公开(公告)号：CN117069862A

公开(公告)日：2023-11-17

申请号：CN202311132536.4

申请日：2023-09-05

Applicant: 南开大学

Inventor： 贡红日 ,  杜占强

IPC: C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C07K1/16 ,  C07K1/36 ,  C07K1/14 ,  C12N15/70

Abstract: 本发明提供了一种分枝杆菌属纳米载体蛋白的纯化方法，属于蛋白纯化技术领域。本发明提供的纯化方法包括以下步骤：提供大肠杆菌总蛋白溶液，所述大肠杆菌总蛋白溶液中含有分枝杆菌属纳米载体蛋白，所述分枝杆菌属纳米载体蛋白的亚基C端融合有1×Flag标签；将所述大肠杆菌总蛋白溶液进行Flag标签亲和柱层析纯化，得到分枝杆菌属纳米载体蛋白粗提液；将所述分枝杆菌属纳米载体蛋白粗提液进行凝胶排阻柱层析纯化，得到分枝杆菌属纳米载体蛋白纯品。本发明提供的纯化方法简单易行，获得的分枝杆菌属纳米载体蛋白产量大，纯度高，可用于后续的分枝杆菌属纳米载体蛋白结构功能及药物递送研究。

公开(公告)号：CN117024606A

公开(公告)日：2023-11-10

申请号：CN202311132534.5

申请日：2023-09-05

Applicant: 南开大学

Inventor： 贡红日 ,  杜占强 ,  饶子和

IPC: C07K19/00 ,  C07K1/22 ,  C07K1/16 ,  C07K1/36 ,  C07K1/14 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明提供了一种人源线粒体呼吸链超级复合物CICIII2CIV的纯化方法，属于蛋白纯化技术领域。本发明先提供人源线粒体总蛋白溶液，所述人源线粒体总蛋白溶液包括由人源线粒体呼吸链复合物I、III和IV组装而成的人源线粒体呼吸链超级复合物CICIII2CIV，所述人源线粒体呼吸链复合物I的NDUFS3亚基C端融合有3×Flag标签；然后将所述人源线粒体总蛋白溶液依次进行Flag标签亲和柱层析纯化和凝胶排阻柱层析纯化，得到人源线粒体呼吸链超级复合物CICIII2CIV纯品。本发明提供的纯化方法能获得纯度高、产量大且生理活性好的人源线粒体呼吸链超级复合物CICIII2CIV。

公开(公告)号：CN116103251A

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202211600937.3

申请日：2022-12-13

Applicant: 南开大学

Inventor： 贡红日 ,  饶子和 ,  杜占强

IPC: C12N9/02

Abstract: 本发明属于蛋白纯化技术领域，具体涉及一种人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ的纯化方法。本发明提供的纯化方法：将人源线粒体复合物总蛋白溶液装入填装有Anti‑Flag填料的色谱柱中进行亲和柱层析纯化，将得到的人源线粒体呼吸链复合物II粗提液装入凝胶排阻色谱柱中进行凝胶排阻柱层析纯化，采用第二洗脱剂进行第二洗脱后收集第二洗脱液，得到所述人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ纯品；所述人源线粒体复合物总蛋白溶液中的人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ的SDHD亚基C端融合有3×Flag标签。本发明提供的纯化方法具有操作流程简单，实验成本较低，获得的人源线粒体呼吸链复合物Ⅱ纯度较高，生理活性好的优势，可用于后续的结构功能及药物发现研究。