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公开(公告)号：CN119799666A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202510023333.4
申请日：2025-01-07
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种亚磷酸脱氢酶突变体、生物材料、制备方法及应用，该亚磷酸脱氢酶突变体相较于野生型亚磷酸脱氢酶，具有第29位、第31位、第59位、第68位、第185位、第275位中的一个或多个氨基酸残基突变。该突变体有效提高了还原型辅酶NADH的再生效率，其中，突变体N29T/Q185C/K275E的催化效率是野生型亚磷酸脱氢酶的催化效率的1.7倍；该突变体反应条件温和、范围宽，反应温度为15‑40℃，反应pH为4‑10，稳定性较野生型亚磷酸脱氢酶有提高，具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN118480519A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410527080.X
申请日：2024-04-29
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种底物选择性提高的核糖醇脱氢酶突变体及其应用，核糖醇脱氢酶突变体由野生型核糖醇脱氢酶的底物结合位点的氨基酸残基发生定向突变得到，包含E168D、V172T、F310W中的任意一种突变或其组合。本发明公开的核糖醇脱氢酶突变体可以在果糖和阿洛酮糖的混合底物体系中，选择性识别果糖作为底物，催化生成山梨醇，实现底物选择性和转化率的显著提高；本发明提供一种包含底物选择性提高的核糖醇脱氢酶突变体的催化剂，催化反应的温度条件与酸碱度条件易于实现；本发明提供编码上述核糖醇脱氢酶突变体的基因、包含编码上述核糖醇脱氢酶突变体的基因的表达载体、包含该表达载体的重组菌；本发明还提供上述核糖醇脱氢酶突变体的制备及应用方法。
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公开(公告)号：CN119082063A
公开(公告)日：2024-12-06
申请号：CN202411383113.4
申请日：2024-09-30
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性的异丙醇脱氢酶突变体及其应用，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第18位、第91位、第143位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第18位异亮氨酸Ile突变为亮氨酸Leu，第91位丙氨酸Ala突变为甘氨酸Gly，第143位异亮氨酸Ile突变为丙氨酸Ala。与野生型的异丙醇脱氢酶相比，本发明提供的异丙醇脱氢酶突变体以廉价的异丙醇作为底物，可以还原氧化型辅酶NAD+为还原型辅酶NADH，实现辅酶的高效循环再生，具有很好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN118480521A
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410527085.2
申请日：2024-04-29
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种高酶活的过氧化氢酶突变体及其应用，过氧化氢酶突变体由野生型过氧化氢酶的活性位点的氨基酸残基进行定向进化得到，包含A132G、T149L、M158L、M349V中的任意一种突变或其组合。本发明公开的过氧化氢酶突变体的酶活显著提高；本发明提供一种包含高酶活的过氧化氢酶突变体的催化剂，催化反应的温度条件与酸碱度条件易于实现，具有工业化生产应用基础；本发明提供编码上述过氧化氢酶突变体的基因、包含编码上述过氧化氢酶突变体的基因的表达载体、包含该表达载体的重组菌；本发明提供上述过氧化氢酶突变体的制备及应用方法。
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公开(公告)号：CN119220511A
公开(公告)日：2024-12-31
申请号：CN202411446057.4
申请日：2024-10-16
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种还原型辅酶NADH氧化酶突变体及其应用，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第156位、第158位、第294位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第156位甘氨酸Gly突变为丙氨酸Ala，第158位异亮氨酸Ile突变为组氨酸His，第294位异亮氨酸Ile突变为苯丙氨酸Phe。本发明通过NADH氧化酶的活性位点进行突变，最终获得的突变体提高了还原型辅酶NADH还原为氧化型辅酶NAD+的再生效率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118652867A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202410964525.0
申请日：2024-07-18
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种D‑氨基酸氧化酶突变体及其在制备L‑草铵膦中的应用，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第50位、第52位、第331位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第50位天冬酰胺Asn突变为组氨酸His或精氨酸Arg，第52位亮氨酸Leu突变为天冬酰胺Asn，第331位丙氨酸Ala突变为丝氨酸Ser；通过对D‑氨基酸氧化酶的活性位点进行突变，最终获得的突变体提高了在氧化D‑草铵膦为2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]丁酸的生产工艺中的催化效率。
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公开(公告)号：CN118460490A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410592571.2
申请日：2024-05-14
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种高底物选择性的核糖醇脱氢酶突变体及其在催化还原D‑阿洛酮糖中的应用，所述核糖醇脱氢酶突变体由野生型核糖醇脱氢酶定向进化得到，包含V152L、E157N、V193L中的任意一种突变或其组合。本发明公开的核糖醇脱氢酶突变体可以在D‑阿洛酮糖与D‑果糖的混合底物体系中，选择性识别D‑阿洛酮糖作为底物，实现底物选择性和转化率的显著提高；本发明公开一种包含底物选择性提高的核糖醇脱氢酶突变体的产品、制备方法及应用，所述酶突变体催化反应所需温度与酸碱度易于实现；本发明公开编码上述核糖醇脱氢酶突变体的核酸分子、包含编码上述核糖醇脱氢酶突变体的核酸分子的表达载体、包含该表达载体的重组细胞。
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公开(公告)号：CN118374468A
公开(公告)日：2024-07-23
申请号：CN202410592573.1
申请日：2024-05-14
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种转氨酶突变体及其在(S)‑苯并二氢吡喃‑4‑胺制备上的应用，所述转氨酶突变体由野生型转氨酶定向进化得到，包含C60W、V242A、L272M中的任意一种突变或其组合。本发明公开的转氨酶突变体可以底物特异性识别苯并二氢吡喃‑4‑酮，高效合成(S)‑苯并二氢吡喃‑4‑胺，实现立体选择性和产率的显著提高；本发明公开一种制备(S)‑苯并二氢吡喃‑4‑胺的产品，所述产品包含具有高产率、高立体性选择性的转氨酶突变体或其编码基因或相应表达载体或相应重组细胞，所述产品应用的温度条件与酸碱度条件易于实现，具有工业化应用基础；本发明还公开了该突变体的制备方法及其应用，有助于(S)‑苯并二氢吡喃‑4‑胺的工业化生产与应用。
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公开(公告)号：CN119242600A
公开(公告)日：2025-01-03
申请号：CN202411383853.8
申请日：2024-09-30
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了一种细胞色素P450BM3突变体及其在高选择性氧化1,8‑桉叶油素生成2‑羟基‑1,8‑桉叶油素中的应用，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第171位、第87位、第307位、第437位这四个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第171位组氨酸His突变为亮氨酸Leu，第87位苯丙氨酸Phe突变为丙氨酸Ala，第307位谷氨酰胺Gln突变为组氨酸His，第437位亮氨酸Leu突变为缬氨酸Val；通过对细胞色素P450BM3的活性位点进行突变，最终获得了具有高选择性氧化1,8‑桉叶油素生成2‑羟基‑1,8‑桉叶油素的P450BM3突变体。
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公开(公告)号：CN119120418A
公开(公告)日：2024-12-13
申请号：CN202411383850.4
申请日：2024-09-30
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明公开了脱卤效率提高的卤醇脱卤酶突变体及其应用，野生型卤醇脱卤酶来自放射性土壤杆菌（Agrobacterium radiobacter AD1），使用定向进化的手段对其进行改造，筛选出脱卤效率提高的卤醇脱卤酶突变体，所述突变体的突变包括A83W、P84G、F86W中的至少一种。本发明提供的卤醇脱卤酶突变体能够对卤代醇类污染物2,3‑二氯‑1‑丙醇和3‑氯‑1,2‑丙二醇进行高效精准降解，降低其毒性，并产生高附加值产物，突变体A83W/P84G/F86W在1小时内对这两种物质的脱卤效率分别可达到42.2%和98.6%，是野生型的6倍和5.2倍；本发明提供的卤醇脱卤酶突变体在水相常温下即可实现高效脱卤，无需外加温控设备，具有高效率、低能耗、高选择性的特点，具备绿色低碳、经济便捷的产业应用优势，有利于污染物脱卤及资源化利用。
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