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公开(公告)号：CN109825484A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201711180443.3
申请日：2017-11-23
Applicant: 吉林中粮生化有限公司 , 中粮营养健康研究院有限公司 , 清华大学
Abstract: 本发明涉及玉米赤霉稀酮水解酶ZHD101突变体及利用该突变体水解玉米赤霉烯酮的方法。所述突变体是通过在野生型玉米赤霉稀酮水解酶ZHD101的三个关键位点处引入突变而得到。本发明中的ZHD101突变体与野生型ZHD101相比，在酸性条件(pH 5.5)下对ZEN水解的比活提高了至少75％；并且，与野生型ZHD101相比，在酸性条件(pH 5.5)下对ZEN水解的催化效率(kcat/KM)也可提高多达40％。由此，为进一步提高酶催化活性和实现酸性条件下的工业应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN109825484B
公开(公告)日：2022-06-28
申请号：CN201711180443.3
申请日：2017-11-23
Applicant: 吉林中粮生化有限公司 , 中粮营养健康研究院有限公司 , 清华大学
Abstract: 本发明涉及玉米赤霉稀酮水解酶ZHD101突变体及利用该突变体水解玉米赤霉烯酮的方法。所述突变体是通过在野生型玉米赤霉稀酮水解酶ZHD101的三个关键位点处引入突变而得到。本发明中的ZHD101突变体与野生型ZHD101相比，在酸性条件(pH 5.5)下对ZEN水解的比活提高了至少75％；并且，与野生型ZHD101相比，在酸性条件(pH 5.5)下对ZEN水解的催化效率(kcat/KM)也可提高多达40％。由此，为进一步提高酶催化活性和实现酸性条件下的工业应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106119233B
公开(公告)日：2019-06-07
申请号：CN201610515631.6
申请日：2016-07-01
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了头孢菌素酰化酶突变体及其编码基因与应用。本发明所提供的头孢菌素酰化酶突变体为如下a1)或a2)或a3)或a4)所示的蛋白质：a1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白质；a2)氨基酸序列是序列表中序列4所示的蛋白质；a3)氨基酸序列是序列表中序列6所示的蛋白质；a4)氨基酸序列是序列表中序列8所示的蛋白质。实验证明，本发明所提供的头孢菌素酰化酶突变体提高了对头孢菌素C的水解活性，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN102093984B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010561177.0
申请日：2010-11-23
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种杂合酶P450sca2-BMR及其编码基因与应用。该蛋白是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有羟基化美伐他汀的催化活性的由1)衍生的蛋白质。本发明的P450sca2-BMR保留了野生型细胞色素P450sca-2的催化活性并且有的12.7％提高，具有催化美伐他汀生产高效降血脂药物普伐他汀的活性，为进一步提高酶活和实现工业酶法生产普伐他汀的应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN107099523B
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201710451848.X
申请日：2017-06-15
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种头孢拉定合成酶突变体及其编码基因。本发明提供了如下A)或B)或C)所示蛋白质：A)将大肠杆菌天然青霉素G酰化酶的β链的第24位苯丙氨酸替换为丙氨酸，β链的第67位丝氨酸替换为丙氨酸后得到的；B)将大肠杆菌天然青霉素G酰化酶的α链的第142位甲硫氨酸替换为亮氨酸，β链的第24位苯丙氨酸替换为丙氨酸，β链的第67位丝氨酸替换为丙氨酸后得到的；C)将A)或B)所限定的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有合成头孢拉定能力的由A)或B)衍生的蛋白质。本发明所提供的蛋白质均具较高的合成头孢拉定的活性和Vs/Vh以及较低的α，为酶法合成头孢拉定的工业化奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102093984A
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN201010561177.0
申请日：2010-11-23
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种杂合酶P450sca2-BMR及其编码基因与应用。该蛋白是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有羟基化美伐他汀的催化活性的由1)衍生的蛋白质。本发明的P450sca2-BMR保留了野生型细胞色素P450sca-2的催化活性并且有的12.7％提高，具有催化美伐他汀生产高效降血脂药物普伐他汀的活性，为进一步提高酶活和实现工业酶法生产普伐他汀的应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106119233A
公开(公告)日：2016-11-16
申请号：CN201610515631.6
申请日：2016-07-01
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了头孢菌素酰化酶突变体及其编码基因与应用。本发明所提供的头孢菌素酰化酶突变体为如下a1)或a2)或a3)或a4)所示的蛋白质：a1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白质；a2)氨基酸序列是序列表中序列4所示的蛋白质；a3)氨基酸序列是序列表中序列6所示的蛋白质；a4)氨基酸序列是序列表中序列8所示的蛋白质。实验证明，本发明所提供的头孢菌素酰化酶突变体提高了对头孢菌素C的水解活性，具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN108949736B
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN201810875843.4
申请日：2018-08-03
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种高选择性头孢拉定合成酶突变体及其编码基因。本发明提供了如下蛋白质：将大肠杆菌天然青霉素G酰化酶的α链的第142位甲硫氨酸替换为苯丙氨酸，β链的第24位苯丙氨酸替换为丙氨酸，β链的第67位丝氨酸替换为丙氨酸后得到的蛋白质。本发明所提供的蛋白质具更高的合成头孢拉定的活性和Vs/Vh以及更低的α，为酶法合成头孢拉定的工业化奠定了基础。
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公开(公告)号：CN108949736A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810875843.4
申请日：2018-08-03
Applicant: 清华大学
CPC classification number: C12N9/84 , C12P35/04 , C12Y305/01011
Abstract: 本发明公开了一种高选择性头孢拉定合成酶突变体及其编码基因。本发明提供了如下蛋白质：将大肠杆菌天然青霉素G酰化酶的α链的第142位甲硫氨酸替换为苯丙氨酸，β链的第24位苯丙氨酸替换为丙氨酸，β链的第67位丝氨酸替换为丙氨酸后得到的蛋白质。本发明所提供的蛋白质具更高的合成头孢拉定的活性和Vs/Vh以及更低的α，为酶法合成头孢拉定的工业化奠定了基础。
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公开(公告)号：CN107099523A
公开(公告)日：2017-08-29
申请号：CN201710451848.X
申请日：2017-06-15
Applicant: 清华大学
Abstract: 本发明公开了一种头孢拉定合成酶突变体及其编码基因。本发明提供了如下A)或B)或C)所示蛋白质：A)将大肠杆菌天然青霉素G酰化酶的β链的第24位苯丙氨酸替换为丙氨酸，β链的第67位丝氨酸替换为丙氨酸后得到的；B)将大肠杆菌天然青霉素G酰化酶的α链的第142位甲硫氨酸替换为亮氨酸，β链的第24位苯丙氨酸替换为丙氨酸，β链的第67位丝氨酸替换为丙氨酸后得到的；C)将A)或B)所限定的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有合成头孢拉定能力的由A)或B)衍生的蛋白质。本发明所提供的蛋白质均具较高的合成头孢拉定的活性和Vs/Vh以及较低的α，为酶法合成头孢拉定的工业化奠定了基础。
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