公开(公告)号：CN112280741A

公开(公告)日：2021-01-29

申请号：CN202011074693.0

申请日：2020-10-09

Applicant: 吉林医药学院

Inventor： 胡城 ,  郝峰 ,  杨娟 ,  王坤 ,  李颖卓 ,  丁旭 ,  解宇浩 ,  张嘉琪

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/12 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明涉及生物医药领域，特别涉及FRT细胞株在制备筛选Piezo1调节剂的制剂或试剂盒中的应用。RT‑PCR、DNA测序比对和Western印迹结果表明，FRT细胞内源性表达Piezo1。ANO1和YFP‑H148Q/I152L表达清晰，位置正确，并且ANO1被激活后模型荧光淬灭，证实转染基因表达的蛋白具有生物学活性，FRT模型细胞构建成功。Fura‑2实验结果证明模型能敏感的反应细胞内钙信号变化。模型Z′因子为0.82，信噪比为13.29：1，可用于Piezo1通道调节剂高通量筛选。

公开(公告)号：CN112359136A

公开(公告)日：2021-02-12

申请号：CN202011073293.8

申请日：2020-10-09

Applicant: 吉林医药学院

Inventor： 郑锴 ,  郝峰 ,  李欣 ,  王坤 ,  胡城 ,  解宇浩 ,  张嘉琪

IPC: C12Q1/6897 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明涉及生物医药领域，特别涉及FRT细胞株在制备筛选Chrm3调节剂的制剂或试剂盒中的应用。FRT细胞在mRNA及蛋白水平均内源性表达Chrm3；成功构建了稳定共表达ANO1和YFP‑H148Q/I152L的FRT细胞模型；该细胞模型可敏感检测细胞内钙浓度，荧光变化的斜率值与Chrm3调节剂浓度成剂量依赖关系，可用于Chrm3调节剂的筛选；该模型的Z＇因子值为0.678，满足高通量筛选的要求。此细胞模型通过敏感检测钙信号实现了对Chrm3调节剂的高通量筛选，也可应用于对其他与钙离子信号相关GPCR靶点的筛选。