敲除效率。同时，本发明所获得的SDLVDUORF016毒株是一株仅缺失ORF016的毒株，基因的缺失对其生长特性没有影响，该毒株可用于山羊痘疫苗、检测试剂、山羊痘病毒鉴定等用途。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114539379A
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202210214020.3
申请日：2022-03-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C07K14/465 , C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/113 , A61K39/12
Abstract: 本发明公开了鸡AQP1突变型基因，突变型蛋白、该基因突变细胞系及其在细胞悬浮培养中的应用。本发明还公开了AQP1突变型细胞系的制备方法。本发明通过敲除了鸡胚成纤维细胞系DF‑1细胞AQP1蛋白第一个跨膜区后间隔序列，获得的AQP1突变型细胞系更易于悬浮驯化，且遗传性状稳定，不具有致瘤性，增殖病毒能力不受影响，应用到家禽病毒疫苗生产中，替代固相培养的疫苗生产工艺，可大幅度提高生产效率。
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公开(公告)号：CN111848772B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202010770180.7
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东绿都生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了SAMD9突变型蛋白，所述SAMD9突变型蛋白的氨基酸序列缺少第61~448位氨基酸。本发明还公开了编码该蛋白的基因、细胞系及其在制备山羊痘病毒疫苗中的应用。本发明还公开了SAMD9突变型蛋白的Vero细胞系的制备方法。本发明通过基因编辑技术敲除了Vero细胞SAMD9基因的AlbA_2结构域及其两侧序列，以降低Vero细胞的病毒抑制功能，获得的SAMD9突变型蛋白Vero细胞对山羊痘病毒具有更高的易感性，且遗传性状稳定，能够应用到山羊痘病毒等病毒疫苗生产中，替代原代细胞疫苗生产工艺，大幅度降低生产成本，并提高疫苗的安全性。
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公开(公告)号：CN111849990A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010770696.1
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N15/90 , C12N15/39 , C12N7/01 , C07K14/065 , C12Q1/70 , C12Q1/686 , G01N33/569 , A61K39/275 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种gRNA，所述gRNA序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示，本发明还公开了重组质粒、ORF016基因缺失型山羊痘病毒株及其制备方法和应用。本发明首次通过基因敲除方法获得了ORF016基因缺失型山羊痘病毒株，该方法是首次将CRISPR技术在山羊痘病毒中进行应用，同时本发明采用了反向转染方法对ORF016基因进行了敲除，该方法的敲除效率达到了31.6%，远远高于现有技术中的敲除效率。同时，本发明所获得的SDLVDUORF016毒株是一株仅缺失ORF016的毒株，基因的缺失对其生长特性没有影响，该毒株可用于山羊痘疫苗、检测试剂、山羊痘病毒鉴定等用途。
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公开(公告)号：CN111848772A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010770180.7
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东绿都生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了SAMD9突变型蛋白，所述SAMD9突变型蛋白的氨基酸序列缺少第61~448位氨基酸。本发明还公开了编码该蛋白的基因、细胞系及其在制备山羊痘病毒疫苗中的应用。本发明还公开了SAMD9突变型蛋白的Vero细胞系的制备方法。本发明通过基因编辑技术敲除了Vero细胞SAMD9基因的AlbA_2结构域及其两侧序列，以降低Vero细胞的病毒抑制功能，获得的SAMD9突变型蛋白Vero细胞对山羊痘病毒具有更高的易感性，且遗传性状稳定，能够应用到山羊痘病毒等病毒疫苗生产中，替代原代细胞疫苗生产工艺，大幅度降低生产成本，并提高疫苗的安全性。
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公开(公告)号：CN217052190U
公开(公告)日：2022-07-26
申请号：CN202220553305.5
申请日：2022-03-14
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本实用新型涉及实验设备技术领域，具体是涉及一种细胞爬片取放装置。在操作细胞爬片过程中，因细胞爬片轻、薄、脆等特点，操作不当时会造成细胞爬片碎裂、滑落、表面划伤问题。本实用新型涉及的细胞爬片取放装置，包括软管，软管一端连接真空抽气装置，软管另一端连接有吸盘组件，软管上还设置有压力控制装置，吸盘组件包括与软管固定连通的中空支撑体，支撑体的另一端固定连通有固定盘，固定盘的下表面设置有至少两个吸盘。基于吸盘的负压吸取可以有效地完成对细胞爬片的拾取、移动和放置，避免细胞爬片在操作过程中易发生碎裂、滑落、表面划伤，采用接触面积小的吸盘吸取细胞爬片，能够最大程度的保持细胞样品的完整性。
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