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公开(公告)号：CN109856227A
公开(公告)日：2019-06-07
申请号：CN201910150278.X
申请日：2019-02-28
IPC: G01N27/48 , G01N27/26 , G01N23/2202 , G01N23/2206
Abstract: 本发明公开了一种固态纳米孔内酶分子可控修饰的方法，包括以下步骤：A、纳米孔的制备；B、纳米孔的修饰及单分子酶传感器构建；C、关键步骤的表征；D、底物特异性传感检测；E、信号提取及分析。本发明结合固态纳米孔稳定、易于设计加工与物化改性的优点，构建出可控制的，稳定的，高灵敏度的纳米孔内单分子辣根过氧化物酶传感器件。通过纳米孔内外差异化修饰，研究辣根过氧化物酶单分子在纳米孔内的可控修饰；通过研究纳米孔电流特征信号与单分子酶反应过程相关性以及纳米孔内单分子酶促动力学相关参数，解释单分子酶催化机制。
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公开(公告)号：CN110964636A
公开(公告)日：2020-04-07
申请号：CN201911235195.7
申请日：2019-12-05
Applicant: 东南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于层流的自动化核酸磁珠纯化的微流控芯片，该微流控芯片包括基底和设置在基底上的层流芯片；所述层流芯片包括主流道，在主流道两端分别设有两个以上的进样通道和两个以上的出样通道。通过控制不同缓冲液的流速可使得不同试剂在主流道区域形成层流，由于外置永磁体的磁场作用，磁珠在随流体向前运动的同时发生偏转分别进入不同的溶液中被洗涤及洗脱。本发明解决了当前DNA磁珠回收大量的重复步骤问题，并能简单快速的实现自动化回收小量的DNA。同时本发明提供的结合层流及外置磁铁的自动化磁珠控制也为一些免疫反应步骤的缩减提供研究思路。
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公开(公告)号：CN107727705B
公开(公告)日：2019-12-10
申请号：CN201710904967.6
申请日：2017-09-28
Applicant: 东南大学
IPC: G01N27/26
Abstract: 本发明公开了一种酶反应检测纳米孔电学传感器，包括从下到上依次层叠的基底、绝缘层以及中心设有纳米尺度孔的薄膜，其特征在于，在所述纳米尺度孔内通过化学修饰有DNA探针以及与DNA探针互补杂交的DNA四面体结构，在所述DNA四面体结构上通过生物素结合有辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，从而使单个辣根过氧化物酶固定在纳米孔内。通过加入反应底物，检测氧化反应产物易位事件，实现对酶反应的实时监测。本发明解决了当前酶反应检测的大量的试剂与时间消耗问题，同时本发明提供的纳米孔内酶固定方法能为后期在纳米孔内研究单个酶分子动力学提供研究思路。
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公开(公告)号：CN104561291A
公开(公告)日：2015-04-29
申请号：CN201410833493.7
申请日：2014-12-30
Applicant: 东南大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6827 , C12Q1/6837 , C12Q2525/107 , C12Q2565/607 , C12Q2565/518
Abstract: 本发明提供了一种基于双功能探针基因芯片检测方法，其方法制备含有目的探针和寡聚体序列一段序列片段，并且用第一荧光基团标记序列片段中的任意碱基，制备成点样溶液，机械点样于修饰了手臂分子的基片上形成探针斑点，固定，冲洗，检测探针斑点发出的第一荧光基团的信号，然后用第二荧光基团标记待测序列进行杂交，检测探针斑点发出第二荧光基团的信号，其第一荧光基团标记判定目的探针是否固定于基片上，第二荧光基团标记判断待测序列信息。同时使用两种荧光能快速、简便地检测目的探针是否固定在基片上，从而排除因目的探针未固定而出现的假阴性结果，提高基因检测结果的准确性及可靠性。
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公开(公告)号：CN103194379B
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201310132414.5
申请日：2013-04-17
Applicant: 东南大学
IPC: C12M1/24
Abstract: 本发明公开了一种用于一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，包括用于容纳PCR缓冲液的管身、用于容纳杂交缓冲液的储液池和密闭储液池上侧开口的管盖，储液池置入管身的上部，储液池的上端与管身的开口上端密闭连接，储液池的外部一侧与管身内壁之间留有空隙，储液池的上部设置有连通空隙与储液池内部的通孔。本发明不仅使PCR、基因杂交、基因检测能够在一个封闭体系中完成，避免了交叉污染，而且完全隔绝了PCR扩增体系和DNA杂交体系，避免了扩增体系中的缓冲液、酶等成分对杂交反应的影响，极大地提高了基因检测的准确性和重复性。本发明中的管盖使得加样更加简便，密封性更强，检测准确性更好。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103194379A
公开(公告)日：2013-07-10
申请号：CN201310132414.5
申请日：2013-04-17
Applicant: 东南大学
IPC: C12M1/24
Abstract: 本发明公开了一种用于一体式检测基因的封闭型PCR扩增管，包括用于容纳PCR缓冲液的管身、用于容纳杂交缓冲液的储液池和密闭储液池上侧开口的管盖，储液池置入管身的上部，储液池的上端与管身的开口上端密闭连接，储液池的外部一侧与管身内壁之间留有空隙，储液池的上部设置有连通空隙与储液池内部的通孔。本发明不仅使PCR、基因杂交、基因检测能够在一个封闭体系中完成，避免了交叉污染，而且完全隔绝了PCR扩增体系和DNA杂交体系，避免了扩增体系中的缓冲液、酶等成分对杂交反应的影响，极大地提高了基因检测的准确性和重复性。本发明中的管盖使得加样更加简便，密封性更强，检测准确性更好。
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公开(公告)号：CN102384934A
公开(公告)日：2012-03-21
申请号：CN201110285323.6
申请日：2011-09-23
Applicant: 东南大学
IPC: G01N27/327 , B82Y40/00
Abstract: 本发明涉及在纳米孔表面制备纳米间隙电极的方法：(1)在基材表面相对的两条金属线的端面上分别修饰核苷酸片段A和核苷酸片段B；(2)引入两端分别与核苷酸片段A和核苷酸片段B互补的双链DNA，使双链DNA和两金属线上的核苷酸片段A和核苷酸片段B结合后，以非折叠状态连接在两金属线之间；(3)在双链DNA骨架上沉积、聚集Ag+，然后使聚集的Ag+还原成Ag纳米线；(4)将Ag纳米线刻蚀穿，并将基材刻蚀形成贯穿的纳米孔，形成表面具有纳米间隙电极的纳米孔。本发明所述方法可以在固态纳米孔孔内制备出纳米间隙电极的方法，从而能够实现二维同时检测生物大分子通过纳米孔所产生的信号变化，广泛地应用各种生物大分子的检测。
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公开(公告)号：CN108645905A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810506897.3
申请日：2018-05-24
Applicant: 南通大学
IPC: G01N27/327
Abstract: 本发明涉及一种基于固态纳米孔检测过氧化氢的方法，通过在10-100nm超薄氮化硅膜上打不同的纳米孔，用多种硅烷化处理，实现纳米孔表面和内壁差异化修饰改性，通过硅烷偶联分子将过氧化物酶偶联在纳米孔内壁，构建出可控制的，稳定的，高灵敏度的纳米孔内单分子辣根过氧化物酶传感器件，通过解析酶促反应的纳米孔离子电流信号，纳米孔内单个酶分子酶促反应Km与Kcat的模型机制及规律，以实时定量检测过氧化氢。本发明通过纳米孔内外差异化修饰，及辣根过氧化物酶单分子在纳米孔内的可控修饰，建立的特异性的小分子实时传感检测方法，其精度达到纳摩尔以下。
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公开(公告)号：CN112079893A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202011005570.1
申请日：2020-09-23
Applicant: 南京原码科技合伙企业(有限合伙) , 东南大学深圳研究院
Abstract: 本发明提供了一种基于固相化学合成法合成DNA存储所需文本的方法，该方法在原有的固相亚磷酸酰胺三脂法上进行了改善，通过去除原方法当中的Capping(盖帽)步骤，简化了DNA化学合成步骤，缩短了整体合成所需要的时间和成本。此外，合成后的DNA文本无需进行纯化步骤这又进一步地减少了工作量和整个流程的耗费。该方法增加了载体上DNA文本的合成数量，极大地提高了单位面积上的存储容量。在读取过程中该合成方法合成的DNA文本链之间存在一个可相互纠正的容错机制，通过高通量并行读取方式来提高读取的准确率。最后，在合成载体的选择方面该合成方法对合成载体没有特殊要求，通用的载体都可被用来进行DNA文本的合成。
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公开(公告)号：CN105801676B
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201610228541.9
申请日：2016-04-13
Applicant: 东南大学
Abstract: 本发明公开了一种突变MspA蛋白单体及其表达基因和应用，所述蛋白单体是由野生型MspA蛋白突变所得，所述野生型MspA蛋白包含序列表SEQ ID NO:1中所示氨基酸序列，所述突变发生在所述序列表SEQ ID NO:1中的88位到116位的区域内的一个或多个氨基酸；所述蛋白单体能够形成八聚体的纳米孔。相对于现有技术，本发明所提供的突变MspA蛋白单体，能够形成八聚体纳米通道，可明显地改善野生型MspA蛋白纳米孔在外加高偏置电压下产生的自发阻塞效应，且增大对分析物的捕获率，并且一定程度阻滞分析物通过其孔道，降低过孔速率，增加检测精度。
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