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公开(公告)号:CN100366738C
公开(公告)日:2008-02-06
申请号:CN02151237.X
申请日:2002-12-12
Applicant: 上海复旦新杨生物科技有限责任公司 , 复旦大学
IPC: C12N15/09 , C12N15/63 , C12N15/87 , C12N15/88 , C12N15/12 , C07K14/435 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种人瘦素蛋白(leptin)在鸡蛋蛋清中特异表达,属于动物生物反应器或基因工程技术领域。本发明构建了可在鸡蛋蛋清中特异表达人瘦素蛋白的表达载体pXABOBSV40;利用脂质体-精子载体通过人工授精获得带有外源人瘦素蛋白基因的转基因鸡。检测结果显示,外源基因导入的阳性率达60%以上;24%的后代转基因阳性鸡所产鸡蛋蛋清中表达了重组人瘦素蛋白,该重组人瘦素蛋白具有与天然人瘦素蛋白有相同的立体结构,表达水平达到每升蛋清30毫克。
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公开(公告)号:CN1600858A
公开(公告)日:2005-03-30
申请号:CN200410053430.6
申请日:2004-08-04
Applicant: 上海复旦新杨生物科技有限责任公司 , 上海复远生物化学研究所有限公司 , 复旦大学
Abstract: 本发明涉及一种抑制黑色素形成的siRNA及其制备方法以及在祛除黑色素方面的应用,内容包括:构建了可以在大肠杆菌中高效表达的与抑制黑色素形成有关的长双链RNA(dsRNA)的表达载体pET-MELIII;转化大肠杆菌在优化条件下大规模发酵生产长双链RNA,每100克菌体(湿重)可生产204毫克dsRNA;均质机均质化破壁抽提RNA,CF-11树脂吸附纯化dsRNA;利用大肠杆菌发酵制备的RNase III对dsRNA进行水解,得到18-25bp的siRNAs;通过脂质体包埋siRNAs;实际使用证明制备的siRNA具有明显祛除黑色素斑的作用。
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公开(公告)号:CN1320113C
公开(公告)日:2007-06-06
申请号:CN03129043.4
申请日:2003-06-05
Applicant: 复旦大学 , 上海复旦新杨生物科技有限责任公司 , 上海恒达科技发展股份有限公司
Abstract: 本发明涉及一种利用大肠杆菌发酵大规模制备RNA干扰用小干扰RNA分子的新方法。本发明构建了长双链RNA表达载体,并转化大肠杆菌宿主菌,通过大规模发酵,用碱-SDS法抽提发酵菌体得到全RNA和质粒DNA的混合物。该混合物用CF-11柱进行纯化得到长双链RNA。最后利用大肠杆菌Ⅲ型RNA酶将长双链RNA切成12-30bp的小干扰RNA。得到的siRNA用分光光度法检测其纯度与浓度,OD260/OD280=1.978,表明样品的纯度相当高。每100g大肠杆菌菌体得到siRNA样品约为210mg。
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公开(公告)号:CN1483830A
公开(公告)日:2004-03-24
申请号:CN03141696.9
申请日:2003-07-18
Applicant: 上海复旦新杨生物科技有限责任公司 , 复旦大学
IPC: C12P21/00
Abstract: 本发明涉及一种酶法水解鸡蛋蛋清蛋白制备活性多肽—蛋清肽的方法。本发明通过选择合适的碱性蛋白酶和优化水解条件,使水解效率达到60%以上。生化分析和生物学试验结果显示,由本发明酶解方法所得到的水解多肽产物为稳定的具有生物活性的小分子肽,水解产物具有免疫促进、抗疲劳、抗辐射及对抗化学肝损伤辅助作用等生物学活性。
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公开(公告)号:CN1418953A
公开(公告)日:2003-05-21
申请号:CN02151237.X
申请日:2002-12-12
Applicant: 上海复旦新杨生物科技有限责任公司 , 复旦大学
IPC: C12N15/09 , C12N15/63 , C12N15/87 , C12N15/88 , C12N15/12 , C07K14/435 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种人瘦素蛋白(leptin)在鸡蛋蛋清中特异表达,属于动物生物反应器或基因工程技术领域。本发明构建了可在鸡蛋蛋清中特异表达人瘦素蛋白的表达载体pXABOBSV40;利用脂质体-精子载体通过人工授精获得带有外源人瘦素蛋白基因的转基因鸡。检测结果显示,外源基因导入的阳性率达60%以上;24%的后代转基因阳性鸡所产鸡蛋蛋清中表达了重组人瘦素蛋白,该重组人瘦素蛋白具有与天然人瘦素蛋白有相同的立体结构,表达水平达到每升蛋清30毫克。
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公开(公告)号:CN1458279A
公开(公告)日:2003-11-26
申请号:CN03129043.4
申请日:2003-06-05
Applicant: 复旦大学 , 上海复旦新杨生物科技有限责任公司 , 上海恒达科技发展股份有限公司
Abstract: 本发明涉及一种利用大肠杆菌发酵大规模制备RNA干扰用小干扰RNA分子的新方法。本发明构建了长双链RNA表达载体,并转化大肠杆菌宿主菌,通过大规模发酵,用碱-SDS法抽提发酵菌体得到全RNA和质粒DNA的混合物。该混合物用CF-11柱进行纯化得到长双链RNA。最后利用大肠杆菌III型RNA酶将长双链RNA切成12-30bp的小干扰RNA。得到的siRNA用分光光度法检测其纯度与浓度,OD260/OD280=1.978,表明样品的纯度相当高。每100g大肠杆菌菌体得到siRNA样品约为210mg。
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公开(公告)号:CN1321192C
公开(公告)日:2007-06-13
申请号:CN03141696.9
申请日:2003-07-18
Applicant: 上海复旦新杨生物科技有限责任公司 , 复旦大学
IPC: C12P21/00
Abstract: 本发明涉及一种酶法水解鸡蛋蛋清蛋白制备活性多肽—蛋清肽的方法。本发明通过选择合适的碱性蛋白酶和优化水解条件,使水解效率达到60%以上。生化分析和生物学试验结果显示,由本发明酶解方法所得到的水解多肽产物为稳定的具有生物活性的小分子肽,水解产物具有免疫促进、抗疲劳、抗辐射及对抗化学肝损伤辅助作用等生物学活性。
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公开(公告)号:CN101054579A
公开(公告)日:2007-10-17
申请号:CN200710038637.X
申请日:2007-03-29
Applicant: 上海复旦新杨生物科技有限责任公司 , 上海复远生物化学研究所有限公司 , 复旦大学
IPC: C12N15/11 , C12N15/70 , A61K31/7088 , A61P17/14
Abstract: 本发明属于生物制剂技术领域,具体涉及一种防治脱发和促进生发的siRNA及其制备方法和应用。内容包括:构建可以在大肠杆菌中高效表达的与防治脱发和促进生发功能相关的长双链RNA(dsRNA)的表达载体pET-SRAR;转化大肠杆菌后发酵生产该长双链RNA,得到dsRNA;发酵的大肠杆菌菌体经均质机均质化破壁抽提大肠杆菌总RNA,抽提物经纯化获得dsRNA;再经水解纯化得到小干扰RNA(siRNAs);用脂质体包埋siRNAs,复配后得到防治脱发和促进生发的siRNAs制剂。本发明制备的制剂具有明显防治脱发和促进生发的作用。
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