公开(公告)号：CN111518824A

公开(公告)日：2020-08-11

申请号：CN202010353482.4

申请日：2020-04-29

Applicant: 南开大学

Inventor： 乔明强 ,  刘宇杰 ,  张梦晴 ,  白艳玲 ,  张秀明 ,  徐海津

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/67

Abstract: 一种提高外源核酸转化效率的方法，HGFI是一种灰树花真菌中产生的高表面活性蛋白，通过质粒DNA与HGFI的复配，提高利用外源核酸转化受体菌的效率。本方法大致可分为4步：1.毕赤酵母(Pichia pastoris)异源表达真菌疏水蛋白HGFI并纯化，获得纯度95％以上的HGFI蛋白，作为复配样品。2.将HGFI与质粒以固定比例10:1混合得到质粒浓度为10μg/mL的混合液。3.将混合液于30℃恒温培养箱中静置温浴1h。4.将处理后的质粒混合物以化学转化法转化入受体菌中。该转化方法使目前分子生物学中常用的工程菌大肠杆菌DH5α的转化率增加约60％，操作效率的提高可为科研工作者提供巨大便利。

公开(公告)号：CN111518824B

公开(公告)日：2022-07-26

申请号：CN202010353482.4

申请日：2020-04-29

Applicant: 南开大学

Inventor： 乔明强 ,  刘宇杰 ,  张梦晴 ,  白艳玲 ,  张秀明 ,  徐海津

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/67

Abstract: 一种提高外源核酸转化效率的方法，HGFI是一种灰树花真菌中产生的高表面活性蛋白，通过质粒DNA与HGFI的复配，提高利用外源核酸转化受体菌的效率。本方法大致可分为4步：1.毕赤酵母(Pichia pastoris)异源表达真菌疏水蛋白HGFI并纯化，获得纯度95％以上的HGFI蛋白，作为复配样品。2.将HGFI与质粒以固定比例10:1混合得到质粒浓度为10μg/mL的混合液。3.将混合液于30℃恒温培养箱中静置温浴1h。4.将处理后的质粒混合物以化学转化法转化入受体菌中。该转化方法使目前分子生物学中常用的工程菌大肠杆菌DH5α的转化率增加约60％，操作效率的提高可为科研工作者提供巨大便利。