公开(公告)号：CN116970053A

公开(公告)日：2023-10-31

申请号：CN202311226749.3

申请日：2023-09-22

Applicant: 南京农业大学三亚研究院 ,  南京农业大学

Inventor： 徐志胜 ,  张凯 ,  熊爱生 ,  王璐

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/84 ,  A01H5/06 ,  A01H6/06

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种植物类胡萝卜素合成相关蛋白DcAPRR2及其编码基因与应用。本发明的蛋白质是如下任一种的蛋白质：A1)氨基酸序列如SEQ ID No .2所示的蛋白质；A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有调控植物类胡萝卜素合成的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白质标签得到的融合蛋白质。实验证明，过表达DcAPRR2基因能促进类胡萝卜素合成，敲除DcAPRR2基因可以降低类胡萝卜素合成，表明DcAPRR2可以调控胡萝卜类胡萝卜素合成，对胡萝卜育种具有重要的理论意义。

公开(公告)号：CN116970053B

公开(公告)日：2024-01-30

申请号：CN202311226749.3

申请日：2023-09-22

Applicant: 南京农业大学三亚研究院 ,  南京农业大学

Inventor： 徐志胜 ,  张凯 ,  熊爱生 ,  王璐

IPC: C07K14/415 ,  C12N15/29 ,  C12N15/84 ,  A01H5/06 ,  A01H6/06

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种植物类胡萝卜素合成相关蛋白DcAPRR2及其编码基因与应用。本发明的蛋白质是如下任一种的蛋白质：A1)氨基酸序列如SEQ ID No  .2所示的蛋白质；A2)将A1)的蛋白质经过氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有80％以上的同一性且具有调控植物类胡萝素合成的蛋白质；A3)在A1)或A2)的N末端或/和C末端连接蛋白质标签得到的融合蛋白质。实验证明，过表达DcAPRR2基因能促进类胡萝卜素合成，敲除DcAPRR2基因可以降低类胡萝卜素合成，表明DcAPRR2可以调控胡萝卜类胡萝卜素合成，对胡萝卜育种具有重要的理论意义。(56)对比文件Genbank.Accession No.：XM_017380365.1，PREDICTED: Daucus carota subsp. sativustwo-component response regulator-likeAPRR2 (LOC108209454), transcript variantX2《.Genbank》.2016,Features.Yu Pan.Network inference analysisidentifies an APRR2-like gene linked topigment accumulation in tomato and pepperfruits《.Plant Physiology 》.2013,第161卷(第3期),1476-1485.Jinyi Zhan.Map-based cloning of theAPRR2 gene controlling green stigma inbitter gourd ( Momordica charantia).《Front Plant Science》.2023,第10卷第1-11页.

公开(公告)号：CN111763681A

公开(公告)日：2020-10-13

申请号：CN201910263913.5

申请日：2019-04-01

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 熊爱生 ,  尹莲 ,  徐志胜 ,  冯凯 ,  刘洁霞

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/6851

Abstract: HD-Zip是高等植物特有的一类转录因子，在植物应对环境胁迫中起着重要的调节作用，HAT4是该转录因子家族中的一员。本专利从芹菜中克隆得到AgHAT4基因。该基因开放阅读框长为900bp，编码299个氨基酸。AgHAT4编码的蛋白属于亲水性蛋白。HAT4与同属伞形科的胡萝卜HAT4进化关系最近，具有高度保守性。荧光定量表达分析表明AgHAT4基因在芹菜叶柄中的表达量最高，根中次之，叶片中表达量最低。与对照相比，经不同非生物胁迫处理后‘六合黄心芹’中AgHAT4基因的表达量均下调；在盐胁迫条件下‘文图拉’和‘六合黄心芹’中AgHAT4基因的表达有着相似的变化趋势。本发明利用聚合酶扩增技术从芹菜中克隆获得芹菜AgHAT4基因，该基因与芹菜植株应对非生物胁迫有关。

公开(公告)号：CN106465679A

公开(公告)日：2017-03-01

申请号：CN201510510756.5

申请日：2015-08-19

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 熊爱生 ,  谭国飞 ,  王枫 ,  徐志胜

IPC: A01H1/02

Abstract: 一种人工提取水芹花粉克服水芹杂交花期不遇的方法，本发明涉及一种利用人工的方法，提取水芹花粉，用来克服水芹杂交中花期不遇的问题。该技术包括：水芹花粉的提取、干燥、检测、保存、花粉与其它营养元素配比技术。该技术能够较好的解决水芹杂交过程中，存在严重花期不遇的问题，对我国水芹杂交育种具有重要意义，对于促进水芹遗传与育种工作具有重要意义。

公开(公告)号：CN110093352B

公开(公告)日：2022-05-10

申请号：CN201810100013.4

申请日：2018-01-29

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 熊爱生 ,  冯凯 ,  徐志胜

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/82

Abstract: R2R3‑MYB转录因子属于MYB转录因子家族，是植物中与花青素合成相关的转录因子。本发明从芹菜中克隆了一个新的R2R3‑MYB基因AgMYB1。该基因编码316个氨基酸，具有典型的R2R3结构域。荧光定量表达分析表明AgMYB1基因在紫色芹菜叶柄的表达量明显比在非紫色芹菜叶柄中的表达量高。过表达AgMYB1基因的转基因拟南芥与对照拟南芥相比植株颜色更深，花青素含量也更高。本发明利用RT‑PCR技术从芹菜中克隆得到AgMYB1基因，该基因能够提高植物的花青素含量。

公开(公告)号：CN111718941A

公开(公告)日：2020-09-29

申请号：CN201910229877.0

申请日：2019-03-22

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 熊爱生 ,  沈迪 ,  徐志胜 ,  刘洁霞

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/6895

Abstract: bZIP转录因子家族属于转录因子家族中数目庞大的一种，并且十分保守，参与植物生长发育、代谢调节以及生物和非生物胁迫响应。本专利从两个芹菜品种‘六合黄心芹’和‘文图拉’中克隆了一个新的bZIP类转录因子基因AgbZIP16。该基因包含一个长度为1221bp的开放阅读框，编码406个氨基酸，含有一个bZIP家族典型的BRLZ保守结构域。AgbZIP16编码的蛋白属于亲水蛋白，与同属伞形科的胡萝卜bZIP转录因子蛋白进化关系最近，具有高度保守性。荧光定量表达分析表明AgbZIP16在‘六合黄心芹’和‘文图拉’中的相对表达量均是根中最高，叶柄中最低，呈现显著的组织特异性。同时高温、低温、干旱和盐胁迫均可诱导AgbZIP16基因的表达发生变化，且其在不同芹菜品种中的表达响应具有显著差异。本发明利用聚合酶扩增技术从芹菜中克隆获得AgbZIP16转录因子基因，证实该基因参与芹菜的抗逆性调节。

公开(公告)号：CN106472304A

公开(公告)日：2017-03-08

申请号：CN201510540222.7

申请日：2015-08-26

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 熊爱生 ,  田畅 ,  徐志胜 ,  王枫 ,  谭国飞

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了胡萝卜一种快速组织培养体系。该体系比较了不同培养基对胡萝卜愈伤组织诱导及分化的影响，并对其组织培养过程进行了优化，从而建立了完整的胡萝卜快速愈伤组织诱导和再生体系。该体系包括：胡萝卜种子催芽与无菌苗的获得、愈伤诱导、愈伤分化、生根以及炼苗时间等。该体系为深入研究胡萝卜提供了重要的基础。

公开(公告)号：CN110819646A

公开(公告)日：2020-02-21

申请号：CN201810918929.0

申请日：2018-08-09

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 熊爱生 ,  王雅慧 ,  徐志胜

IPC: C12N15/61 ,  C12N9/90 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6895

Abstract: 番茄红素β-环化酶(Lycopeneβ-cyclase，LCYB)是类胡萝卜素合成途径中的一个关键酶。本发明从胡萝卜品种‘山西黄胡萝卜’中克隆得到一个DcLCYB1基因，该基因含有一个1527bp的开放阅读框(ORF)，编码508个氨基酸，属于亲水性蛋白。二级结构预测显示，胡萝卜DcLCYB1蛋白由38.98％的α-螺旋、4.13％的β-折叠、16.14％的延伸主链和40.75％的随机卷曲组成。荧光定量结果显示，DcLCYB1基因在黄色和紫色品种胡萝卜的叶片中表达水平较高；而红色胡萝卜品种中仅在叶柄中少量表达。本发明利用RT-PCR技术从胡萝卜中克隆得到DcLCYB1基因，该基因能够调控胡萝卜中类胡萝卜素的积累，从而影响胡萝卜的营养品质。

公开(公告)号：CN110819633A

公开(公告)日：2020-02-21

申请号：CN201810918928.6

申请日：2018-08-09

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 熊爱生 ,  王雅慧 ,  徐志胜

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851

Abstract: ABA应答元件结合蛋白属于bZIP转录因子家族ABF亚族，是植物中特有的一类转录因子。本发明利用聚合酶扩增方法从胡萝卜品种‘黑田五寸’中克隆得到一个ABA应答元件结合蛋白基因DcABF3，其序列包含1329个核苷酸，编码442个氨基酸。序列分析表明，DcABF3蛋白含有典型的bZIP结构域。表达分析结果表明，胡萝卜DcABF3蛋白参与了多种逆境胁迫的响应，低温、高温、干旱或高盐胁迫下DcABF3基因的表达水平均显著上调。本发明从胡萝卜中克隆获得胡萝卜DcABF3基因，该基因可调控胡萝卜逆境胁迫响应过程。

公开(公告)号：CN111937955A

公开(公告)日：2020-11-17

申请号：CN201910416359.X

申请日：2019-05-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 熊爱生 ,  朱胜琪 ,  徐志胜

IPC: A23B7/04 ,  A23B7/00 ,  G01N33/02

Abstract: 叶菜类蔬菜是我国种植面积最广的一类蔬菜，由于其叶片面积大、组织脆嫩等生理特点，在贮藏加工环节保鲜困难。芹菜(Apium graveolens L.)是全世界最重要的叶菜类蔬菜作物之一，因其丰富的营养物质和药用价值，在世界各国广泛栽培。采后芹菜的贮藏保鲜是生产实践中备受关注的问题。本发明为一种适合芹菜贮藏环境条件的筛选方法，属于农作物贮藏保鲜领域。选取‘四季小香芹’和‘六合黄心芹’作为试验材料，采摘后分别置于室温(25℃)、低温(4℃)和室温黑暗(25℃)条件下贮藏。于0、6、24、30、48和54h取样，进行解剖结构观察，失重率、抗坏血酸含量和叶绿素含量的测定，从而筛选出适合芹菜贮藏的环境条件。