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公开(公告)号：CN117965698A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410286405.X
申请日：2024-03-13
Applicant: 南通大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6883 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于核酸检测技术领域，公开了一种基于RPA‑UDG与Cas12a联用进行SNP分型的方法及其应用。方法为：将RPA反向引物中的脱氧胸苷替换为脱氧尿嘧啶，对目标核酸进行扩增后利用UDG降解产物的dU碱基，得到dsDNA靶标；构建包括Cas12a、sgRNA、调控链、ssDNA荧光底物和dsDNA靶标的Cas12a检测体系，利用sgRNA触发TSDR，激活Cas12a的反式切割活性，降解ssDNA荧光底物，产生荧光信号；根据荧光信号进行基因分型。该方法可对目标核酸上的突变位点进行高灵敏度高特异性的检测，可成功区分ApoE基因rs7412位点的三种基因型，检测过程无需温度循环仪器，操作便捷。
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