公开(公告)号：CN101974560A

公开(公告)日：2011-02-16

申请号：CN201010511206.2

申请日：2010-10-19

Applicant: 南开大学

Inventor： 白艳玲 ,  周腊梅 ,  董荣 ,  徐海津 ,  张秀明 ,  乔明强

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/113 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 一种植物线粒体通用表达载体pSK-E-P/T构建及启动子活性鉴定。本发明首次发现黄瓜线粒体质粒pC3(序列1)，在此基础上，通过PCR获得黄瓜线粒体基因cob上游启动子序列(序列2)及基因atp9下游终止子序列(序列3)，构建成植物线粒体通用表达载体pSK-E-P/T(序列4)，该载体上还带有在大肠杆菌中复制的复制子及Ampr抗性基因，非常方便外源基因的克隆和重组子筛选。经测定启动子-lacZ报告基因融合质粒在大肠杆菌中酶活性和荧光显微镜观察pSK-E-GFP转化大肠杆菌的绿色荧光，证明表达载体上启动子具有转录活性。本发明提供了通过线粒体转化途径研究细胞凋亡等与线粒体相关的重要生命科学热点问题的新型分子生物学技术工具。