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公开(公告)号：CN105647941B
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN201610079241.9
申请日：2016-02-04
Abstract: 本发明公开了一种羊草金属硫蛋白基因LcMT3的克隆方法，该方法包括以下步骤：羊草LcMT3基因的克隆及生物信息学分析；半定量RT‑PCR分析羊草LcMT3基因的组织表达模式；半定量RT‑PCR分析羊草LcMT3基因的胁迫诱导表达模式；LcMT3基因酵母表达及耐盐性鉴定；LcMT3基因原核表达、纯化及耐盐性鉴定。本发明实施例提供的羊草金属硫蛋白基因LcMT3的克隆方法操作过程严谨科学，为金属硫蛋白在科研和生产中的应用提供了重要作用。
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公开(公告)号：CN105647941A
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201610079241.9
申请日：2016-02-04
Abstract: 本发明公开了一种羊草金属硫蛋白基因LcMT3的克隆方法，该方法包括以下步骤：羊草LcMT3基因的克隆及生物信息学分析；半定量RT-PCR分析羊草LcMT3基因的组织表达模式；半定量RT-PCR分析羊草LcMT3基因的胁迫诱导表达模式；LcMT3基因酵母表达及耐盐性鉴定；LcMT3基因原核表达、纯化及耐盐性鉴定。本发明实施例提供的羊草金属硫蛋白基因LcMT3的克隆方法操作过程严谨科学，为金属硫蛋白在科研和生产中的应用提供了重要作用。
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公开(公告)号：CN109452176A
公开(公告)日：2019-03-12
申请号：CN201811629647.5
申请日：2018-12-23
Applicant: 吉林省农业科学院
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开一种药用植物藜芦幼胚离体培养方法，包括以下操作步骤：(1)收集藜芦未成熟蒴果，从果荚中拨出未成熟种子，进行灭菌处理；(2)在解剖镜下用解剖刀拨出种子内的幼胚，然后放入浸泡液中，浸泡处理30-40min；(3)将经过步骤(2)处理过的幼胚加入到幼胚培养基中，24-27℃暗培养；(4)等到幼胚长成4-5cm小苗时，将小苗移到生根培养基中，待幼苗根系发育完好，移栽到草炭土中，其中生根培养基由MS培养基、60-70mg/L铁盐、0.8-1.2mg/L吲哚丁酸、2-5mg/L透明质酸钠。本发明提供的一种药用植物藜芦幼胚离体培养方法，操作简单，法能将未成熟幼胚培养成苗，成活率高，其中幼胚的成活率平均值可以达到93％左右，小苗生根率平均值可以达到95％左右。
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公开(公告)号：CN107557359A
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201710842277.2
申请日：2017-09-18
Applicant: 吉林省农业科学院
IPC: C12N15/11 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明涉及一种转基因大豆WH8055转化事件外源插入载体的右侧翼序列、所述右侧翼序列的应用、引物对、PCR试剂盒以及引物和PCR试剂盒的使用方法。其中，本发明所述右侧翼序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示，其能够特异性地指示第3号染色体第43998179位核苷酸处插入pCHAL1的T-DNA片段的转基因大豆。本发明首次测序公布了转基因大豆WH8055转化事件外源插入载体的右侧翼序列，建立了转基因大豆WH8055特异性定性PCR检测方法，该方法灵敏，准确，简单，可靠，具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号：CN107460193A
公开(公告)日：2017-12-12
申请号：CN201710830540.6
申请日：2017-09-15
Applicant: 吉林省农业科学院
Abstract: 本发明涉及一种转基因大豆WH8013转化事件外源插入载体的右侧翼序列、所述右侧翼序列的应用、引物对、PCR试剂盒以及引物对和PCR试剂盒的使用方法。其中，本发明所述右侧翼序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示，其能够特异性地指示第8号染色体第21177109位核苷酸处插入pCHAL1的T-DNA片段的转基因大豆。本发明首次测序公布了转基因大豆WH8013转化事件外源插入载体的右侧翼序列，建立了转基因大豆WH8013特异性定性PCR检测方法，该方法灵敏，准确，简单，可靠，具有广阔的市场前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109452176B
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN201811629647.5
申请日：2018-12-23
Applicant: 吉林省农业科学院
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开一种药用植物藜芦幼胚离体培养方法，包括以下操作步骤：(1)收集藜芦未成熟蒴果，从果荚中拨出未成熟种子，进行灭菌处理；(2)在解剖镜下用解剖刀拨出种子内的幼胚，然后放入浸泡液中，浸泡处理30‑40min；(3)将经过步骤(2)处理过的幼胚加入到幼胚培养基中，24‑27℃暗培养；(4)等到幼胚长成4‑5cm小苗时，将小苗移到生根培养基中，待幼苗根系发育完好，移栽到草炭土中，其中生根培养基由MS培养基、60‑70mg/L铁盐、0.8‑1.2mg/L吲哚丁酸、2‑5mg/L透明质酸钠。本发明提供的一种药用植物藜芦幼胚离体培养方法，操作简单，法能将未成熟幼胚培养成苗，成活率高，其中幼胚的成活率平均值可以达到93％左右，小苗生根率平均值可以达到95％左右。
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公开(公告)号：CN107460193B
公开(公告)日：2020-04-21
申请号：CN201710830540.6
申请日：2017-09-15
Applicant: 吉林省农业科学院
IPC: C12N15/11 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明涉及一种转基因大豆WH8013转化事件外源插入载体的右侧翼序列、所述右侧翼序列的应用、引物对、PCR试剂盒以及引物对和PCR试剂盒的使用方法。其中，本发明所述右侧翼序列的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示，其能够特异性地指示第8号染色体第21177109位核苷酸处插入pCHAL1的T‑DNA片段的转基因大豆。本发明首次测序公布了转基因大豆WH8013转化事件外源插入载体的右侧翼序列，建立了转基因大豆WH8013特异性定性PCR检测方法，该方法灵敏，准确，简单，可靠，具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号：CN114292279B
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202210018169.4
申请日：2022-01-07
Applicant: 吉林省农业科学院
IPC: C07D491/107
Abstract: 本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种藜芦抗癌有效成分环杷明提取与分离方法。其主要针对环杷明的提取量不高，提取步骤复杂，提取的难度和投入量大的问题，提出如下技术方案：步骤一：选冻干藜芦为原料，使用离心管添加乙醇混匀，获得提取液；步骤二：调整PH值后加入石油醚；步骤三：产物中加入二氯甲烷提取液、蒸干，记为A部分；步骤四：下层液体加二氯甲烷、蒸干，记为B部分；步骤五：乙醇层蒸干，记为C部分；步骤六：A、B和C提取物溶于HPLC测定溶液，获得环杷明。本发明提出的环杷明提取和分离方法能够高效提取并分离藜芦抗癌有效成分环杷明，且使用设备成本低，提取分离方法简便易操作，适合推广使用，主要应用于环杷明的提取。
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公开(公告)号：CN107236733B
公开(公告)日：2020-03-27
申请号：CN201710681511.8
申请日：2017-08-10
Applicant: 吉林省农业科学院
IPC: C12N15/11 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了转基因大豆W82‑HAL1‑8062转化事件外源插入载体左侧翼序列和右侧翼序列，其序列如SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：8所示。本发明的转基因大豆W82‑HAL1‑8062转化事件外源插入载体侧翼序列可以用于特异性定性检测大豆及相关产品是否含有W82‑HAL1‑8062转化事件。本发明首次测序公布了转基因大豆W82‑HAL1‑8062转化事件外源插入侧翼序列，建立了转基因大豆W82‑HAL1‑8062转化体特异性定性PCR检测方法，该方法灵敏，准确，简单，可靠，具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号：CN110904150A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911318847.3
申请日：2019-12-19
Applicant: 吉林省农业科学院
Abstract: 本发明公开了一种兴安藜芦农杆菌转化方法，包括以下操作步骤：收集兴安藜芦种子，消毒后在解刨显微镜下抠出未成熟胚，培养后，得到胚性愈伤组织；用胚性愈伤组织作为侵染的外植体，培养农杆菌菌株，将胚性愈伤组织放入农杆菌菌液中，恒温摇床培养后，把胚性愈伤组织共培养，暗培养后，将愈伤组织用无菌水水洗，用滤纸滤干，暗培养，4周继代一次；重复上述步骤3-4轮后，将植物组织放入含有草丁膦的选择培养基中，光照培养，4-5周后，将得到的幼苗移到锥形瓶中生根培养，1个月后将长势好的苗移栽到温室。本发明克服了现有技术中以茎段或叶柄为外植体的农杆菌转化方法后期染菌而被迫不断继代的缺点，为兴安藜芦遗传转化研究提供了基础。
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