一种斑马鱼内耳毛细胞损伤疾病模型的构建方法

    公开(公告)号:CN116210648A

    公开(公告)日:2023-06-06

    申请号:CN202310213560.4

    申请日:2023-03-08

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明提供一种斑马鱼内耳毛细胞损伤疾病模型的构建方法,涉及生物模型构建技术领域,所述构建方法包含以下步骤:S1:斑马鱼的养殖;S2:斑马鱼杂交及幼体培养;S3:构建斑马鱼内耳毛细胞损伤疾病模型:收集斑马鱼胚胎,将其放入28.5℃恒温培养箱内,22hpf加入含PTUE3培养液培养;通过显微注射方法将新霉素注射到发育到一定时间的斑马鱼内耳中,完成斑马鱼内耳毛细胞损伤疾病模型。本申请所提供的构建内耳毛细胞损伤斑马鱼模型的方法,突破了以往的技术壁垒,从一个全新的角度建立了内耳毛细胞损伤斑马鱼模型,为探究内耳毛细胞损伤和再生以及毛细胞再生的机制提供一个直观和快速的动物模型。

    遗传性耳聋诱导基因的突变筛选方法及突变检测试剂盒

    公开(公告)号:CN111893177A

    公开(公告)日:2020-11-06

    申请号:CN202010834744.9

    申请日:2020-08-19

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明提供一种遗传性耳聋诱导基因的突变检测方法及突变检测试剂盒,检测试剂盒包括基因组DNA抽提体系和PCR反应体系,其中,所述基因组DNA抽提体系包括QIAmp Blood Kit;所述PCR反应体系包括PrimeSTAR HS DNA Polymerase试剂、buffer、dNTP Mixture、Claudin 3基因突变体的特异性扩增上游引物、Claudin 3基因突变体的特异性扩增下游引物和Claudin 3基因突变体的测序引物。本发明提供的Claudin 3基因突变尚未报道与遗传性耳聋相关,本发明为耳聋疾病的早期诊断和早期干预治疗提供了检测试剂盒,为基因芯片制作提供了基础,其对于遗传性耳聋诱导基因的筛查和检测具有潜在的重要价值。

    一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒

    公开(公告)号:CN106566844A

    公开(公告)日:2017-04-19

    申请号:CN201610945971.2

    申请日:2016-11-02

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明公开了一种下调真核基因表达的方法及其试剂盒,采用5’‑磷酸化单链寡聚脱氧核糖核苷酸(5’‑p‑ss‑DNA Oligo)和Argonaute mRNA联合下调基因表达,包括NgAgo基因的改造,表达质粒的构建,表达质粒经过线性化、体外转录、回收步骤获得Argonaute mRNA,根据目的基因序列设计并合成5’‑p‑ss‑DNA Oligo,将Argonaute mRNA和5’‑p‑ss‑DNA Oligo导入靶细胞中等步骤;本发明所述的方法中改造的NgAgo基因能够在靶细胞中快速高效的进入细胞核;5’‑p‑ss‑DNA Oligo序列依据目的基因设计,对靶序列识别具有良好的特异性;5’‑p‑ss‑DNA Oligo/NgAgo系统通过对真核细胞DNA水平的抑制作用,能够稳定高效的下调目的基因表达;5’‑p‑ss‑DNA Oligo具有良好的稳定性,利于在细胞内发挥作用;真核细胞自然条件下不存在内源性的5’‑p‑ss‑DNA Oligo因此特异性高。

    一种佛司可林二萜酯类衍生物及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN117567441A

    公开(公告)日:2024-02-20

    申请号:CN202311551178.0

    申请日:2023-11-21

    Abstract: 本发明属于药物化学和药理学技术领域,涉及一种佛司可林二萜酯类衍生物及其制备方法和应用,该佛司可林二萜酯类衍生物具有式(I)所示化学结构式,由佛司可林与氢氧化钾在甲醇中反应得到化合物1,然后化合物1与氯铬酸吡啶盐和硅胶在二氯甲烷中反应得到化合物2,接着化合物2在N,N’‑二环己基碳酰亚胺、4‑二甲氨基吡啶的催化下与有机酸在二氯甲烷中反应得到佛司可林二萜酯类衍生物3。本发明得到的二萜酯类衍生物具有较强的抗炎活性,可用于制备抗炎药物。#imgabs0#

    一种生物因子及其在保护听觉毛细胞免受损伤药物中的应用

    公开(公告)号:CN116144627A

    公开(公告)日:2023-05-23

    申请号:CN202310155486.5

    申请日:2023-02-23

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本申请公开一种生物因子及其在保护听觉毛细胞免受损伤药物中的应用,属于生物学内耳研究领域,所述的生物因子为磷脂酶C(PLC)家族亚型PLCβ3,所述的因子具有保护听觉毛细胞免受噪音、铂类化疗药物以及氨基糖苷类抗生素损伤的作用。生物因子PLCβ3氨基酸序列在人、小鼠、斑马鱼中序列如SEQ NO.1、NO.2、NO.3所示,核苷酸序列在人、小鼠、斑马鱼中序列如SEQ NO.4、NO.5、NO.6所示,首次在内耳中发现了生物因子PLCβ3具有保护毛细胞的作用,本发明为后续在哺乳动物研究毛细胞预保护和毛细胞再生的研究奠定了重要基础。

    遗传性耳聋诱导基因的突变筛选方法及突变检测试剂盒

    公开(公告)号:CN111893177B

    公开(公告)日:2022-10-04

    申请号:CN202010834744.9

    申请日:2020-08-19

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明提供一种遗传性耳聋诱导基因的突变检测方法及突变检测试剂盒,检测试剂盒包括基因组DNA抽提体系和PCR反应体系,其中,所述基因组DNA抽提体系包括QIAmp Blood Kit;所述PCR反应体系包括PrimeSTAR HS DNA Polymerase试剂、buffer、dNTP Mixture、Claudin 3基因突变体的特异性扩增上游引物、Claudin 3基因突变体的特异性扩增下游引物和Claudin 3基因突变体的测序引物。本发明提供的Claudin 3基因突变尚未报道与遗传性耳聋相关,本发明为耳聋疾病的早期诊断和早期干预治疗提供了检测试剂盒,为基因芯片制作提供了基础,其对于遗传性耳聋诱导基因的筛查和检测具有潜在的重要价值。

    一种荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼初级运动神经元的方法

    公开(公告)号:CN114438126A

    公开(公告)日:2022-05-06

    申请号:CN202210143283.X

    申请日:2022-02-16

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明提供一种荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼初级运动神经元的方法,涉及转基因技术领域,其中荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼初级运动神经元系统的建立方法,包含以下步骤:利用供体质粒p5E‑mnx1、pME‑EGFP‑α‑Tubulin、p3E‑polyA和骨架质粒pDestTol2pA2,通过LR重组反应获得组织特异性表达质粒pDest‑mnx1‑EGFP‑α‑Tubulin,并进行转化和质粒抽提;通过Tol2转座酶,将DNA片段mnx1‑EGFP‑α‑Tubulin插入具有AB遗传背景的斑马鱼的部分细胞基因组中,其中所述供体质粒p5E‑mnx1如序列表的序列1所示,EGFP如序列表的序列2所示,α‑Tubulin如序列表的序列3所示。从一个全新的角度建立一种微管‑荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼运动神经元系统,实现了单个运动神经元清晰标记。为探究运动神经元的发育和形态发生提供一个直观和快速的模型。

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