公开(公告)号：CN118726326A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410754413.2

申请日：2024-06-12

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  甘忠文 ,  曹家南 ,  董佳敏 ,  王子妍

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12P7/22

Abstract: 本发明公开了一种酚酸脱羧酶突变体及其制备和应用，所述突变体是将SEQ IDNo.1所示氨基酸序列第40位、第92位、第131位这三个位点中至少有一个氨基酸进行突变；第40位异亮氨酸Ile突变为缬氨酸Val；第92位异亮氨酸Ile突变为苏氨酸Thr、缬氨酸Val、中的任意一种；第131位缬氨酸Val突变为亮氨酸Leu。本发明所述酚酸脱羧酶突变体，通过定点突变的方法进行改造，从而改变氨基酸序列，实现蛋白结构和功能的改变，酶活性提高，对阿魏酸的催化活性相对于原始酶大幅提高。

公开(公告)号：CN118773151A

公开(公告)日：2024-10-15

申请号：CN202410754406.2

申请日：2024-06-12

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  董佳敏 ,  王子妍 ,  曹家南 ,  甘忠文

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12P7/24

Abstract: 本发明公开了一种异丁香酚双加氧酶的突变体及其制备方法和应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列中，第216位，第281位，第283位，第307位中至少有一个突变。通过对异丁香酚双加氧酶进行合理设计，最终获得的突变体，具有较高的产率，实现由廉价异丁香酚向高价值的香料香兰素的高效合成，为工业合成香兰素奠定基础。

公开(公告)号：CN118726284A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410754410.9

申请日：2024-06-12

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  曹家南 ,  甘忠文 ,  董佳敏 ,  王子妍

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/13 ,  C12P7/24

Abstract: 本发明公开了一种生物催化合成香兰素的双加氧酶的突变体及其制备方法与应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列中，在332位，第401位，第553位中至少有一个突变；通过对4‑乙烯愈创木酚的芳香族双加氧酶序列进行突变，经过筛选，该系列突变体能够高高效催化4‑乙烯愈创木酚生成香兰素，其具有比模板高出5～7倍的产率。

公开(公告)号：CN119876079A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202510046363.7

申请日：2025-01-13

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  董佳敏 ,  潘文进 ,  曹家南 ,  蒙玉培 ,  甘忠文 ,  彭骋

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/11 ,  C12P19/32 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了多聚磷酸激酶突变体及其制备方法和应用，野生型多聚磷酸激酶来自铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa PAO1，使用定向进化的手段对其活性位点进行突变，得到了催化合成ATP活性高的多聚磷酸激酶突变体，其对底物ADP或AMP的相对活性远高于野生型，所述突变为D307M、W408A、Y431P中的至少一种，或E304V、P331S、Y431P中的至少一种。本发明实现了由廉价底物向高价值产物的高效合成，有助于ATP的工业生产，在医药等领域中具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN119709670A

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202411935971.5

申请日：2024-12-26

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  董佳敏 ,  潘文进 ,  曹家南 ,  甘忠文 ,  顾光桥 ,  蒙玉培

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了4‑丙基愈创木酚氧化酶突变体及其制备方法和应用，野生型4‑丙基愈创木酚氧化酶来自简青霉Penicillium simplicissimum，使用定向进化的手段对其活性中心进行改造，得到了具有较高活性、顺反选择性和反式异丁香酚产率的4‑丙基愈创木酚氧化酶突变体D170E、S426T、S50Q/D170E、D170E/L411V和D170E/L411V/S106C，实现了由廉价4‑丙基愈创木酚向高价值的反式异丁香酚的高效合成，有利于反式异丁香酚的工业化合成与应用。

公开(公告)号：CN119391663A

公开(公告)日：2025-02-07

申请号：CN202411298449.0

申请日：2024-09-18

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  王子妍 ,  曹家南 ,  潘文进 ,  董佳敏 ,  甘忠文 ,  袁紫燕

IPC: C12N9/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种高产诺卡酮的醇脱氢酶突变体及其制备方法，对来源于益智（Alpinia oxyphylla）的醇脱氢酶进行定点突变，所述突变为S197V、M144C、L196A中的至少一种。本发明提供的醇脱氢酶突变体具有高催化活性，突变体M144C/L196A/S197V催化诺卡醇制备诺卡酮的产率可达99%，是原始酶的4.32倍；所述醇脱氢酶突变体催化合成诺卡酮所需的生产工艺简单、反应条件温和、生产过程环保，有利于诺卡酮的工业化生产，应用前景广阔。

公开(公告)号：CN118620855A

公开(公告)日：2024-09-10

申请号：CN202410799647.9

申请日：2024-06-20

Applicant: 南京大学

Inventor： 任鑫坤 ,  董佳敏 ,  曹家南 ,  甘忠文 ,  王子妍 ,  潘文进

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/70 ,  C12N15/53 ,  C12N1/21 ,  C12P7/54 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种乙醛脱氢酶的突变体及其制备方法和应用，所述突变体是将SEQ ID No.1所示氨基酸序列中，第119位，第123位，第268位，第292位，第425位至少有一个氨基酸进行置换。本发明利用蛋白质工程技术，通过定点突变，对乙醛脱氢酶进行改造，提高了其酶活性和催化效率。