公开(公告)号：CN103805621B

公开(公告)日：2016-07-06

申请号：CN201410082515.0

申请日：2014-03-08

Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所

Inventor： 张国利 ,  史飞 ,  于佳 ,  何苗 ,  田园 ,  于新海 ,  刘雨玲 ,  吴广谋 ,  岳玉环

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了靶向性抗肿瘤融合蛋白质LPO的新型制备工艺，构建以转硫酶A（TrxA）-组氨酸标签（His6-Tag）-SUMO蛋白酶识别底物为蛋白质可溶性表达的辅助片段，以LHRH-PEA转膜肽-ONC（简称为LPO）为目的片段的融合表达蛋白质，并使这两部分蛋白质以正确的阅读框架与载体正序相连并转化进入表达菌种，最终构建与表达六种物质串联的融合蛋白，粗提后，在咪唑存在下进行金属螯合介质纯化，SUMO蛋白酶酶切，制备的LPO蛋白质比常规方法制备的LPO蛋白对结肠癌HT-29细胞、卵巢癌OVCAR3细胞、子宫颈腺癌HeLa细胞及肝癌HepG-2细胞等肿瘤细胞系的抑制作用均有明显的提高。

公开(公告)号：CN103805621A

公开(公告)日：2014-05-21

申请号：CN201410082515.0

申请日：2014-03-08

Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所

Inventor： 张国利 ,  史飞 ,  于佳 ,  何苗 ,  田园 ,  于新海 ,  刘雨玲 ,  吴广谋 ,  岳玉环

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了靶向性抗肿瘤融合蛋白质LPO的新型制备工艺，构建以转硫酶A（TrxA）-组氨酸标签（His6-Tag）-SUMO蛋白酶识别底物为蛋白质可溶性表达的辅助片段，以LHRH-PEA转膜肽-ONC（简称为LPO）为目的片段的融合表达蛋白质，并使这两部分蛋白质以正确的阅读框架与载体正序相连并转化进入表达菌种，最终构建与表达六种物质串联的融合蛋白，粗提后，在咪唑存在下进行金属螯合介质纯化，SUMO蛋白酶酶切，制备的LPO蛋白质比常规方法制备的LPO蛋白对结肠癌HT-29细胞、卵巢癌OVCAR3细胞、子宫颈腺癌HeLa细胞及肝癌HepG-2细胞等肿瘤细胞系的抑制作用均有明显的提高。

公开(公告)号：CN203741336U

公开(公告)日：2014-07-30

申请号：CN201420141206.1

申请日：2014-03-27

Applicant: 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所

Inventor： 张国利 ,  姜柏涛 ,  钱军 ,  万忠海 ,  岳玉环 ,  吴广谋 ,  田园 ,  史飞 ,  于新海 ,  冯书章

IPC: C12M1/12

Abstract: 本实用新型公开了生物安全型发酵菌液中空纤维超滤系统，从发酵罐、超滤罐、超滤器到消毒罐，采用全封闭管道连接运送、超滤；一方面防止外部微生物污染，另一方面防止发酵菌液外泄；可根据需要，通过打开或关闭（控制）各个阀门，对每个装置分别清洗消毒，也可以对整个超滤系统一次性清洗消毒。结构简单实用、操作简便快速、制造成本低；泵[5]采用卫生级离心泵，并设有流速传感器；超滤罐内还设有压力传感器、液位或液体体积传感器，超滤计量准确；超滤罐进液管和超滤罐回流管的下口在超滤罐下1\3-1\5处，防止产生泡沫；本超滤系统充分利用了发酵罐的消毒装置，可适用于无菌条件下发酵罐菌液样品的超滤、浓缩、缓冲液置换；也可以用于分泌型发酵菌液的除菌和上清收集。