公开(公告)号：CN119060990A

公开(公告)日：2024-12-03

申请号：CN202411443601.X

申请日：2024-10-16

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  程冰洁 ,  余克洋 ,  屈展 ,  吴怡菲 ,  李志恒 ,  王天奇

IPC: C12N9/40 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种耐高温碱性α‑半乳糖苷酶突变体及其制备方法，所述突变体对来源于嗜维生素无氧芽孢杆菌的α‑半乳糖苷酶进行定点突变，将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第444位、第457位、第509位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第444位天冬酰胺Asn突变为苯丙氨酸Phe，第457位天冬氨酸Asp突变为甲硫氨酸Met，第509位精氨酸Arg突变为色氨酸Trp。本发明通过对嗜维生素无氧芽孢杆菌(Anoxybacillus vitaminiphilus WMF1)来源的α‑半乳糖苷酶进行定点突变，获得α‑半乳糖苷酶突变体具有良好的热稳定性和碱稳定性。

公开(公告)号：CN119060988A

公开(公告)日：2024-12-03

申请号：CN202411383859.5

申请日：2024-09-30

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  余克洋 ,  程冰洁 ,  吴怡菲 ,  袁紫燕 ,  曲展

IPC: C12N9/26 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种耐盐的α‑淀粉酶突变体及其应用，所述突变体由野生型α‑淀粉酶定向进化得到，包括第47位的谷氨酸突变为苯丙氨酸，或第202位的谷氨酸突变为苯丙氨酸，或第248位的谷氨酸突变为苯丙氨酸，或第352位的天冬氨酸突变为缬氨酸，或第248位的谷氨酸突变为苯丙氨酸且第352位的天冬氨酸突变为缬氨酸。本发明提供的α‑淀粉酶突变体具有较高的耐盐性能，在高浓度的钠离子、镁离子、钙离子溶液中的酶活性高于原始酶；本发明还提供了所述突变体的制备方法与应用，提供了包含具有较高的耐盐性能的α‑淀粉酶突变体或其编码基因或相应载体或相应重组细胞，优化了α‑淀粉酶在高浓度盐环境中的应用。

公开(公告)号：CN119120428A

公开(公告)日：2024-12-13

申请号：CN202411298447.1

申请日：2024-09-18

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  程冰洁 ,  余克洋 ,  吴怡菲 ,  赵熠昕

IPC: C12N9/26 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/14 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种耐酸性的α‑淀粉酶突变体及其制备方法，对贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)来源的α‑淀粉酶进行定点突变，所述突变为S242E、N569E、N605D中至少一种。本发明提供的α‑淀粉酶突变体具有良好的酸稳定性，在pH 1.9‑4.0时，本发明提供的α‑淀粉酶突变体催化淀粉水解的能力均有明显提升，增加了α‑淀粉酶在更宽的pH条件下的可用性，解决了现有α‑淀粉酶耐酸性较差而造成应用受限的问题。本发明对提高淀粉加工产业中的原料利用率和产品质量、降低生产成本具有显著效果，满足了能源、食品和饲料等领域中对于耐酸性α‑淀粉酶的需求，具有重要的社会和经济效益，应用前景广阔。

公开(公告)号：CN119020226A

公开(公告)日：2024-11-26

申请号：CN202411298421.7

申请日：2024-09-18

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  余克洋 ,  程冰洁 ,  吴怡菲 ,  肖奡

IPC: C12N1/20 ,  C12N1/38 ,  C12P21/02 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种高产特定表面活性素的枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）NJUXR‑YS001及其应用，所述枯草芽孢杆菌NJUXR‑YS001的保藏编号为CGMCC No.30289。本发明提供的枯草芽孢杆菌NJUXR‑YS001由诱变筛选得到，遗传稳定且能高产C15组分表面活性素，该菌株的表面活性素总产量达到1.85 g/L，其中C15组分表面活性素的产量1.32 g/L，占比达到71.3%；本发明提供的枯草芽孢杆菌NJUXR‑YS001使用常规的培养条件即可得到较高的C15组分表面活性素产量，适合于工业化生产，具有较高的应用价值和良好的开发前景。

公开(公告)号：CN119193551A

公开(公告)日：2024-12-27

申请号：CN202411444882.0

申请日：2024-10-16

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  吴怡菲 ,  余克洋 ,  程冰洁 ,  屈展 ,  黄锦贤

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种耐高浓度盐的内切β‑1,4‑葡聚糖酶突变体及其制备方法，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列第39位、第137位、第183位这三个位点中至少有一个氨基酸进行置换；第39位天冬氨酸Asp突变为苏氨酸Thr，第137位谷氨酸Glu突变为天冬酰胺Asn，第183位天冬氨酸Asp突变为丝氨酸Ser。通过对野生型内切β‑1,4‑葡聚糖酶进行三维建模确定突变位点，获得的突变体在含有大量盐分的环境下仍然能够保持较好的催化效率和稳定性，优化了内切β‑1,4‑葡聚糖酶在高浓度盐环境中的应用。

公开(公告)号：CN119799666A

公开(公告)日：2025-04-11

申请号：CN202510023333.4

申请日：2025-01-07

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  张文嘉 ,  吴怡菲 ,  范鑫龙 ,  蒋宛彤 ,  辛思蕊

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/70 ,  C12N15/53 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/26 ,  C12P19/36 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种亚磷酸脱氢酶突变体、生物材料、制备方法及应用，该亚磷酸脱氢酶突变体相较于野生型亚磷酸脱氢酶，具有第29位、第31位、第59位、第68位、第185位、第275位中的一个或多个氨基酸残基突变。该突变体有效提高了还原型辅酶NADH的再生效率，其中，突变体N29T/Q185C/K275E的催化效率是野生型亚磷酸脱氢酶的催化效率的1.7倍；该突变体反应条件温和、范围宽，反应温度为15‑40℃，反应pH为4‑10，稳定性较野生型亚磷酸脱氢酶有提高，具有较高的应用价值。

公开(公告)号：CN118910016A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202411305408.X

申请日：2024-09-19

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  余克洋 ,  王瑾丰 ,  曲展 ,  程冰洁 ,  吴怡菲

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/14 ,  C12P19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明以地芽孢杆菌（Geobacillus sp. 70PC53）来源的内切葡聚糖酶作为原始酶，公开了3种pH耐受性提高的内切葡聚糖酶突变体，分别为V217L、A123S/I165V和A123G/I165L/V185S/V217C。本发明提供的内切葡聚糖酶突变体pH耐受性优于原始酶，在pH9.0的条件下，突变体相比原始酶的残留酶活可提高66%；本发明提供的内切葡聚糖酶突变体在pH3.0~11.0内的相对酶活均高于原始酶，能够在该条件下保持稳定高效的催化性能，工业应用前景较好。

公开(公告)号：CN118910015A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202411305403.7

申请日：2024-09-19

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  余克洋 ,  曲展 ,  王瑾丰 ,  吴怡菲 ,  程冰洁

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/14 ,  C12P19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明以地芽孢杆菌（Geobacillus sp.70PC53）来源的内切葡聚糖酶作为原始酶，公开了3种热稳定性提高的内切葡聚糖酶突变体，分别为V217L、N264Y和R170P/N264Y。本发明提供的内切葡聚糖酶突变体热稳定性优于原始酶，经95℃处理后，突变体相比原始酶的残留酶活可提高217%；本发明提供的内切葡聚糖酶突变体在65℃~95℃内的相对酶活均高于原始酶，能够在更高且更广的温度范围内保持良好的催化性能，工业应用前景较好。