公开(公告)号：CN116426559A

公开(公告)日：2023-07-14

申请号：CN202310534971.3

申请日：2023-05-12

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 仲森林 ,  黄利平 ,  祁映璇 ,  管景灏 ,  姚瑶 ,  费正月 ,  刘冠楠

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/64 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种利用长引物快速从头合成目的片段的方法，包括如下步骤：(1)设计合成多条存在碱基重叠、覆盖整个目的片段的长引物；(2)使用偶数条步骤(1)获得的长引物交替重叠延伸进行PCR扩增，获得PCR产物；(3)利用一步法同源重组将步骤(2)获得的PCR产物直接整合到线性化载体中，得到重组产物；(4)将步骤(3)获得的重组产物转化入感受态细胞，获得带有目的基因的转化子；所述方法从目的基因中长引物的设计到最终产品耗时2～5h。本发明所提供的方法适用于长片段DNA快速合成，具有合成周期短，正确率高的特点，适用于具有高G+C含量、重复序列或复杂的二级结构的DNA合成。

公开(公告)号：CN117844842A

公开(公告)日：2024-04-09

申请号：CN202311775372.7

申请日：2023-12-21

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 王天荆 ,  徐振轩 ,  张萍 ,  刘冠楠 ,  章益蜻

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/65 ,  C12N1/19 ,  C12N15/12 ,  G01N21/64 ,  C12R1/865

Abstract: 铜是生命的必需元素，是某些活性蛋白的辅基。但是，过量的铜具有一定毒性，既对环境有害而威胁环境安全，又会通过食物链富集而损害人类健康。因此，建立灵敏、快速和可靠的铜离子生物检测方法尤为重要。本发明提出一种酿酒酵母铜离子生物传感器的信号级联反应机制模型。该酿酒酵母铜离子生物传感器，先通过响应Cu2+的启动子pCUP1控制信息素的表达，再由信息素激发MAPK信号联级，以启动下游的基因转录而产生GFP表达，从而灵敏、特异性定量检测Cu2+。对信号级联反应机制建模，并结合实验数据筛选和匹配能够增强GFP水平的模型参数，从而提高传感器灵敏度，达到更好的Cu2+检测效果。

公开(公告)号：CN111334546A

公开(公告)日：2020-06-26

申请号：CN202010217384.8

申请日：2020-03-25

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 刘冠楠 ,  章文明 ,  黄雨欣 ,  陆然 ,  刘颖 ,  华芷钰 ,  倪怡静 ,  顾春阳 ,  邓哲文 ,  邓涵之 ,  迟波

IPC: C12P21/02 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/81 ,  C12N5/0783 ,  A61K38/20 ,  A61K9/06 ,  A61K47/34 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了人白介素2-红色荧光蛋白在毕赤酵母中的重组表达及其体外缓释促进T细胞增殖的应用，其包括如下步骤：将重组人白介素2-红色荧光蛋白的毕赤酵母表达菌株的种子液接种到发酵培养基中发酵，当发酵液的OD600值趋于稳定时，停止发酵，将发酵液纯化处理后，即得到人白介素2-红色荧光蛋白。与现有技术相比，本发明中以pGAP-KanR为组成型表达质粒，采用了以甘油为碳源的发酵培养基，实现了连续高密发酵，操作简便，成本更低，解决了现有技术中发酵过程中需要额外添加物质进行诱导的缺陷。