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公开(公告)号：CN1266278C
公开(公告)日：2006-07-26
申请号：CN200410084812.5
申请日：2004-10-01
Applicant: 厦门大学
Abstract: 克隆原核生物耐盐相关基因方法，涉及基因工程。提供一种克隆原核生物耐盐相关基因的方法。将极端耐盐假单胞菌或其它耐盐原核生物，提取极端耐盐假单胞菌或其它耐盐原核生物的总DNA；对总DNA不完全酶切，酶切后的总DNA经凝胶电泳，找酶切片段区域，切出凝胶，回收DNA片段；完全酶切成线性，将回收的DNA片段与线性载体共育，加入连接酶形成重组质粒，转化用CaCl2处理获得的感受态受体菌；将转化子溶液涂抹在高盐和LB琼脂培养基上，挑选转化子；提取重组质粒，插入片段，测序，同源性比较，判定该基因的性质；绘出转化子与对照的生长曲线，比较两者生长状态的差异，借此再次验证该基因为耐盐相关基因。
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公开(公告)号：CN1312284C
公开(公告)日：2007-04-25
申请号：CN200510006572.1
申请日：2005-02-23
Applicant: 厦门大学
Abstract: 假单胞菌Na+/H+逆向转运蛋白基因及其克隆方法，涉及一种基因克隆。提供一种假单胞菌的Na+/H+逆向转运蛋白结构基因及一种既快捷又经济的克隆方法，基因长1089bp，编码362个氨基酸。步骤为将极端耐盐假单胞菌接种，培养；提取总DNA；设计引物；PCR反应并将扩增产物凝胶成像系统扫描记录，切下扩增的约1.1kb的条带；在PCR产物末端加上一个腺嘌呤脱氧核糖核苷酸(A)，弃上清液，加入20μL重蒸水溶解DNA；载体与DNA的连接，形成单菌落；挑选白色菌落，碱裂解法提取重组质粒；鉴定所扩增的目的基因；检测转化子的耐盐水平；转化子中的重组质粒经鉴定，对其中的克隆基因进行测序；判断克隆基因。
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公开(公告)号：CN1644706A
公开(公告)日：2005-07-27
申请号：CN200410084812.5
申请日：2004-10-01
Applicant: 厦门大学
Abstract: 克隆原核生物耐盐相关基因方法，涉及基因工程。提供一种克隆原核生物耐盐相关基因的方法。将极端耐盐假单胞菌或其它耐盐原核生物，提取极端耐盐假单胞菌或其它耐盐原核生物的总DNA；对总DNA不完全酶切，酶切后的总DNA经凝胶电泳，找酶切片段区域，切出凝胶，回收DNA片段；完全酶切成线性，将回收的DNA片段与线性载体共育，加入连接酶形成重组质粒，转化用CaCl2处理获得的感受态受体菌；将转化子溶液涂抹在高盐和LB琼脂培养基上，挑选转化子；提取重组质粒，插入片段，测序，同源性比较，判定该基因的性质；绘出转化子与对照的生长曲线，比较两者生长状态的差异，借此再次验证该基因为耐盐相关基因。
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公开(公告)号：CN1667122A
公开(公告)日：2005-09-14
申请号：CN200510006572.1
申请日：2005-02-23
Applicant: 厦门大学
Abstract: 假单胞菌Na+/H+逆向转运蛋白基因及其克隆方法，涉及一种基因克隆。提供一种假单胞菌的Na+/H+逆向转运蛋白结构基因及一种既快捷又经济的克隆方法，基因长1089bp，编码362个氨基酸。步骤为将极端耐盐假单胞菌接种，培养；提取总DNA；设计引物；PCR反应并将扩增产物凝胶成像系统扫描记录，切下扩增的约1.1kb的条带；在PCR产物末端加上一个腺嘌呤脱氧核糖核苷酸(A)，弃上清液，加入20μL重蒸水溶解DNA；载体与DNA的连接，形成单菌落；挑选白色菌落，碱裂解法提取重组质粒；鉴定所扩增的目的基因；检测转化子的耐盐水平；转化子中的重组质粒经鉴定，对其中的克隆基因进行测序；判断克隆基因。
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