公开(公告)号：CN111961682A

公开(公告)日：2020-11-20

申请号：CN202010912928.2

申请日：2020-09-03

Applicant: 吉林大学第一医院

Inventor： 崔岩 ,  李珊山 ,  宋洋 ,  周俊峰

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C07K16/14 ,  C07K16/06

Abstract: 本发明公开了一种球形孢子丝菌HSP70_1-8重组蛋白的制备方法及其应用，通过提取球形孢子丝菌总RNA，利用反转录PCR获得cDNA，利用特异性引物扩增得到球形孢子丝菌热休克蛋白70(HSP70)异构体1-8基因全长序列，运用分子生物学方法进行基因片段的体外重组并制备基因片段对应的重组蛋白，将该重组蛋白应用于家兔可制备出相应的抗体，该抗体可用于制备对球形孢子丝菌感染早期快速诊断产品。本发明构建了球形孢子丝菌HSP70_1-8重组蛋白原核表达体系，通过诱导可以快速大量表达；利用Ni亲和层析柱一步完成纯化，纯化过程简单快捷；免疫动物制备高效价多克隆抗体，所制备的抗体与目的蛋白具有良好的反应特异性。