公开(公告)号：CN106676082B

公开(公告)日：2020-09-01

申请号：CN201611212469.7

申请日：2016-12-25

Applicant: 复旦大学

Inventor： 李继喜 ,  李正阳 ,  赵玉

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种一种来源于海洋细菌E4A9T的嗜低温蛋白酯酶E10及其表达纯化、晶体结构和应用。所述酯酶E10含205个氨基酸，分子量约为22.36kDa；在表达菌株BL21(DE3)中具有高度可溶性表达，嗜低温，并具有良好的耐盐、耐重金属性质。所述酯酶E10通过X射线衍射方法获得了其三维结构，分辨率达到1.9Å。该结构由5个β折叠、9个α螺和3个310‑螺旋组成，其中，第29位丝氨酸、第178位天冬氨酸与第181位组氨酸所构成的催化三连体组成酶学活性中心；第29位丝氨酸、66位甘氨酸及97位天冬酰胺共同组成氧离子通道。该酯酶E10的三维结构可在手性药物前体筛选、工业酶制剂中底物改造及提高酶活力方面具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN106676082A

公开(公告)日：2017-05-17

申请号：CN201611212469.7

申请日：2016-12-25

Applicant: 复旦大学

Inventor： 李继喜 ,  李正阳 ,  赵玉

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种来源于海洋细菌E4A9T的嗜低温蛋白酯酶E10及其表达纯化、晶体结构和应用。所述酯酶E10含205个氨基酸，分子量约为22.36kDa；在表达菌株BL21(DE3)中具有高度可溶性表达，嗜低温，并具有良好的耐盐、耐重金属性质。所述酯酶E10通过X射线衍射方法获得了其三维结构，分辨率达到1.9 Å。该结构由5个β折叠、9个α螺和3个310‑螺旋组成，其中，第29位丝氨酸、第178位天冬氨酸与第181位组氨酸所构成的催化三连体组成酶学活性中心；第29位丝氨酸、66位甘氨酸及97位天冬酰胺共同组成氧离子通道。该酯酶E10的三维结构可在手性药物前体筛选、工业酶制剂中底物改造及提高酶活力方面具有广泛的应用前景。