一种低温碱性磷酸酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN102140444A

    公开(公告)日:2011-08-03

    申请号:CN201010102792.5

    申请日:2010-01-28

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 丁澦 陆致晟

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及一种新的碱性磷酸酶及其制备方法。本发明将如序列表SEQ ID NO 1所示的低温碱性磷酸酶的cDNA序列克隆到基因工程载体,表达,获得低温碱性磷酸酶。本发明依据大肠杆菌的密码子偏爱理论对TAB5低温碱性磷酸酶的DNA序列进行改造,使其在大肠杆菌中高表达,使用镍亲和层析和离子交换层析法对碱性磷酸酶进行纯化,最终可从每升大肠杆菌菌液中得到纯度在99%以上的TAB5碱性磷酸酶90mg以上。本发明可应用于生命科学领域分子生物学领域的研究,特别是需要将碱性磷酸酶热失活的多步反应,如DNA测序前的样品处理等。

    一种具有功能性的双超分子相互作用水凝胶、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN114605665B

    公开(公告)日:2022-11-18

    申请号:CN202210121032.1

    申请日:2022-02-09

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明公开了一种具有功能性的双超分子相互作用水凝胶、制备方法及应用。水凝胶是由荧光蛋白‑高分子聚合物结合体、纳米抗体多聚体和α‑环糊精反应得到,荧光蛋白‑高分子聚合物结合体由修饰有反应位点的绿色荧光蛋白GFP和马来酰亚胺‑聚乙二醇反应得到,修饰有反应位点的绿色荧光蛋白GFP的序列如SEQ ID NO:1所示,纳米抗体多聚体的序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的水凝胶通过双超分子相互作用实现很高的弹性模量和粘性模量,并且无毒副作用,可用于生物材料;其可形貌转变,可以有效地招募和活化巨噬细胞,表现出肿瘤免疫治疗的前景;可用于细胞成像,具有优异的推广应用价值和潜力。

    一种具有功能性的双超分子相互作用水凝胶、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN114605665A

    公开(公告)日:2022-06-10

    申请号:CN202210121032.1

    申请日:2022-02-09

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明公开了一种具有功能性的双超分子相互作用水凝胶、制备方法及应用。水凝胶是由荧光蛋白‑高分子聚合物结合体、纳米抗体多聚体和α‑环糊精反应得到,荧光蛋白‑高分子聚合物结合体由修饰有反应位点的绿色荧光蛋白GFP和马来酰亚胺‑聚乙二醇反应得到,修饰有反应位点的绿色荧光蛋白GFP的序列如SEQ ID NO:1所示,纳米抗体多聚体的序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的水凝胶通过双超分子相互作用实现很高的弹性模量和粘性模量,并且无毒副作用,可用于生物材料;其可形貌转变,可以有效地招募和活化巨噬细胞,表现出肿瘤免疫治疗的前景;可用于细胞成像,具有优异的推广应用价值和潜力。

    一种低温碱性磷酸酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN102140444B

    公开(公告)日:2013-01-02

    申请号:CN201010102792.5

    申请日:2010-01-28

    Applicant: 复旦大学

    Inventor: 丁澦 陆致晟

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及一种新的碱性磷酸酶及其制备方法。本发明将如序列表SEQ ID NO 1所示的低温碱性磷酸酶的cDNA序列克隆到基因工程载体,表达,获得低温碱性磷酸酶。本发明依据大肠杆菌的密码子偏爱理论对TAB5低温碱性磷酸酶的DNA序列进行改造,使其在大肠杆菌中高表达,使用镍亲和层析和离子交换层析法对碱性磷酸酶进行纯化,最终可从每升大肠杆菌菌液中得到纯度在99%以上的TAB5碱性磷酸酶90mg以上。本发明可应用于生命科学领域分子生物学领域的研究,特别是需要将碱性磷酸酶热失活的多步反应,如DNA测序前的样品处理等。

    一种以重组蛋白为标签的表达纯化系统

    公开(公告)号:CN101921819A

    公开(公告)日:2010-12-22

    申请号:CN200910052999.3

    申请日:2009-06-12

    Applicant: 复旦大学

    Abstract: 本发明属生物技术领域,涉及一种蛋白表达纯化系统,尤其是一种以重组蛋白为标签的表达纯化系统。本发明的蛋白表达纯化系统,是将目的蛋白的两端,在N端连接一个新型荧光蛋白sGFP标签,在C端连接上一个组氨酸His短肽,并加有多核苷酸酶切位点,蛋白全长融合表达。同时可以根据需要在目的蛋白与标签之间加入蛋白酶切位点。该系统的目的蛋白表达效率能够得到改进,提高目的蛋白产率,全长蛋白在可见光下为绿色,可以实施监测蛋白表达效果、纯化过程;仅通过肉眼监视蛋白的表达效率、断裂程度及纯化流程。

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