植物类胡萝卜素合成相关蛋白DcAPRR2及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN116970053B

    公开(公告)日:2024-01-30

    申请号:CN202311226749.3

    申请日:2023-09-22

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种植物类胡萝卜素合成相关蛋白DcAPRR2及其编码基因与应用。本发明的蛋白质是如下任一种的蛋白质:A1)氨基酸序列如SEQ ID No  .2所示的蛋白质;A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80%以上的同一性且具有调控植物类胡萝素合成的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白质标签得到的融合蛋白质。实验证明,过表达DcAPRR2基因能促进类胡萝卜素合成,敲除DcAPRR2基因可以降低类胡萝卜素合成,表明DcAPRR2可以调控胡萝卜类胡萝卜素合成,对胡萝卜育种具有重要的理论意义。(56)对比文件Genbank.Accession No.:XM_017380365.1,PREDICTED: Daucus carota subsp. sativustwo-component response regulator-likeAPRR2 (LOC108209454), transcript variantX2《.Genbank》.2016,Features.Yu Pan.Network inference analysisidentifies an APRR2-like gene linked topigment accumulation in tomato and pepperfruits《.Plant Physiology 》.2013,第161卷(第3期),1476-1485.Jinyi Zhan.Map-based cloning of theAPRR2 gene controlling green stigma inbitter gourd ( Momordica charantia).《Front Plant Science》.2023,第10卷第1-11页.

    植物类胡萝卜素合成相关蛋白DcAPRR2及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN116970053A

    公开(公告)日:2023-10-31

    申请号:CN202311226749.3

    申请日:2023-09-22

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种植物类胡萝卜素合成相关蛋白DcAPRR2及其编码基因与应用。本发明的蛋白质是如下任一种的蛋白质:A1)氨基酸序列如SEQ ID No .2所示的蛋白质;A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80%以上的同一性且具有调控植物类胡萝卜素合成的蛋白质;A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白质标签得到的融合蛋白质。实验证明,过表达DcAPRR2基因能促进类胡萝卜素合成,敲除DcAPRR2基因可以降低类胡萝卜素合成,表明DcAPRR2可以调控胡萝卜类胡萝卜素合成,对胡萝卜育种具有重要的理论意义。

    一种胡萝卜番茄红素β-环化酶蛋白催化功能的检测方法

    公开(公告)号:CN119979664A

    公开(公告)日:2025-05-13

    申请号:CN202510473724.6

    申请日:2025-04-16

    Inventor: 王雅慧 熊爱生

    Abstract: 本发明公开了一种胡萝卜番茄红素β‑环化酶蛋白催化功能的检测方法,属于蛋白催化功能检测技术领域。本发明公开的一种胡萝卜番茄红素β‑环化酶蛋白催化功能的检测方法,利用大肠杆菌为异源表达宿主,通过表达pACCRT‑EIB质粒在大肠杆菌中积累番茄红素底物,再将番茄红素ε‑环化酶蛋白与番茄红素β‑环化酶构建在同一载体上共表达,在反应体系中引入番茄红素转化为胡萝卜素过程中的单环胡萝卜素中间产物,以检测2个番茄红素β‑环化酶同工酶的底物偏好性和功能差异。本发明方法操作简单,在大肠杆菌系统中表达方便快捷,能够提供除番茄红素以外的多种番茄红素β‑环化酶催化底物,能更准确地鉴定番茄红素β‑环化酶蛋白的催化功能。

    一种与胡萝卜类胡萝卜素合成相关的DcLCYB1基因序列及其应用

    公开(公告)号:CN110819646A

    公开(公告)日:2020-02-21

    申请号:CN201810918929.0

    申请日:2018-08-09

    Abstract: 番茄红素β-环化酶(Lycopeneβ-cyclase,LCYB)是类胡萝卜素合成途径中的一个关键酶。本发明从胡萝卜品种‘山西黄胡萝卜’中克隆得到一个DcLCYB1基因,该基因含有一个1527bp的开放阅读框(ORF),编码508个氨基酸,属于亲水性蛋白。二级结构预测显示,胡萝卜DcLCYB1蛋白由38.98%的α-螺旋、4.13%的β-折叠、16.14%的延伸主链和40.75%的随机卷曲组成。荧光定量结果显示,DcLCYB1基因在黄色和紫色品种胡萝卜的叶片中表达水平较高;而红色胡萝卜品种中仅在叶柄中少量表达。本发明利用RT-PCR技术从胡萝卜中克隆得到DcLCYB1基因,该基因能够调控胡萝卜中类胡萝卜素的积累,从而影响胡萝卜的营养品质。

    一种胡萝卜ABA应答元件结合蛋白基因DcABF3的序列及其应用

    公开(公告)号:CN110819633A

    公开(公告)日:2020-02-21

    申请号:CN201810918928.6

    申请日:2018-08-09

    Abstract: ABA应答元件结合蛋白属于bZIP转录因子家族ABF亚族,是植物中特有的一类转录因子。本发明利用聚合酶扩增方法从胡萝卜品种‘黑田五寸’中克隆得到一个ABA应答元件结合蛋白基因DcABF3,其序列包含1329个核苷酸,编码442个氨基酸。序列分析表明,DcABF3蛋白含有典型的bZIP结构域。表达分析结果表明,胡萝卜DcABF3蛋白参与了多种逆境胁迫的响应,低温、高温、干旱或高盐胁迫下DcABF3基因的表达水平均显著上调。本发明从胡萝卜中克隆获得胡萝卜DcABF3基因,该基因可调控胡萝卜逆境胁迫响应过程。

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