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公开(公告)号：CN112011575A
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN202010751910.9
申请日：2020-07-30
Applicant: 南京医科大学附属逸夫医院
IPC: C12N15/89 , C12N15/85 , C12N15/12 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开一种Hspa12b基因敲除小鼠模型的构建方法，根据小鼠Hspa12b基因第3-7外显子序列，基于CRISPR/Cas9系统设计靶向基因sgRNA；sgRNA与Cas9核酸酶的mRNA经体外转录后，显微注射到小鼠的精卵中，注射后的受精卵胚胎移植到假孕母鼠体内，获得F0小鼠；提取F0代小鼠尾部DNA，经PCR扩增产物测序，鉴定基因型，获得阳性F0代小鼠；将F0小鼠分别与野生型小鼠交配，获得杂合子小鼠F1代，并进行鼠尾鉴定；将F1代小鼠杂交获得F2代纯合子小鼠。本发明小鼠模型的构建方法研究HSPA12B特异性表达于血管内皮细胞中，参与调控内皮细胞的迁移、增殖和血管新生，适合用Hspa12b基因条件性敲除动物模型研究心血管问题，为诊断、治疗提供理论基础。
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公开(公告)号：CN112852945B
公开(公告)日：2023-01-06
申请号：CN202110010558.8
申请日：2021-01-06
Applicant: 南京医科大学附属逸夫医院
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开一种以hspa12b作为糖尿病治疗靶点的检测方法，检测包括hspa12b在小鼠饥饿后肝脏组织中的表达变化，hspa12b基因敲除小鼠糖耐量及丙酮酸耐量的改变，肝脏组织中糖异生相关基因PGC1α、pepck、G6pase表达变化。本发明检测方法通过提取饥饿小鼠肝脏组织的RNA检测hspa12b的表达水平；利用。操作简单快速、稳定性好；为糖尿病患者的临床诊治提供强有力的理论支持，具有临床意义和推广价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112029765A
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202010753780.2
申请日：2020-07-30
Applicant: 南京医科大学附属逸夫医院
IPC: C12N15/113 , C12N15/89 , A61D19/04 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开一种Metrnl基因条件性敲除小鼠模型制作方法，包括以下步骤：确定基于CRISPR-Cas9系统设计靶向动物Metrnl基因的sgRNA，将SgRNA与Cas9核酸酶的mRNA经体外转录后，一起注射到小鼠受精卵中，然后将受精卵移植到假孕母鼠体内，假孕母鼠体产出F0代，对F0进行PCR鉴定，将阳性F0代与野生型小鼠交配获得F1代杂合子，F1代杂合子进行杂交，筛选Metrnl基因敲除基因的纯合子代，作为Metrnl基因敲除小鼠模型。本发明构建的Metrnl小鼠模型稳定性强，能够稳定遗传，为进一步研究心血管疾病、代谢综合征等发病机制及基因治疗提供了经济、简单、可靠的动物模型。
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公开(公告)号：CN112011538A
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN202010751843.0
申请日：2020-07-30
Applicant: 南京医科大学附属逸夫医院
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开一种Mutyh基因条件性敲除小鼠模型的构建方法，利用CRISPR/Cas9技术，通过同源重组的原理，对Mutyh基因进行flox修饰，该flox小鼠与特异性的Cre工具鼠交配后，可敲除Mutyh基因第3-15外显子，获得基因组织或细胞特异性敲除的模型小鼠，MUTYH基因变异可能通过诱导线粒体功能障碍，成为能量代谢障碍相关疾病发生的风险因素，心肌能量代谢障碍是导致并促进心力衰竭的发生发展的重要因素。本发明Mutyh基因条件性敲除小鼠模型稳定性好，为进一步研究心力衰竭的发病机制以及基因治疗提供经济、简单、可靠的动物模型。
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公开(公告)号：CN111748615A
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN202010409002.1
申请日：2020-05-14
Applicant: 南京医科大学附属逸夫医院
IPC: C12Q1/6883 , G01N33/68 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种RBP4作为肌少症治疗靶点的检测方法，检测包括RBP4在肌少症患者的腓肠肌组织中表达变化，腺病毒沉默小鼠骨骼肌RBP4表达后小鼠运动耐量的改变，和RBP4在小鼠C2C12成肌细胞分化过程的表达变化。本发明检测方法通过肌少症患者腓肠肌组织中提取蛋白样品检测RBP4的表达水平；利用腺病毒沉默小鼠腓肠肌RBP4基因表达，测量小鼠运动耐量；以及从分化不同程度的C2C12成肌细胞中提取RNA检测RBP4的表达。操作简单、快速、稳定性好；为肌少症患者的临床诊治提供强有力的理论支持，具有临床意义和推广价值。
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公开(公告)号：CN112011538B
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202010751843.0
申请日：2020-07-30
Applicant: 南京医科大学附属逸夫医院
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开一种Mutyh基因条件性敲除小鼠模型的构建方法，利用CRISPR/Cas9技术，通过同源重组的原理，对Mutyh基因进行flox修饰，该flox小鼠与特异性的Cre工具鼠交配后，可敲除Mutyh基因第3‑15外显子，获得基因组织或细胞特异性敲除的模型小鼠，MUTYH基因变异可能通过诱导线粒体功能障碍，成为能量代谢障碍相关疾病发生的风险因素，心肌能量代谢障碍是导致并促进心力衰竭的发生发展的重要因素。本发明Mutyh基因条件性敲除小鼠模型稳定性好，为进一步研究心力衰竭的发病机制以及基因治疗提供经济、简单、可靠的动物模型。
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公开(公告)号：CN112852945A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110010558.8
申请日：2021-01-06
Applicant: 南京医科大学附属逸夫医院
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开一种以hspa12b作为糖尿病治疗靶点的检测方法，检测包括hspa12b在小鼠饥饿后肝脏组织中的表达变化，hspa12b基因敲除小鼠糖耐量及丙酮酸耐量的改变，肝脏组织中糖异生相关基因PGC1α、pepck、G6pase表达变化。本发明检测方法通过提取饥饿小鼠肝脏组织的RNA检测hspa12b的表达水平；利用。操作简单快速、稳定性好；为糖尿病患者的临床诊治提供强有力的理论支持，具有临床意义和推广价值。
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