公开(公告)号：CN115885846A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202210964415.5

申请日：2022-08-11

Applicant: 南京农业大学 ,  江苏昂和农业科技有限公司

Inventor： 熊爱生 ,  邓元杰 ,  卢杰 ,  步瑞芳 ,  王雅慧

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种白色胡萝卜快速组培再生体系，属于植物组织培养技术领域。其特征在于，本技术体系可以用于快速获得白色胡萝卜的愈伤组织及组培苗，满足白色胡萝卜应用基础研究和基因工程改良胡萝卜性状的需求。该技术体系包括：白色胡萝卜种子消毒方法、无菌苗获得、外植体接种方法、培养条件、培养基使用及激素浓度的配比等。白色胡萝卜种子消毒先经75％酒精消毒1遍，接着用40％NaClO冲洗1遍，随后置于40％NaClO浸泡45分钟。再生培养基采用B5培养基，激素浓度及种类为0.5mg/L 2，4‑D和1.0mg/L 6‑BA。该技术体系能够快速获得白色胡萝卜愈伤组织及组培苗。

公开(公告)号：CN119979664A

公开(公告)日：2025-05-13

申请号：CN202510473724.6

申请日：2025-04-16

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 王雅慧 ,  熊爱生

IPC: C12Q1/533 ,  C12N15/61 ,  C12N9/90 ,  C12N15/70 ,  C12P23/00 ,  G01N30/02 ,  G01N30/72 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种胡萝卜番茄红素β‑环化酶蛋白催化功能的检测方法，属于蛋白催化功能检测技术领域。本发明公开的一种胡萝卜番茄红素β‑环化酶蛋白催化功能的检测方法，利用大肠杆菌为异源表达宿主，通过表达pACCRT‑EIB质粒在大肠杆菌中积累番茄红素底物，再将番茄红素ε‑环化酶蛋白与番茄红素β‑环化酶构建在同一载体上共表达，在反应体系中引入番茄红素转化为胡萝卜素过程中的单环胡萝卜素中间产物，以检测2个番茄红素β‑环化酶同工酶的底物偏好性和功能差异。本发明方法操作简单，在大肠杆菌系统中表达方便快捷，能够提供除番茄红素以外的多种番茄红素β‑环化酶催化底物，能更准确地鉴定番茄红素β‑环化酶蛋白的催化功能。

公开(公告)号：CN110819646A

公开(公告)日：2020-02-21

申请号：CN201810918929.0

申请日：2018-08-09

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 熊爱生 ,  王雅慧 ,  徐志胜

IPC: C12N15/61 ,  C12N9/90 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6895

Abstract: 番茄红素β-环化酶(Lycopeneβ-cyclase，LCYB)是类胡萝卜素合成途径中的一个关键酶。本发明从胡萝卜品种‘山西黄胡萝卜’中克隆得到一个DcLCYB1基因，该基因含有一个1527bp的开放阅读框(ORF)，编码508个氨基酸，属于亲水性蛋白。二级结构预测显示，胡萝卜DcLCYB1蛋白由38.98％的α-螺旋、4.13％的β-折叠、16.14％的延伸主链和40.75％的随机卷曲组成。荧光定量结果显示，DcLCYB1基因在黄色和紫色品种胡萝卜的叶片中表达水平较高；而红色胡萝卜品种中仅在叶柄中少量表达。本发明利用RT-PCR技术从胡萝卜中克隆得到DcLCYB1基因，该基因能够调控胡萝卜中类胡萝卜素的积累，从而影响胡萝卜的营养品质。

公开(公告)号：CN110819633A

公开(公告)日：2020-02-21

申请号：CN201810918928.6

申请日：2018-08-09

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 熊爱生 ,  王雅慧 ,  徐志胜

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851

Abstract: ABA应答元件结合蛋白属于bZIP转录因子家族ABF亚族，是植物中特有的一类转录因子。本发明利用聚合酶扩增方法从胡萝卜品种‘黑田五寸’中克隆得到一个ABA应答元件结合蛋白基因DcABF3，其序列包含1329个核苷酸，编码442个氨基酸。序列分析表明，DcABF3蛋白含有典型的bZIP结构域。表达分析结果表明，胡萝卜DcABF3蛋白参与了多种逆境胁迫的响应，低温、高温、干旱或高盐胁迫下DcABF3基因的表达水平均显著上调。本发明从胡萝卜中克隆获得胡萝卜DcABF3基因，该基因可调控胡萝卜逆境胁迫响应过程。