公开(公告)号：CN102660469A

公开(公告)日：2012-09-12

申请号：CN201210176806.7

申请日：2012-05-31

Applicant: 哈尔滨工业大学

Inventor： 杨谦 ,  王允 ,  宋金柱 ,  从华 ,  孙艳 ,  曹广丽 ,  姚琳 ,  杨萍 ,  赵磊 ,  王震宇 ,  刘冰南

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/31 ,  C12N15/81 ,  C12R1/84

Abstract: 一种表达植物抗性诱导因子的毕赤酵母基因工程菌株的构建方法，涉及毕赤酵母基因工程菌株的构建方法。是要解决目前绿木霉的植物抗性诱导因子基因表达量低，无法满足其研究与应用的问题。方法：提取棘孢木霉菌丝总RNA，反转录；PCR扩增，纯化扩增产物得目的基因EplT4；目的基因与载体连接构建重组载体；转化，提取阳性转化子质粒，将质粒线性化并回收；转化；将转化细胞涂在上长出重组菌，将重组菌转接到含梯度浓度抗生素的培养基上，在最高浓度抗生素的培养基上生长的菌落即为基因工程菌株Pp-EplT4。本发明方法获得的毕赤酵母基因工程菌株可高效表达棘孢木霉的植物抗性诱导因子基因，表达量为20mg/L。用于植物抗病领域。