一种球形孢子丝菌HSP70_5重组蛋白的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN111909949B

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202010912922.5

    申请日:2020-09-03

    Abstract: 本发明公开了一种球形孢子丝菌HSP70_5重组蛋白的制备方法及其应用,通过提取球形孢子丝菌总RNA,利用反转录PCR获得cDNA,利用特异性引物扩增得到球形孢子丝菌热休克蛋白70(HSP70)异构体5基因全长序列,运用分子生物学方法进行基因片段的体外重组并制备基因片段对应的重组蛋白,将该重组蛋白应用于家兔可制备出相应的抗体,该抗体可用于制备对球形孢子丝菌感染早期快速诊断产品。本发明构建了球形孢子丝菌HSP70_5重组蛋白原核表达体系,通过诱导可以快速大量表达;利用Ni亲和层析柱一步完成纯化,纯化过程简单快捷;免疫动物制备高效价多克隆抗体,所制备的抗体与目的蛋白具有良好的反应特异性。

    一种球形孢子丝菌HSP70_5重组蛋白的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN111909949A

    公开(公告)日:2020-11-10

    申请号:CN202010912922.5

    申请日:2020-09-03

    Abstract: 本发明公开了一种球形孢子丝菌HSP70_5重组蛋白的制备方法及其应用,通过提取球形孢子丝菌总RNA,利用反转录PCR获得cDNA,利用特异性引物扩增得到球形孢子丝菌热休克蛋白70(HSP70)异构体5基因全长序列,运用分子生物学方法进行基因片段的体外重组并制备基因片段对应的重组蛋白,将该重组蛋白应用于家兔可制备出相应的抗体,该抗体可用于制备对球形孢子丝菌感染早期快速诊断产品。本发明构建了球形孢子丝菌HSP70_5重组蛋白原核表达体系,通过诱导可以快速大量表达;利用Ni亲和层析柱一步完成纯化,纯化过程简单快捷;免疫动物制备高效价多克隆抗体,所制备的抗体与目的蛋白具有良好的反应特异性。

    一种球形孢子丝菌Gp70重组蛋白的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN111978382B

    公开(公告)日:2022-03-04

    申请号:CN202010912909.X

    申请日:2020-09-03

    Abstract: 本发明涉及一种球形孢子丝菌Gp70(Glycoprotein 70)重组蛋白的制备方法及其应用,通过提取球形孢子丝菌总RNA,利用反转录PCR获得cDNA,利用特异性引物扩增得到球形孢子丝菌糖蛋白70(Gp70)基因全长序列,运用分子生物学方法进行基因片段的体外重组并制备基因片段对应的重组蛋白,将该重组蛋白应用于家兔可制备出相应的抗体,该抗体可用于制备对球形孢子丝菌感染早期快速诊断产品。本案构建了球形孢子丝菌Gp70重组蛋白原核表达体系,通过诱导可以快速大量表达;利用Ni亲和层析柱一步完成纯化,纯化过程简单快捷;免疫动物制备高效价多克隆抗体,所制备的抗体与目的蛋白具有良好的反应特异性。

    一种球形孢子丝菌HSP70_1-8重组蛋白的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN111961682A

    公开(公告)日:2020-11-20

    申请号:CN202010912928.2

    申请日:2020-09-03

    Abstract: 本发明公开了一种球形孢子丝菌HSP70_1-8重组蛋白的制备方法及其应用,通过提取球形孢子丝菌总RNA,利用反转录PCR获得cDNA,利用特异性引物扩增得到球形孢子丝菌热休克蛋白70(HSP70)异构体1-8基因全长序列,运用分子生物学方法进行基因片段的体外重组并制备基因片段对应的重组蛋白,将该重组蛋白应用于家兔可制备出相应的抗体,该抗体可用于制备对球形孢子丝菌感染早期快速诊断产品。本发明构建了球形孢子丝菌HSP70_1-8重组蛋白原核表达体系,通过诱导可以快速大量表达;利用Ni亲和层析柱一步完成纯化,纯化过程简单快捷;免疫动物制备高效价多克隆抗体,所制备的抗体与目的蛋白具有良好的反应特异性。

    一种球形孢子丝菌Gp70重组蛋白的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN111978382A

    公开(公告)日:2020-11-24

    申请号:CN202010912909.X

    申请日:2020-09-03

    Abstract: 本发明涉及一种球形孢子丝菌Gp70(Glycoprotein 70)重组蛋白的制备方法及其应用,通过提取球形孢子丝菌总RNA,利用反转录PCR获得cDNA,利用特异性引物扩增得到球形孢子丝菌糖蛋白70(Gp70)基因全长序列,运用分子生物学方法进行基因片段的体外重组并制备基因片段对应的重组蛋白,将该重组蛋白应用于家兔可制备出相应的抗体,该抗体可用于制备对球形孢子丝菌感染早期快速诊断产品。本案构建了球形孢子丝菌Gp70重组蛋白原核表达体系,通过诱导可以快速大量表达;利用Ni亲和层析柱一步完成纯化,纯化过程简单快捷;免疫动物制备高效价多克隆抗体,所制备的抗体与目的蛋白具有良好的反应特异性。

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