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公开(公告)号:CN115386621A
公开(公告)日:2022-11-25
申请号:CN202210705640.7
申请日:2022-06-21
Applicant: 厦门大学
IPC: C12Q1/6806 , C40B50/06
Abstract: 本发明公开了一种测序技术中的文库制备方法,通过对固相微球上的cDNA链进行等温延伸,将微球上的cDNA单链变成双链,然后再以双链为模板进行PCR扩增。由于第二条合成的cDNA链并没有与微球共价连接,只是与第一条cDNA互补,因此,在PCR时95℃的高温变性时,第二条链就会进入溶液相,进行“液‑液”相扩增。由于扩增之前,对微球上的cDNA进行了二链合成,所以经过高温变性,微球的cDNA会同时脱落,进入溶液相进行“液‑液”相扩增,这样就解决了之前扩增时以固相微球上的单链cDNA模板进行扩增导致的扩增偏差问题。本发明可增加文库中cDNA种类的丰富度,增加基因的检出数。