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公开(公告)号：CN115389651B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202210885992.5
申请日：2022-07-26
Applicant: 南京医科大学
Abstract: 本发明公开了一种基于气相色谱‑串联质谱快速测定微量人血清中尼古丁和可替宁的方法，包括：取15～100μL血清，加入5～50μL氘代同位素内标溶液混匀，再加入45～300μL甲醇，充分涡旋，离心，取上清液进行气相色谱‑串联质谱检测；根据定性离子对和保留时间对尼古丁、可替宁进行定性；将尼古丁或可替宁的定量离子的峰面积与氘代同位素内标的峰面积的比值分别代入尼古丁或可替宁的基质匹配内标标准曲线，获得尼古丁和可替宁的浓度。本发明仅需微量血清样品，基于特定的毛细管柱有效分离尼古丁和可替宁，利用优化的串联四级杆监测参数，就可以准确、灵敏、省时、高效的获得尼古丁和可替宁残留数据，且成本低。
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公开(公告)号：CN115389651A
公开(公告)日：2022-11-25
申请号：CN202210885992.5
申请日：2022-07-26
Applicant: 南京医科大学
Abstract: 本发明公开了一种基于气相色谱‑串联质谱快速测定微量人血清中尼古丁和可替宁的方法，包括：取15～100μL血清，加入5～50μL氘代同位素内标溶液混匀，再加入45～300μL甲醇，充分涡旋，离心，取上清液进行气相色谱‑串联质谱检测；根据定性离子对和保留时间对尼古丁、可替宁进行定性；将尼古丁或可替宁的定量离子的峰面积与氘代同位素内标的峰面积的比值分别代入尼古丁或可替宁的基质匹配内标标准曲线，获得尼古丁和可替宁的浓度。本发明仅需微量血清样品，基于特定的毛细管柱有效分离尼古丁和可替宁，利用优化的串联四级杆监测参数，就可以准确、灵敏、省时、高效的获得尼古丁和可替宁残留数据，且成本低。
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公开(公告)号：CN115420835A
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202211205592.1
申请日：2022-09-30
Applicant: 南京医科大学
Abstract: 本发明公开了一种PM2.5中MW328多环芳烃的气相色谱‑串联质谱定性筛查方法，其特征在于：包括：步骤(1)、取PM2.5采样膜，剪碎，加入萃取剂，进行超声萃取得到提取液，提取液氮吹浓缩后，加入二氯甲烷复溶，制得进样液；步骤(2)、取空白玻璃纤维膜，按照步骤(1)制得程序空白样；步骤(3)、进样液和程序空白样分别进行气相色谱‑串联质谱检测，根据定性离子对筛查MW328多环芳烃：与程序空白样相比，进样液定性离子对的峰面积增强或出现新的定性离子对，说明PM2.5样品中含有MW328多环芳烃。本发明方法所需样品量少，前处理简单，且灵敏度高、特异性强，能有效筛查出PM2.5中潜在的MW328多环芳烃。
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公开(公告)号：CN102851316A
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：CN201210246091.8
申请日：2010-12-15
Applicant: 南京医科大学
IPC: C12N15/866 , C12N7/01 , C07K14/47
Abstract: 本发明涉及细胞色素P450酶，特别涉及一种改进细胞色素P450酶家族体外表达的方法。一种改进细胞色素P450酶家族体外表达的方法，其特征在于在步骤D所述的辅助因子为如下任意一种：①0.5-6μg/mlHemin；②0.05-0.6mM5-ALA；③0.01-0.4mMFe3+；④0.05-0.6mM-ALA和0.01-0.4mMFe3+混合物，首次对CYP蛋白、POR蛋白及其共表达的条件进行了系统优化，结果发现同时给予0.02mMFe3+和0.2mM5-ALA处理细胞，上述蛋白表达水平及其活性最高。CYP的MOI为5pfu/细胞、POR的MOI为2pfu/细胞时，两者的共表达效率最高。
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公开(公告)号：CN102094000B
公开(公告)日：2012-12-12
申请号：CN201010588356.3
申请日：2010-12-15
Applicant: 南京医科大学
Abstract: 本发明涉及细胞色素P450酶，特别涉及一种改进细胞色素P450酶家族体外表达的方法。一种改进细胞色素P450酶家族体外表达的方法，其特征在于在步骤D所述的辅助因子为如下任意一种：①0.5-6μg/mlHemin；②0.05-0.6mM5-ALA；③0.01-0.4mMFe3+；④0.05-0.6mM-ALA和0.01-0.4mMFe3+混合物，首次对CYP蛋白、POR蛋白及其共表达的条件进行了系统优化，结果发现同时给予0.02mMFe3+和0.2mM5-ALA处理细胞，上述蛋白表达水平及其活性最高。CYP的MOI为5pfu/细胞、POR的MOI为2pfu/细胞时，两者的共表达效率最高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115480014B
公开(公告)日：2024-06-28
申请号：CN202211205589.X
申请日：2022-09-30
Applicant: 南京医科大学
Abstract: 本发明公开了一种基于分子印迹固相萃取‑气相色谱‑串联质谱测定PM2.5中DBfkT的方法，包括：取采集有PM2.5的玻璃纤维膜，剪碎，加入萃取剂，进行超声萃取得到提取液，采用分子印迹固相萃取小柱对提取液进行净化处理，氮吹浓缩得到进样液，再进行气相色谱‑串联质谱检测，根据DBfkT的保留时间和定性离子进行定性；将DBfkT定量子离子的峰面积代入DBfkT标准曲线中，获得进样液中DBfkT的浓度，根据PM2.5采样时的空气体积换算成DBfkT的最终浓度。本发明方法能够高效、准确、灵敏地定量PM2.5中痕量环境污染物DBfkT，适用于PM2.5及类似的颗粒性状的环境介质中DBfkT的残留分析。
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公开(公告)号：CN115420835B
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202211205592.1
申请日：2022-09-30
Applicant: 南京医科大学
Abstract: 本发明公开了一种PM2.5中MW328多环芳烃的气相色谱‑串联质谱定性筛查方法，其特征在于：包括：步骤(1)、取PM2.5采样膜，剪碎，加入萃取剂，进行超声萃取得到提取液，提取液氮吹浓缩后，加入二氯甲烷复溶，制得进样液；步骤(2)、取空白玻璃纤维膜，按照步骤(1)制得程序空白样；步骤(3)、进样液和程序空白样分别进行气相色谱‑串联质谱检测，根据定性离子对筛查MW328多环芳烃：与程序空白样相比，进样液定性离子对的峰面积增强或出现新的定性离子对，说明PM2.5样品中含有MW328多环芳烃。本发明方法所需样品量少，前处理简单，且灵敏度高、特异性强，能有效筛查出PM2.5中潜在的MW328多环芳烃。
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公开(公告)号：CN102168061A
公开(公告)日：2011-08-31
申请号：CN201010596659.X
申请日：2010-12-21
Applicant: 南京医科大学
Abstract: 本发明涉及人重组基因肺上皮细胞，特别涉及一种人肺细胞BEAS-2B/CYP2A13及其应用。一种人肺细胞BEAS-2B/CYP2A13，其特征在于，该细胞株保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2010127。在国内外率先利用慢病毒系统构建了稳定表达CYP2A13的BEAS-2B细胞，这是本发明最重要的关键技术。该技术相比其它病毒载体系统而言，具有转染效率高、表达稳定、易于筛选等优点，对于转染永生化的原代细胞具有独特的优势。
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公开(公告)号：CN101863973A
公开(公告)日：2010-10-20
申请号：CN201010179522.4
申请日：2010-05-21
Applicant: 南京医科大学
Abstract: 本发明涉及一种重组人FSHR-57多肽蛋白及其制备方法和应用，该多肽疫苗选取了卵泡刺激素受体(FSHR)N端57位氨基酸，含B细胞表位且有效避免与黄体生成素受体(LHR)、甲状腺刺激素(TSHR)的交叉反应。运用原核表达、结合切胶纯化及梯度透析复性的方法，制备出高纯度的FSHR-57蛋白多肽，经Non-reduced PAGE+Western blot，HPLC及质谱氨基酸测序鉴定，确认该方法制备的蛋白多肽准确无误且纯度高于97％。FSHR-57蛋白多肽安全性好，不干扰睾酮及雌二醇等性激素的水平，具较强的免疫原性，可以成为男性避孕疫苗的候选。
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公开(公告)号：CN101519448A
公开(公告)日：2009-09-02
申请号：CN200910025076.9
申请日：2009-02-18
Applicant: 南京医科大学
IPC: C07K16/38 , C12N5/20 , A61K39/395 , A61P15/16 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物工程领域，公开了一种附睾蛋白酶抑制蛋白单克隆抗体及其用途。该单克隆抗体是由保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为C200849杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体。该单克隆抗体能够特异性结合于睾丸和附睾组织中特异性表达的附睾蛋白酶抑制蛋白Eppin蛋白，该单克隆抗体可用于制备男性不育诊断试剂、男性避孕药、抗生育研究生物制品。
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