一种肠出血性大肠杆菌Tir蛋白多克隆抗体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118561995A

    公开(公告)日:2024-08-30

    申请号:CN202410825868.9

    申请日:2024-06-25

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明公开一种肠出血性大肠杆菌Tir蛋白多克隆抗体及其制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明将如SEQ ID NO.3所示的编码Tir蛋白的目的基因片段重组于pET‑32a(+)载体的Nde I酶切位点和BamH I酶切位点之间得到重组表达载体,重组表达载体导入E.coli BL21得到重组菌,将所述重组菌进行诱导表达和纯化,获得融合蛋白;所述融合蛋白四次免疫小鼠得到肠出血性大肠杆菌Tir蛋白多克隆抗体。所述多克隆抗体进行IgG亚型抗体富集,得到效价更高的抗体。本发明制备的多克隆抗体能够特异性识别肠出血性大肠杆菌Tir蛋白。

    副溶血弧菌O抗原血清型特异检测引物及多重PCR检测方法

    公开(公告)号:CN111471782A

    公开(公告)日:2020-07-31

    申请号:CN202010384422.9

    申请日:2020-05-09

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明提供了用于检测副溶血弧菌全部13个O抗原血清型的特异寡核苷酸序列及其应用,所述寡核苷酸包括:(1)副溶血弧菌全部13个O抗原血清型各自的特异基因中分别选取的2段DNA片段,如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:24所示。本发明还建立了一套利用上述寡核苷酸,检测副溶血弧菌全部13个O抗原血清型的多重PCR检测系统及检测方法,首次建立了利用分子生物学手段对全部O抗原血清型的副溶血弧菌进行检测的技术,对于这一重要致病菌的临床鉴定和流行病学监测具有重要意义。

    用于检测副溶血弧菌7个常见致病性K抗原血清型的液相芯片及应用

    公开(公告)号:CN111549154A

    公开(公告)日:2020-08-18

    申请号:CN202010401875.8

    申请日:2020-05-13

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明提供了用于检测副溶血弧菌7种常见致病性K抗原血清型的特异寡核苷酸序列,连接在标记有不同荧光染料磁性微球上的寡核苷酸探针,该寡核苷酸包括:从副溶血弧菌K6、K8、K25、K41、K56和K68共6种血清型的wzy基因中,以及K60的wzx基因中各自选取的一种DNA片段。本发明结合Bio-Rad公司的Bio-Plex 200悬液芯片系统,建立了一套用于检测副溶血弧菌7种常见致病性K抗原血清型的悬液芯片检测系统及其检测方法,填补了利用分子生物学方法对副溶血弧菌常见致病性K抗原血清型检测的技术空白,对于这一重要致病菌的临床鉴定和流行病学监测具有重要意义。

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