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公开(公告)号：CN1670209A
公开(公告)日：2005-09-21
申请号：CN200410091990.0
申请日：2004-12-29
Applicant: 厦门大学
Abstract: 假单胞菌磷酸甘油磷酸酯酶基因及其克隆方法，涉及一种基因克隆，提供一种假单胞菌的磷酸甘油磷酸酯酶结构基因及其一种既快捷又经济的克隆方法。基因总长810bp，前3个字符“atg”为起始符，最后3个字符“tga”为终止符。提取假单胞菌总DNA，用限制性核酸内切酶对总DNA不完全酶切，经电泳，找酶切片段区域，切出凝胶，回收DNA片段；以E.coRI在人工构建的表达载体，将回收的DNA片段与线性载体共育，形成重组质粒，取转化溶液涂抹在高盐LB琼脂培养基上，挑取长出的单菌落耐盐转化子，接种在培养基上。出现的白色菌落即可初步判断为耐盐转化子；重组质粒，用E.coRI切出其中的插入片段，测序；进行基因和蛋白质的同源性比较。
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公开(公告)号：CN1644706A
公开(公告)日：2005-07-27
申请号：CN200410084812.5
申请日：2004-10-01
Applicant: 厦门大学
Abstract: 克隆原核生物耐盐相关基因方法，涉及基因工程。提供一种克隆原核生物耐盐相关基因的方法。将极端耐盐假单胞菌或其它耐盐原核生物，提取极端耐盐假单胞菌或其它耐盐原核生物的总DNA；对总DNA不完全酶切，酶切后的总DNA经凝胶电泳，找酶切片段区域，切出凝胶，回收DNA片段；完全酶切成线性，将回收的DNA片段与线性载体共育，加入连接酶形成重组质粒，转化用CaCl2处理获得的感受态受体菌；将转化子溶液涂抹在高盐和LB琼脂培养基上，挑选转化子；提取重组质粒，插入片段，测序，同源性比较，判定该基因的性质；绘出转化子与对照的生长曲线，比较两者生长状态的差异，借此再次验证该基因为耐盐相关基因。
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公开(公告)号：CN100500851C
公开(公告)日：2009-06-17
申请号：CN200410091990.0
申请日：2004-12-29
Applicant: 厦门大学
Abstract: 假单胞菌磷酸甘油磷酸酯酶基因及其克隆方法，涉及一种基因克隆，提供一种假单胞菌的磷酸甘油磷酸酯酶结构基因及其一种既快捷又经济的克隆方法。基因总长810bp，前3个字符“atg”为起始符，最后3个字符“tga”为终止符。提取假单胞菌总DNA，用限制性核酸内切酶对总DNA不完全酶切，经电泳，找酶切片段区域，切出凝胶，回收DNA片段；以E.co RI在人工构建的表达载体，将回收的DNA片段与线性载体共育，形成重组质粒，取转化溶液涂抹在高盐LB琼脂培养基上，挑取长出的单菌落耐盐转化子，接种在培养基上。出现的白色菌落即可初步判断为耐盐转化子；重组质粒，用E.co RI切出其中的插入片段，测序；进行基因和蛋白质的同源性比较。
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公开(公告)号：CN1266278C
公开(公告)日：2006-07-26
申请号：CN200410084812.5
申请日：2004-10-01
Applicant: 厦门大学
Abstract: 克隆原核生物耐盐相关基因方法，涉及基因工程。提供一种克隆原核生物耐盐相关基因的方法。将极端耐盐假单胞菌或其它耐盐原核生物，提取极端耐盐假单胞菌或其它耐盐原核生物的总DNA；对总DNA不完全酶切，酶切后的总DNA经凝胶电泳，找酶切片段区域，切出凝胶，回收DNA片段；完全酶切成线性，将回收的DNA片段与线性载体共育，加入连接酶形成重组质粒，转化用CaCl2处理获得的感受态受体菌；将转化子溶液涂抹在高盐和LB琼脂培养基上，挑选转化子；提取重组质粒，插入片段，测序，同源性比较，判定该基因的性质；绘出转化子与对照的生长曲线，比较两者生长状态的差异，借此再次验证该基因为耐盐相关基因。
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