公开(公告)号：CN112011575A

公开(公告)日：2020-12-01

申请号：CN202010751910.9

申请日：2020-07-30

Applicant: 南京医科大学附属逸夫医院

Inventor： 高伟 ,  鲁翔 ,  沈茜煜 ,  赵璨 ,  张康振

IPC: C12N15/89 ,  C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开一种Hspa12b基因敲除小鼠模型的构建方法，根据小鼠Hspa12b基因第3-7外显子序列，基于CRISPR/Cas9系统设计靶向基因sgRNA；sgRNA与Cas9核酸酶的mRNA经体外转录后，显微注射到小鼠的精卵中，注射后的受精卵胚胎移植到假孕母鼠体内，获得F0小鼠；提取F0代小鼠尾部DNA，经PCR扩增产物测序，鉴定基因型，获得阳性F0代小鼠；将F0小鼠分别与野生型小鼠交配，获得杂合子小鼠F1代，并进行鼠尾鉴定；将F1代小鼠杂交获得F2代纯合子小鼠。本发明小鼠模型的构建方法研究HSPA12B特异性表达于血管内皮细胞中，参与调控内皮细胞的迁移、增殖和血管新生，适合用Hspa12b基因条件性敲除动物模型研究心血管问题，为诊断、治疗提供理论基础。

公开(公告)号：CN112852945A

公开(公告)日：2021-05-28

申请号：CN202110010558.8

申请日：2021-01-06

Applicant: 南京医科大学附属逸夫医院

Inventor： 高伟 ,  鲁翔 ,  沈茜煜 ,  刘嘉莉 ,  赵璨 ,  张康振

IPC: C12Q1/6883 ,  C12Q1/6851

Abstract: 本发明公开一种以hspa12b作为糖尿病治疗靶点的检测方法，检测包括hspa12b在小鼠饥饿后肝脏组织中的表达变化，hspa12b基因敲除小鼠糖耐量及丙酮酸耐量的改变，肝脏组织中糖异生相关基因PGC1α、pepck、G6pase表达变化。本发明检测方法通过提取饥饿小鼠肝脏组织的RNA检测hspa12b的表达水平；利用。操作简单快速、稳定性好；为糖尿病患者的临床诊治提供强有力的理论支持，具有临床意义和推广价值。

公开(公告)号：CN112852945B

公开(公告)日：2023-01-06

申请号：CN202110010558.8

申请日：2021-01-06

Applicant: 南京医科大学附属逸夫医院

Inventor： 高伟 ,  鲁翔 ,  沈茜煜 ,  刘嘉莉 ,  赵璨 ,  张康振

IPC: C12Q1/6883 ,  C12Q1/6851

Abstract: 本发明公开一种以hspa12b作为糖尿病治疗靶点的检测方法，检测包括hspa12b在小鼠饥饿后肝脏组织中的表达变化，hspa12b基因敲除小鼠糖耐量及丙酮酸耐量的改变，肝脏组织中糖异生相关基因PGC1α、pepck、G6pase表达变化。本发明检测方法通过提取饥饿小鼠肝脏组织的RNA检测hspa12b的表达水平；利用。操作简单快速、稳定性好；为糖尿病患者的临床诊治提供强有力的理论支持，具有临床意义和推广价值。

公开(公告)号：CN111748615A

公开(公告)日：2020-10-09

申请号：CN202010409002.1

申请日：2020-05-14

Applicant: 南京医科大学附属逸夫医院

Inventor： 高伟 ,  鲁翔 ,  王丽 ,  赵璨 ,  张康振 ,  王玥

IPC: C12Q1/6883 ,  G01N33/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种RBP4作为肌少症治疗靶点的检测方法，检测包括RBP4在肌少症患者的腓肠肌组织中表达变化，腺病毒沉默小鼠骨骼肌RBP4表达后小鼠运动耐量的改变，和RBP4在小鼠C2C12成肌细胞分化过程的表达变化。本发明检测方法通过肌少症患者腓肠肌组织中提取蛋白样品检测RBP4的表达水平；利用腺病毒沉默小鼠腓肠肌RBP4基因表达，测量小鼠运动耐量；以及从分化不同程度的C2C12成肌细胞中提取RNA检测RBP4的表达。操作简单、快速、稳定性好；为肌少症患者的临床诊治提供强有力的理论支持，具有临床意义和推广价值。