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公开(公告)号:CN103834664B
公开(公告)日:2016-05-04
申请号:CN201410117214.7
申请日:2014-03-27
Applicant: 吉林大学 , 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: C12N15/12 , C07K14/485 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了重组表皮生长因子EGF基因,它是人工体外合成的,以组氨酸标签(His6-Tag)-SUMO蛋白酶识别底物为蛋白质可溶性表达的辅助片段,以EGF为目的片段的融合表达蛋白质,并使EGF以无启动子的正确阅读框架与载体正序相连并转化进入表达菌种,最终构建与表达三种物质串联的融合蛋白。在咪唑存在下进行金属螯合介质纯化,一步获得90%纯度的融合蛋白质,利用高特异性和高活性SUMO蛋白酶对所纯化的融合蛋白质进行酶切,使标签部分HS与EGF目的蛋白解离,并利用金属螯合介质将标签部分与EGF目的蛋白分离。获得了纯度达95%的无首位Met的天然结构和活性2.2╳108IU/mg的目的蛋白的。每毫克费用由1.05元降至0.32元。
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公开(公告)号:CN104531730B
公开(公告)日:2018-07-17
申请号:CN201410771046.3
申请日:2014-12-15
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: C12N15/55 , C07K16/40 , A61K39/40 , A61P39/02 , G01N33/573
Abstract: 本发明公开了产气荚膜梭菌α毒素人源化单链抗体8B,它是从噬菌体抗体库Source bioscience筛选出来的,是全人源抗产气荚膜梭菌α毒素抗体,既可以实现中和毒素的治疗作用,同时克服了异源性抗体的多种副作用,免除了异源性抗体进行人源化改造的繁琐步骤和高成本,由于单链抗体分子量小,体内穿透能力强,迅速到达受损组织和细胞发挥抗毒素作用,因此达到经济和高效的双重目的。α毒素与产气荚膜梭菌其他类型毒素具有一定的同源性,该抗体药物有可能对其他类型的毒素具有抑制和治疗效果,也可作为检测试剂检测产气荚膜梭菌α毒素。
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公开(公告)号:CN104861070A
公开(公告)日:2015-08-26
申请号:CN201510153593.X
申请日:2015-04-02
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: C07K16/40 , A61K39/395 , A61P39/02 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体3A-scFv,它是利用人工合成的重组蛋白BontB,及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体的底物GFP-HIS6-SNAP25(62)-VAMP(57)-C,人源化抗B型肉毒毒素酶抗体库中筛选出来的,亲和常数为(5.35±0.903)×105L/mol,为生产抗B 型肉毒毒素特效救治药物及快速检测B型肉毒毒素奠定了基础。
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公开(公告)号:CN103820479A
公开(公告)日:2014-05-28
申请号:CN201410082513.1
申请日:2014-03-08
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明公开了靶向性抗肿瘤融合蛋白质LPO,它是将人工合成的目的基因片段LHRH-PEA转膜肽-ONC(简称为LPO),插入PET28a质粒中,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,表达的融合蛋白,经实验证明融合蛋白LPO对有LHRH受体的,包括结肠癌LOVO细胞、肺癌A549细胞、口腔癌KB细胞、前列腺癌PC-3M细胞等肿瘤细胞系均有明显的抑制作用,而对无LHRH受体的淋巴瘤Hut102和白血病HL60则无抑制作用,具有靶向特异性,安全可靠。
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公开(公告)号:CN106117352B
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN201610520546.9
申请日:2016-07-05
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明提供了抗A型肉毒毒素的人源单链抗体E3‑scFv,它是利用人工合成的重组蛋白BontAL,及筛选抗A型肉毒毒素的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25(62)‑VAMP(57)‑C,在人源化抗A型肉毒毒素酶抗体库中筛选出来的,亲和常数为(1.92±0.47)×107L/mol,为生产抗A型肉毒毒素特效救治药物及快速检测A型肉毒毒素奠定了基础。
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公开(公告)号:CN105924520B
公开(公告)日:2020-04-21
申请号:CN201610520548.8
申请日:2016-07-05
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明提供了抗A型肉毒毒素的人源单链抗体D2‑scFv,它是利用人工合成的重组蛋白BontAL,及筛选抗A型肉毒毒素的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25(62)‑VAMP(57)‑C,在人源化抗A型肉毒毒素酶抗体库中筛选出来的,亲和常数为(6.89±0.65)×106L/mol,为生产抗A型肉毒毒素特效救治药物及快速检测A型肉毒毒素奠定了基础。
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公开(公告)号:CN104861070B
公开(公告)日:2019-07-02
申请号:CN201510153593.X
申请日:2015-04-02
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
IPC: C07K16/40 , A61K39/395 , A61P39/02 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体3A‑scFv,它是利用人工合成的重组蛋白BontB,及筛选抗B型肉毒毒素酶活性的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25(62)‑VAMP(57)‑C,人源化抗B型肉毒毒素酶抗体库中筛选出来的,亲和常数为(5.35±0.903)×105L/mol,为生产抗B型肉毒毒素特效救治药物及快速检测B型肉毒毒素奠定了基础。
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公开(公告)号:CN106117352A
公开(公告)日:2016-11-16
申请号:CN201610520546.9
申请日:2016-07-05
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
CPC classification number: C07K16/1282 , A61K39/00 , C07K2317/24 , C07K2317/622 , C07K2317/92 , G01N33/68 , G01N2333/33
Abstract: 本发明提供了抗A型肉毒毒素的人源单链抗体E3‑scFv,它是利用人工合成的重组蛋白BontAL,及筛选抗A型肉毒毒素的人源单链抗体的底物GFP‑HIS6‑SNAP25(62)‑VAMP(57)‑C,在人源化抗A型肉毒毒素酶抗体库中筛选出来的,亲和常数为(1.92±0.47)×107L/mol,为生产抗A型肉毒毒素特效救治药物及快速检测A型肉毒毒素奠定了基础。
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公开(公告)号:CN103805621B
公开(公告)日:2016-07-06
申请号:CN201410082515.0
申请日:2014-03-08
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明公开了靶向性抗肿瘤融合蛋白质LPO的新型制备工艺,构建以转硫酶A(TrxA)-组氨酸标签(His6-Tag)-SUMO蛋白酶识别底物为蛋白质可溶性表达的辅助片段,以LHRH-PEA转膜肽-ONC(简称为LPO)为目的片段的融合表达蛋白质,并使这两部分蛋白质以正确的阅读框架与载体正序相连并转化进入表达菌种,最终构建与表达六种物质串联的融合蛋白,粗提后,在咪唑存在下进行金属螯合介质纯化,SUMO蛋白酶酶切,制备的LPO蛋白质比常规方法制备的LPO蛋白对结肠癌HT-29细胞、卵巢癌OVCAR3细胞、子宫颈腺癌HeLa细胞及肝癌HepG-2细胞等肿瘤细胞系的抑制作用均有明显的提高。
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公开(公告)号:CN103805621A
公开(公告)日:2014-05-21
申请号:CN201410082515.0
申请日:2014-03-08
Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所
Abstract: 本发明公开了靶向性抗肿瘤融合蛋白质LPO的新型制备工艺,构建以转硫酶A(TrxA)-组氨酸标签(His6-Tag)-SUMO蛋白酶识别底物为蛋白质可溶性表达的辅助片段,以LHRH-PEA转膜肽-ONC(简称为LPO)为目的片段的融合表达蛋白质,并使这两部分蛋白质以正确的阅读框架与载体正序相连并转化进入表达菌种,最终构建与表达六种物质串联的融合蛋白,粗提后,在咪唑存在下进行金属螯合介质纯化,SUMO蛋白酶酶切,制备的LPO蛋白质比常规方法制备的LPO蛋白对结肠癌HT-29细胞、卵巢癌OVCAR3细胞、子宫颈腺癌HeLa细胞及肝癌HepG-2细胞等肿瘤细胞系的抑制作用均有明显的提高。
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