公开(公告)号：CN111893177A

公开(公告)日：2020-11-06

申请号：CN202010834744.9

申请日：2020-08-19

Applicant: 南通大学

Inventor： 刘东 ,  巩杰 ,  钱佩佩 ,  王新

IPC: C12Q1/6883 ,  C12Q1/6869

Abstract: 本发明提供一种遗传性耳聋诱导基因的突变检测方法及突变检测试剂盒，检测试剂盒包括基因组DNA抽提体系和PCR反应体系，其中，所述基因组DNA抽提体系包括QIAmp Blood Kit；所述PCR反应体系包括PrimeSTAR HS DNA Polymerase试剂、buffer、dNTP Mixture、Claudin 3基因突变体的特异性扩增上游引物、Claudin 3基因突变体的特异性扩增下游引物和Claudin 3基因突变体的测序引物。本发明提供的Claudin 3基因突变尚未报道与遗传性耳聋相关，本发明为耳聋疾病的早期诊断和早期干预治疗提供了检测试剂盒，为基因芯片制作提供了基础，其对于遗传性耳聋诱导基因的筛查和检测具有潜在的重要价值。

公开(公告)号：CN111893177B

公开(公告)日：2022-10-04

申请号：CN202010834744.9

申请日：2020-08-19

Applicant: 南通大学

Inventor： 刘东 ,  巩杰 ,  钱佩佩 ,  王新

IPC: C12Q1/6883 ,  C12Q1/6869

Abstract: 本发明提供一种遗传性耳聋诱导基因的突变检测方法及突变检测试剂盒，检测试剂盒包括基因组DNA抽提体系和PCR反应体系，其中，所述基因组DNA抽提体系包括QIAmp Blood Kit；所述PCR反应体系包括PrimeSTAR HS DNA Polymerase试剂、buffer、dNTP Mixture、Claudin 3基因突变体的特异性扩增上游引物、Claudin 3基因突变体的特异性扩增下游引物和Claudin 3基因突变体的测序引物。本发明提供的Claudin 3基因突变尚未报道与遗传性耳聋相关，本发明为耳聋疾病的早期诊断和早期干预治疗提供了检测试剂盒，为基因芯片制作提供了基础，其对于遗传性耳聋诱导基因的筛查和检测具有潜在的重要价值。

公开(公告)号：CN114438126A

公开(公告)日：2022-05-06

申请号：CN202210143283.X

申请日：2022-02-16

Applicant: 南通大学

Inventor： 巩杰 ,  刘东 ,  钱佩佩 ,  黄自刚 ,  王新

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/62 ,  A01K67/027 ,  G01N27/447

Abstract: 本发明提供一种荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼初级运动神经元的方法，涉及转基因技术领域，其中荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼初级运动神经元系统的建立方法，包含以下步骤：利用供体质粒p5E‑mnx1、pME‑EGFP‑α‑Tubulin、p3E‑polyA和骨架质粒pDestTol2pA2，通过LR重组反应获得组织特异性表达质粒pDest‑mnx1‑EGFP‑α‑Tubulin，并进行转化和质粒抽提；通过Tol2转座酶，将DNA片段mnx1‑EGFP‑α‑Tubulin插入具有AB遗传背景的斑马鱼的部分细胞基因组中，其中所述供体质粒p5E‑mnx1如序列表的序列1所示，EGFP如序列表的序列2所示，α‑Tubulin如序列表的序列3所示。从一个全新的角度建立一种微管‑荧光融合蛋白嵌合标记斑马鱼运动神经元系统，实现了单个运动神经元清晰标记。为探究运动神经元的发育和形态发生提供一个直观和快速的模型。