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公开(公告)号：CN106589104A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611212468.2
申请日：2016-12-25
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种人源分子伴侣样蛋白及其表达纯化、晶体结构和应用。本发明的人源分子伴侣样蛋白Archease由179个氨基酸组成，分子量为20.7kDa；在大肠杆菌表达菌株Bl21(DE3)plus中可溶性表达且表达量较高。动态光散射表明Archease在结合RNA剪切连接酶辅因子GTP后粒径变大，与其功能发挥紧密相关。Archease的晶体结构分辨率为1.96Å。该结构由7个β折叠和4个α螺旋组成。Archease在辅助同一操纵子蛋白如RNA剪切连接酶、甲基转移酶发挥作用方面起到了重要的催化调节作用，是内质网应激蛋白XBP1 mRNA的成熟加工过程中所必需。解析Archease的三维晶体结构有助于阐明其作用机理，从而更好的发挥并拓宽其作用范围。
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公开(公告)号：CN111647577A
公开(公告)日：2020-09-11
申请号：CN202010442787.2
申请日：2020-05-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及来源于人体的DEAD-box RNA解旋酶DDX21的晶体结构和应用。所述RNA解旋酶DDX21包括野生型全长DDX21和DDX21解旋酶核心区域，均可结合三磷酸腺苷(ATP)和有效解旋双链RNA。DDX21解旋酶核心区域的晶体结构共有四套，RNA解旋的初始状态(DDX21-apo，分辨率，空间群为C2)，结合三磷酸腺苷(β，γ-亚氨基)三磷酸(AMPPNP)和ssRNA的解旋后状态(DDX21-AMPPNP-ssRNA， 分辨率；空间群为P21)，以及结合二磷酸腺苷(ADP)的水解后状态(DDX21-ADP， 分辨率；空间群为P21)，和一套解旋循环以外的结合单磷酸腺苷AMP的结构(DDX21-AMP， 分辨率；空间群为P21)。DDX21的晶体结构及其活性口袋，以及相关结合或作用位点，为抗肿瘤药物的筛选、设计和抗RNA病毒类药物的研发提供有效的结构基础，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN109913426A
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201910139184.2
申请日：2019-02-25
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种嗜热菌RNA连接酶RTCB在低温催化RNA连接和DNA环化中的应用。本发明包括：在70℃~37℃温度条件下，嗜热RTCB用于完成DNA环化激活反应，用于完成RNA环化的激活反应和RNA连接反应。本发明可应用于商业化生产，鉴于嗜热菌蛋白RTCB在纯化上的简便操作及广泛的温度适应性，将极大的拓阔其应用范围。在生物医药工业领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN106589104B
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN201611212468.2
申请日：2016-12-25
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种人源分子伴侣样蛋白及其表达纯化、晶体结构和应用。本发明的人源分子伴侣样蛋白Archease由179个氨基酸组成，分子量为20.7kDa；在大肠杆菌表达菌株Bl21(DE3)plus中可溶性表达且表达量较高。动态光散射表明Archease在结合RNA剪切连接酶辅因子GTP后粒径变大，与其功能发挥紧密相关。Archease的晶体结构分辨率为1.96Å。该结构由7个β折叠和4个α螺旋组成。Archease在辅助同一操纵子蛋白如RNA剪切连接酶、甲基转移酶发挥作用方面起到了重要的催化调节作用，是内质网应激蛋白XBP1 mRNA的成熟加工过程中所必需。解析Archease的三维晶体结构有助于阐明其作用机理，从而更好的发挥并拓宽其作用范围。
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公开(公告)号：CN111647577B
公开(公告)日：2023-02-10
申请号：CN202010442787.2
申请日：2020-05-22
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明涉及来源于人体的DEAD‑box RNA解旋酶DDX21的晶体结构和应用。所述RNA解旋酶DDX21包括野生型全长DDX21和DDX21解旋酶核心区域，均可结合三磷酸腺苷(ATP)和有效解旋双链RNA。DDX21解旋酶核心区域的晶体结构共有四套，RNA解旋的初始状态(DDX21‑apo，分辨率，空间群为C2)，结合三磷酸腺苷(β，γ‑亚氨基)三磷酸(AMPPNP)和ssRNA的解旋后状态(DDX21‑AMPPNP‑ssRNA，分辨率；空间群为P21)，以及结合二磷酸腺苷(ADP)的水解后状态(DDX21‑ADP，分辨率；空间群为P21)，和一套解旋循环以外的结合单磷酸腺苷AMP的结构(DDX21‑AMP，分辨率；空间群为P21)。DDX21的晶体结构及其活性口袋，以及相关结合或作用位点，为抗肿瘤药物的筛选、设计和抗RNA病毒类药物的研发提供有效的结构基础，具有广泛的应用前景。
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