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公开(公告)号：CN114591926A
公开(公告)日：2022-06-07
申请号：CN202210351749.5
申请日：2022-04-02
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明提供了一种人源呼吸链复合物I的纯化方法，涉及蛋白纯化技术领域。本发明依次采用阳离子交换层析、阴离子交换层析和分子筛层析的方法，对人源呼吸链复合物I进行纯化，与目前常用的借助密度梯度离心法相比，对实验设备要求低，而且具有步骤简单、耗时短、安全性好以及易规范化操作等优点。本发明所述纯化方法所用阴阳离子填料及分子筛填料简单易得，纯化流程易放大，可以进一步推进到大规模分离纯化人源呼吸链复合物I。
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公开(公告)号：CN114591926B
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202210351749.5
申请日：2022-04-02
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明提供了一种人源呼吸链复合物I的纯化方法，涉及蛋白纯化技术领域。本发明依次采用阳离子交换层析、阴离子交换层析和分子筛层析的方法，对人源呼吸链复合物I进行纯化，与目前常用的借助密度梯度离心法相比，对实验设备要求低，而且具有步骤简单、耗时短、安全性好以及易规范化操作等优点。本发明所述纯化方法所用阴阳离子填料及分子筛填料简单易得，纯化流程易放大，可以进一步推进到大规模分离纯化人源呼吸链复合物I。
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公开(公告)号：CN117069862A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311132536.4
申请日：2023-09-05
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明提供了一种分枝杆菌属纳米载体蛋白的纯化方法，属于蛋白纯化技术领域。本发明提供的纯化方法包括以下步骤：提供大肠杆菌总蛋白溶液，所述大肠杆菌总蛋白溶液中含有分枝杆菌属纳米载体蛋白，所述分枝杆菌属纳米载体蛋白的亚基C端融合有1×Flag标签；将所述大肠杆菌总蛋白溶液进行Flag标签亲和柱层析纯化，得到分枝杆菌属纳米载体蛋白粗提液；将所述分枝杆菌属纳米载体蛋白粗提液进行凝胶排阻柱层析纯化，得到分枝杆菌属纳米载体蛋白纯品。本发明提供的纯化方法简单易行，获得的分枝杆菌属纳米载体蛋白产量大，纯度高，可用于后续的分枝杆菌属纳米载体蛋白结构功能及药物递送研究。
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公开(公告)号：CN118703547A
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202410865668.6
申请日：2024-07-01
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明提供了一种内源提取耻垢分枝杆菌蛋白质纳米笼的方法，属于蛋白提取纯化技术领域。本发明提供的方法包括以下步骤：在耻垢分枝杆菌中导入含有CFP29基因及1×Flag亲和标签的重组质粒，得到耻垢分枝杆菌重组菌；提取所述耻垢分枝杆菌重组菌的总蛋白溶液，将所述耻垢分枝杆菌总蛋白溶液进行Flag标签亲和柱层析纯化，得到耻垢分枝杆菌蛋白质纳米笼粗提液；将所述耻垢分枝杆菌蛋白质纳米笼粗提液通过凝胶排阻色谱法纯化，得到耻垢分枝杆菌蛋白质纳米笼纯品。本发明提供的提取纯化方法操作简单、方便易行，获得的耻垢分枝杆菌本底蛋白质纳米笼产量更大、纯度更高且性质稳定。
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公开(公告)号：CN117024606A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311132534.5
申请日：2023-09-05
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明提供了一种人源线粒体呼吸链超级复合物CICIII2CIV的纯化方法，属于蛋白纯化技术领域。本发明先提供人源线粒体总蛋白溶液，所述人源线粒体总蛋白溶液包括由人源线粒体呼吸链复合物I、III和IV组装而成的人源线粒体呼吸链超级复合物CICIII2CIV，所述人源线粒体呼吸链复合物I的NDUFS3亚基C端融合有3×Flag标签；然后将所述人源线粒体总蛋白溶液依次进行Flag标签亲和柱层析纯化和凝胶排阻柱层析纯化，得到人源线粒体呼吸链超级复合物CICIII2CIV纯品。本发明提供的纯化方法能获得纯度高、产量大且生理活性好的人源线粒体呼吸链超级复合物CICIII2CIV。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116814670A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310468268.7
申请日：2023-04-27
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种表达结核分枝杆菌ATP合成酶的重组菌及其构建方法和表达方法，属于外源表达技术领域。本发明提供了一种表达结核分枝杆菌ATP合成酶的重组菌的构建方法，以含有辅助基因敲除质粒的耻垢分枝杆菌感受态为基底细胞，先转入带有亲和纯化标签的结核分枝杆菌ATP合成酶基因簇，再敲除耻垢分枝杆菌ATP合成酶基因组，反复传代后收集不含辅助基因敲除质粒的菌株，利用原核表达的方法向该菌株中转入结核分枝杆菌ATP合成酶基因簇，得表达结核分枝杆菌ATP合成酶的重组菌。利用本发明所述构建方法，解决了异源表达必需基因本底基因难以敲除以及多亚基蛋白复合物异源表达杂合复合物形成的问题。
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公开(公告)号：CN117917400A
公开(公告)日：2024-04-23
申请号：CN202311358998.8
申请日：2023-10-19
IPC: C07D215/58 , A61P31/06 , A61K31/47 , A61K31/5377 , A61K31/496
Abstract: 本发明提供了一种具有式(I)所示结构的2‑甲基‑4‑喹啉酮类化合物或者其药学上可接受的盐或者其立体异构体或者其前药分子，及其药物组合物和应用。该类化合物可以高效抑制Cyt‑bd的活性，可用于制备防治结核病的药物，并且可与Cyt‑bcc抑制剂产生协同抗结核的效果。#imgabs0#
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公开(公告)号：CN114645025B
公开(公告)日：2023-12-22
申请号：CN202210387022.2
申请日：2022-04-13
Applicant: 南开大学
IPC: C12N9/00
Abstract: 本发明属于蛋白纯化技术领域，具体涉及一种人源ATP合成酶的纯化方法。本发明提供了一种人源ATP合成酶的纯化方法，制备人源线粒体粗提物，溶膜，得线粒体总蛋白溶液；通过阳离子交换柱、阴离子交换柱及凝胶排阻色谱柱的手段分离纯化人源ATP合成酶。本发明提供的纯化方法具有操作方法简单，实验成本低，时长短的特点，得到的人源ATP合成酶蛋白纯度高，生理活性好，可用于后续的结构功能及药物发现研究。
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公开(公告)号：CN116103251A
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202211600937.3
申请日：2022-12-13
Applicant: 南开大学
IPC: C12N9/02
Abstract: 本发明属于蛋白纯化技术领域，具体涉及一种人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ的纯化方法。本发明提供的纯化方法：将人源线粒体复合物总蛋白溶液装入填装有Anti‑Flag填料的色谱柱中进行亲和柱层析纯化，将得到的人源线粒体呼吸链复合物II粗提液装入凝胶排阻色谱柱中进行凝胶排阻柱层析纯化，采用第二洗脱剂进行第二洗脱后收集第二洗脱液，得到所述人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ纯品；所述人源线粒体复合物总蛋白溶液中的人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ的SDHD亚基C端融合有3×Flag标签。本发明提供的纯化方法具有操作流程简单，实验成本较低，获得的人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ纯度较高，生理活性好的优势，可用于后续的结构功能及药物发现研究。
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公开(公告)号：CN114645025A
公开(公告)日：2022-06-21
申请号：CN202210387022.2
申请日：2022-04-13
Applicant: 南开大学
IPC: C12N9/00
Abstract: 本发明属于蛋白纯化技术领域，具体涉及一种人源ATP合成酶的纯化方法。本发明提供了一种人源ATP合成酶的纯化方法，制备人源线粒体粗提物，溶膜，得线粒体总蛋白溶液；通过阳离子交换柱、阴离子交换柱及凝胶排阻色谱柱的手段分离纯化人源ATP合成酶。本发明提供的纯化方法具有操作方法简单，实验成本低，时长短的特点，得到的人源ATP合成酶蛋白纯度高，生理活性好，可用于后续的结构功能及药物发现研究。
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