基于CRISPR-Cas12a传感系统的PPIs检测平台及检测方法

    公开(公告)号:CN114088952B

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202111399079.6

    申请日:2021-11-19

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明提供一种基于CRISPR‑Cas12a传感系统的PPIs检测平台及检测方法,用于p53‑MDM2相互作用监测和抑制剂疗效评价。所述检测方法包括如下步骤:对Cas‑PPIor进行探针设计及Cas‑PPIor可行性进行验证;Cas‑PPIor用于p53‑MDM2相互作用研究及抑制剂效力评价;Cas‑PPIor用于细胞内蛋白相互作用检测。本发明开发了基于CRISPR‑Cas12a传感系统的PPIs检测平台,可以实现有效的p53‑MDM2相互作用过程监测以及小分子拮抗剂的抑制作用效力评估。

    一种基于RPA-UDG与Cas12a联用的SNP分型方法及应用

    公开(公告)号:CN117965698A

    公开(公告)日:2024-05-03

    申请号:CN202410286405.X

    申请日:2024-03-13

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明属于核酸检测技术领域,公开了一种基于RPA‑UDG与Cas12a联用进行SNP分型的方法及其应用。方法为:将RPA反向引物中的脱氧胸苷替换为脱氧尿嘧啶,对目标核酸进行扩增后利用UDG降解产物的dU碱基,得到dsDNA靶标;构建包括Cas12a、sgRNA、调控链、ssDNA荧光底物和dsDNA靶标的Cas12a检测体系,利用sgRNA触发TSDR,激活Cas12a的反式切割活性,降解ssDNA荧光底物,产生荧光信号;根据荧光信号进行基因分型。该方法可对目标核酸上的突变位点进行高灵敏度高特异性的检测,可成功区分ApoE基因rs7412位点的三种基因型,检测过程无需温度循环仪器,操作便捷。

    基于PfAgo-G4的H1N1病毒检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN117844980A

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202311855361.X

    申请日:2023-12-29

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明属于H1N1病毒检测技术领域,公开了一种基于PfAgo‑G4的H1N1病毒检测试剂盒及检测方法。检测试剂盒包括primer‑F,primer‑R,gDNA1,gDNA2,G4‑a,G4‑b和Link,其序列如SEQ ID NO:1‑7所述。所述检测方法包括如下步骤:将H1N1病毒基因扩增后得到双链DNA序列,此序列可被gDNA1和gDNA2特异性识别,从而引导PfAgo切割上述双链DNA,进而生成gDNA3进行Link的切割;采用G4作为荧光信号输出手段,Link的降解导致G4的荧光降低,从而实现对H1N1病毒的检测。本发明检测成本低,特异性强,可对单碱基突变实现高灵敏检测。

    基于CRISPR-Cas12a传感系统的PPIs检测平台及检测方法

    公开(公告)号:CN114088952A

    公开(公告)日:2022-02-25

    申请号:CN202111399079.6

    申请日:2021-11-19

    Applicant: 南通大学

    Abstract: 本发明提供一种基于CRISPR‑Cas12a传感系统的PPIs检测平台及检测方法,用于p53‑MDM2相互作用监测和抑制剂疗效评价。所述检测方法包括如下步骤:对Cas‑PPIor进行探针设计及Cas‑PPIor可行性进行验证;Cas‑PPIor用于p53‑MDM2相互作用研究及抑制剂效力评价;Cas‑PPIor用于细胞内蛋白相互作用检测。本发明开发了基于CRISPR‑Cas12a传感系统的PPIs检测平台,可以实现有效的p53‑MDM2相互作用过程监测以及小分子拮抗剂的抑制作用效力评估。

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