重组表皮生长因子EGF及其制备方法

    公开(公告)号:CN103834664B

    公开(公告)日:2016-05-04

    申请号:CN201410117214.7

    申请日:2014-03-27

    Abstract: 本发明公开了重组表皮生长因子EGF基因,它是人工体外合成的,以组氨酸标签(His6-Tag)-SUMO蛋白酶识别底物为蛋白质可溶性表达的辅助片段,以EGF为目的片段的融合表达蛋白质,并使EGF以无启动子的正确阅读框架与载体正序相连并转化进入表达菌种,最终构建与表达三种物质串联的融合蛋白。在咪唑存在下进行金属螯合介质纯化,一步获得90%纯度的融合蛋白质,利用高特异性和高活性SUMO蛋白酶对所纯化的融合蛋白质进行酶切,使标签部分HS与EGF目的蛋白解离,并利用金属螯合介质将标签部分与EGF目的蛋白分离。获得了纯度达95%的无首位Met的天然结构和活性2.2╳108IU/mg的目的蛋白的。每毫克费用由1.05元降至0.32元。

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