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公开(公告)号：CN102443555A
公开(公告)日：2012-05-09
申请号：CN201110362088.8
申请日：2011-11-16
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了链霉菌Streptomyces sp.NK-660及其用于生产ε-聚赖氨酸的发酵培养方法。该方法包括以下步骤：首先将保藏在贝纳特斜面上的NK660取一环孢子，活化于LB培养基中作为种子液，培养24h后以10％的接种量接种于发酵培养基，发酵培养72-96h；发酵液离心去除菌体，利用阳离子交换树脂吸附产物，洗脱液经过浓缩，脱色和透析后冷冻干燥得到ε-聚赖氨酸固体粉末。本发明中分离到的链霉菌Streptomyces sp.NK660，具有很强的ε-聚赖氨酸生产能力，具有大规模工业化应用的潜力。
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公开(公告)号：CN102618465B
公开(公告)日：2014-02-19
申请号：CN201210081685.8
申请日：2012-03-26
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一株链霉菌Streptomyces sp.NK-49及其应用，即利用该菌生产ε-聚赖氨酸的发酵培养和产物分离纯化的方法。该方法包括以下步骤：首先将保存于贝纳特斜面上的链霉菌Streptomyces sp.NK49，挑取一环孢子接种在高氏一号培养基中作为种子进行活化培养20-36h；将种子液以5-15％的接种量接种至以淀粉水解糖或淀粉水解糖与甘油为碳源的合成培养基中，摇瓶发酵培养48-96h；发酵结束后，发酵液6000～10000rpm离心处理10～20min去除菌体，收集上清，利用5M NaOH溶液将上清调整pH至8，过滤祛除沉淀的杂蛋白；利用弱酸型阳离子交换树脂吸附去除了杂蛋白的上清液中的ε-聚赖氨酸分子，蒸馏水洗涤；利用0.1-0.7mol/L的稀盐酸洗脱吸附的产物，洗脱液利用5M NaOH溶液将pH调整到中性；将中性的洗脱液进行透析，去除小分子杂质，冷冻干燥，得到ε-聚赖氨酸固体粉末；本发明中分离到的链霉菌Streptomyces sp.NK49，具有工业化生产ε-聚赖氨酸的潜力。
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公开(公告)号：CN102443555B
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201110362088.8
申请日：2011-11-16
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了链霉菌Streptomyces sp.NK-660及其用于生产ε-聚赖氨酸的发酵培养方法。该方法包括以下步骤：首先将保藏在贝纳特斜面上的NK660取一环孢子，活化于LB培养基中作为种子液，培养24h后以10％的接种量接种于发酵培养基，发酵培养72-96h；发酵液离心去除菌体，利用阳离子交换树脂吸附产物，洗脱液经过浓缩，脱色和透析后冷冻干燥得到ε-聚赖氨酸固体粉末。本发明中分离到的链霉菌Streptomyces sp.NK660，具有很强的ε-聚赖氨酸生产能力，具有大规模工业化应用的潜力。
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公开(公告)号：CN102618465A
公开(公告)日：2012-08-01
申请号：CN201210081685.8
申请日：2012-03-26
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一株链霉菌Streptomyces sp.NK-49及其应用，即利用该菌生产ε-聚赖氨酸的发酵培养和产物分离纯化的方法。该方法包括以下步骤：首先将保存于贝纳特斜面上的链霉菌Streptomyces sp.NK49，挑取一环孢子接种在高氏一号培养基中作为种子进行活化培养20-36h；将种子液以5-15％的接种量接种至以淀粉水解糖或淀粉水解糖与甘油为碳源的合成培养基中，摇瓶发酵培养48-96h；发酵结束后，发酵液6000～10000rpm离心处理10～20min去除菌体，收集上清，利用5M NaOH溶液将上清调整pH至8，过滤祛除沉淀的杂蛋白；利用弱酸型阳离子交换树脂吸附去除了杂蛋白的上清液中的ε-聚赖氨酸分子，蒸馏水洗涤；利用0.1-0.7mol/L的稀盐酸洗脱吸附的产物，洗脱液利用5M NaOH溶液将pH调整到中性；将中性的洗脱液进行透析，去除小分子杂质，冷冻干燥，得到ε-聚赖氨酸固体粉末；本发明中分离到的链霉菌Streptomyces sp.NK49，具有工业化生产ε-聚赖氨酸的潜力。
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