公开(公告)号：CN106119233B

公开(公告)日：2019-06-07

申请号：CN201610515631.6

申请日：2016-07-01

Applicant: 清华大学

Inventor： 朱玉山 ,  田野 ,  黄小强

IPC: C12N9/80 ,  C12N15/55 ,  C12P35/06 ,  C12P35/02

Abstract: 本发明公开了头孢菌素酰化酶突变体及其编码基因与应用。本发明所提供的头孢菌素酰化酶突变体为如下a1)或a2)或a3)或a4)所示的蛋白质：a1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白质；a2)氨基酸序列是序列表中序列4所示的蛋白质；a3)氨基酸序列是序列表中序列6所示的蛋白质；a4)氨基酸序列是序列表中序列8所示的蛋白质。实验证明，本发明所提供的头孢菌素酰化酶突变体提高了对头孢菌素C的水解活性，具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN107099523A

公开(公告)日：2017-08-29

申请号：CN201710451848.X

申请日：2017-06-15

Applicant: 清华大学

Inventor： 朱玉山 ,  黄小强 ,  何金文

IPC: C12N9/86 ,  C12N15/55 ,  C12P35/04

Abstract: 本发明公开了一种头孢拉定合成酶突变体及其编码基因。本发明提供了如下A)或B)或C)所示蛋白质：A)将大肠杆菌天然青霉素G酰化酶的β链的第24位苯丙氨酸替换为丙氨酸，β链的第67位丝氨酸替换为丙氨酸后得到的；B)将大肠杆菌天然青霉素G酰化酶的α链的第142位甲硫氨酸替换为亮氨酸，β链的第24位苯丙氨酸替换为丙氨酸，β链的第67位丝氨酸替换为丙氨酸后得到的；C)将A)或B)所限定的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有合成头孢拉定能力的由A)或B)衍生的蛋白质。本发明所提供的蛋白质均具较高的合成头孢拉定的活性和Vs/Vh以及较低的α，为酶法合成头孢拉定的工业化奠定了基础。

公开(公告)号：CN107099523B

公开(公告)日：2019-09-27

申请号：CN201710451848.X

申请日：2017-06-15

Applicant: 清华大学

Inventor： 朱玉山 ,  黄小强 ,  何金文

IPC: C12N9/86 ,  C12N15/55 ,  C12P35/04

Abstract: 本发明公开了一种头孢拉定合成酶突变体及其编码基因。本发明提供了如下A)或B)或C)所示蛋白质：A)将大肠杆菌天然青霉素G酰化酶的β链的第24位苯丙氨酸替换为丙氨酸，β链的第67位丝氨酸替换为丙氨酸后得到的；B)将大肠杆菌天然青霉素G酰化酶的α链的第142位甲硫氨酸替换为亮氨酸，β链的第24位苯丙氨酸替换为丙氨酸，β链的第67位丝氨酸替换为丙氨酸后得到的；C)将A)或B)所限定的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有合成头孢拉定能力的由A)或B)衍生的蛋白质。本发明所提供的蛋白质均具较高的合成头孢拉定的活性和Vs/Vh以及较低的α，为酶法合成头孢拉定的工业化奠定了基础。

公开(公告)号：CN106119233A

公开(公告)日：2016-11-16

申请号：CN201610515631.6

申请日：2016-07-01

Applicant: 清华大学

Inventor： 朱玉山 ,  田野 ,  黄小强

IPC: C12N9/80 ,  C12N15/55 ,  C12P35/06 ,  C12P35/02

CPC classification number: C12N9/80 ,  C12P35/02 ,  C12P35/06

Abstract: 本发明公开了头孢菌素酰化酶突变体及其编码基因与应用。本发明所提供的头孢菌素酰化酶突变体为如下a1)或a2)或a3)或a4)所示的蛋白质：a1)氨基酸序列是序列表中序列2所示的蛋白质；a2)氨基酸序列是序列表中序列4所示的蛋白质；a3)氨基酸序列是序列表中序列6所示的蛋白质；a4)氨基酸序列是序列表中序列8所示的蛋白质。实验证明，本发明所提供的头孢菌素酰化酶突变体提高了对头孢菌素C的水解活性，具有重要的应用价值。