栀子提取物通过特异性抑制UCP2提高胰岛素分泌的方法

    公开(公告)号:CN100469376C

    公开(公告)日:2009-03-18

    申请号:CN200510022659.8

    申请日:2005-12-27

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明属于分子内分泌学和细胞生物学技术领域,是具体涉及用栀子提取物体外培养小鼠胰岛细胞,通过特异性抑制解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)的表达,从而刺激胰岛素分泌的方法。本发明将栀子经过水煎煮,大孔树脂萃取,乙醇稀释以及减压冻干,得到浓缩提取物。用该提取物培养小鼠胰岛细胞,能显著刺激野生型胰岛细胞的胰岛素分泌量,但对UCP2表达缺失的胰岛细胞没有此种效应。本发明阐明了栀子提取物通过特异性抑制UCP2蛋白的表达,提高胰岛素分泌的重要生物学现象,揭示了栀子治疗糖尿病的分子机制:为中医治疗II型糖尿病提供了现代分子生物学的理论依据。

    文昌鱼解偶联蛋白基因及其应用

    公开(公告)号:CN101058810A

    公开(公告)日:2007-10-24

    申请号:CN200710021601.0

    申请日:2007-04-17

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域。具体涉及文昌鱼解偶联蛋白(uncoupling protein,UCP)分子克隆及功能研究。本发明应用简并引物和3’,5’-RACE首次从文昌鱼中克隆了解偶联蛋白(uncoupling protein,UCP)基因。它广泛表达于肌肉、肠道和鳃等组织。低温(8℃和10℃)处理第三日可使UCP表达增高,表明它参与低温条件下的体温调节;饥饿14日UCP表达明显降低,表明它参与能量代谢的调节。UCP与多种疾病相关。如,糖尿病、心血管疾病以及肿瘤等。因此,以UCP作为靶点,可以制备治疗这些疾病的药物。

    用于治疗肿瘤转移的真核表达载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN1884554A

    公开(公告)日:2006-12-27

    申请号:CN200610085445.X

    申请日:2006-06-16

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明属于生制药技术领域,所述构建含有Bikunin的真核表达载体pSecTag2B-Bikunin所表达的产物为带有Myc和组氨酸标签的融合蛋白。本发明应用RT-PCR方法,从人肝细胞系L02扩增Bikunin,将其克隆于pMD18-T SimpleVector中构建pMD18-T-Bikunin,经酶切、PCR及测序鉴定后,将Bikunin亚克隆至真核表达载体pSecTag 2B中,经酶切及PCR鉴定,证明构建成功含有Bikunin的真核表达载体pSecTag2B-Bikunin。用磷酸钙沉淀法转染NIH3T3细胞,24小时后,Western blot检测浓缩25倍的细胞培养上清,证明有融合蛋白的表达。该蛋白作为生物制剂可用于肿瘤转移的治疗。

    肉桂提取物在预防和治疗肌肉萎缩性疾病中的应用

    公开(公告)号:CN1927269A

    公开(公告)日:2007-03-14

    申请号:CN200610041432.2

    申请日:2006-09-06

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明属于生物制药技术领域,所述肉桂水提取物灌胃C57BL/6小鼠,诱导过氧化物酶体增殖因子活化受体γ共活化因子1α(Peroxisome proliferator-activated receptor-γcoactivator 1α,PGC-1α)上调,导致肌肉类型的转变,以达到预防和治疗肌肉萎缩性病变。本发明将肉桂研磨成粉末,按每克肉桂加入25毫升沸水,密闭,直至药液冷却至室温。2000rpm 4℃离心10分钟,留取上清,是为40mg/ml肉桂药液,密闭保存于4℃。按0.4mg/g体重灌胃10-12周龄C57BL/6小鼠,第一次和第二次间隔24小时,第二次和第三次间隔12小时,第三次灌胃后6小时,处死小鼠分离骨骼肌。用肉桂提取物灌胃小鼠,能显著刺激小鼠骨骼肌II型肌中PGC-1α的表达。本发明阐明了肉桂提取物刺激PGC-1α在骨骼肌中的表达,可做为预防和治疗肌肉萎缩性疾病的药物。

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