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公开(公告)号：CN101376887B
公开(公告)日：2010-10-20
申请号：CN200810155725.2
申请日：2008-10-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及猪口蹄疫重组免疫复合肽的构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该免疫多肽佐剂为口蹄疫病毒新型辅助T细胞表位(I-S-I-S-E-I-K-G-V-I-V-H-K-I-E-T-I-L-F)和囊素模拟肽(T-P-N-L-K-H-G)通过柔性Linker融合而成。融合基因插入表达载体，转化大肠杆菌，获得高效表达猪口蹄疫重组免疫复合肽的基因工程菌，通过液体培养、纯化制得的猪口蹄疫重组免疫复合肽融合蛋白，该融合蛋白经N端带有His标签的肠激酶去除硫氧还蛋白，再经亲和层析纯化，可获得单一的猪口蹄疫重组免疫复合肽，样品纯度极高。该重组免疫复合肽可作为口蹄疫疫苗的新型多肽免疫佐剂。动物免疫实验证实，安全性好，无毒副作用。能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平。
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公开(公告)号：CN101376887A
公开(公告)日：2009-03-04
申请号：CN200810155725.2
申请日：2008-10-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及猪口蹄疫重组免疫复合肽的构建方法和应用，属于生物工程技术领域。该免疫多肽佐剂为口蹄疫病毒新型辅助T细胞表位(I－S－I－S－E－I－K－G－V－I－V－H－K－I－E－T－I－L－F)和囊素模拟肽(T－P－N－L－K－H－G)通过柔性Linker融合而成。融合基因插入表达载体，转化大肠杆菌，获得高效表达猪口蹄疫重组免疫复合肽的基因工程菌，通过液体培养、纯化制得的猪口蹄疫重组免疫复合肽融合蛋白，该融合蛋白经N端带有His标签的肠激酶去除硫氧还蛋白，再经亲和层析纯化，可获得单一的猪口蹄疫重组免疫复合肽，样品纯度极高。该重组免疫复合肽可作为口蹄疫疫苗的新型多肽免疫佐剂。动物免疫实验证实，安全性好，无毒副作用。能够有效增强机体细胞免疫和体液免疫水平。
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公开(公告)号：CN101845441A
公开(公告)日：2010-09-29
申请号：CN201010125057.6
申请日：2010-03-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种复合猪α干扰素基因及其重组载体，属于基因工程生物制品技术领域。将新设计的复合猪α干扰素的基因序列重组到pPICZα-A载体，电转化入酵母菌感受态细胞，阳性鉴定、高拷贝酵母菌株的筛选、诱导表达。采用毕赤酵母表达系统表达外源基因，有利于猪干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白与酵母表达的天然干扰素相比，其表达量提高3.17倍。荧光定量PCR结果显示，用10-6mg/ml该复合猪α干扰素预处理的PK-15细胞再感染PRV，其PRVmRNA水平明显低于没经过复合猪α干扰素处理的PK-15细胞感染PRV后的PRVmRNA的水平，其PRVmRNA水平降低了37倍。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101830968B
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN201010156269.0
申请日：2010-04-23
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种具有免疫调节作用的法氏囊七肽，及其在免疫中的应用(提高动物的免疫能力，能提高疫苗的免疫效果及影响肿瘤细胞的活性)，属于免疫学领域。本发明分离到一种七肽，分子量为722.240，氨基酸序列为EPASGMM，结构简单，无毒副作用，免疫原性极弱。即可从法氏囊中分离提取，也可化学合成，成本低，可大量生产。法氏囊七肽对抗体及其亚型的产生具有诱导作用，同时可调节细胞因子的产生，T淋巴细胞的分型和脾脏细胞的增殖，促进细胞免疫反应。是一种对功能的免疫调节因子，具有广泛的应用前景，如免疫调节、免疫治疗等方面，可应用于基础免疫研究、临床应用研究等领域。
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公开(公告)号：CN101845441B
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN201010125057.6
申请日：2010-03-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种复合猪α干扰素基因及其重组载体，属于基因工程生物制品技术领域。将新设计的复合猪α干扰素的基因序列重组到pPICZα-A载体，电转化入酵母菌感受态细胞，阳性鉴定、高拷贝酵母菌株的筛选、诱导表达。采用毕赤酵母表达系统表达外源基因，有利于猪干扰素商业化生产。该基因组表达的蛋白与酵母表达的天然干扰素相比，其表达量提高3.17倍。荧光定量PCR结果显示，用10-6mg/ml该复合猪α干扰素预处理的PK-15细胞再感染PRV，其PRVmRNA水平明显低于没经过复合猪α干扰素处理的PK-15细胞感染PRV后的PRVmRNA的水平，其PRVmRNA水平降低了37倍。
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公开(公告)号：CN101412750B
公开(公告)日：2011-06-15
申请号：CN200810155724.8
申请日：2008-10-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种三肽囊素特异性结合的短肽及其筛选方法，属于生物技术领域。本发明筛选的短肽氨基酸序列分别为短肽1：ACTKHLCLLQPL或短肽2：MSCNDTLCLLPN。用重组的TRX-BS融合蛋白作为靶分子，利用噬菌体展示技术筛选与靶分子特异结合的肽，包括噬菌体12肽库的亲和筛选，噬菌体克隆的ELISA鉴定，最后噬菌体阳性克隆DNA的制备及序列测定。经试验研究表明，该短肽能不同程度的抑制囊素与杂交瘤细胞的结合。为囊素免疫佐剂以及囊素抑制肽的研究开发有着很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN101830968A
公开(公告)日：2010-09-15
申请号：CN201010156269.0
申请日：2010-04-23
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种具有免疫调节作用的法氏囊七肽，及其在免疫中的应用(提高动物的免疫能力，能提高疫苗的免疫效果及影响肿瘤细胞的活性)，属于免疫学领域。本发明分离到一种七肽，分子量为722.240，氨基酸序列为EPASGMM，结构简单，无毒副作用，免疫原性极弱。既可从法氏囊中分离提取，也可化学合成，成本低，可大量生产。法氏囊七肽对抗体及其亚型的产生具有诱导作用，同时可调节细胞因子的产生，T淋巴细胞的分型和脾脏细胞的增殖，促进细胞免疫反应。是一种对功能的免疫调节因子，具有广泛的应用前景，如免疫调节、免疫治疗等方面，可应用于基础免疫研究、临床应用研究等领域。
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公开(公告)号：CN101412750A
公开(公告)日：2009-04-22
申请号：CN200810155724.8
申请日：2008-10-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种三肽囊素特异性结合的短肽及其筛选方法，属于生物技术领域。本发明筛选的短肽氨基酸序列分别为短肽1：ACTKHLCLLQPL或短肽2：MSCNDTLCLLPN。用重组的TRX－BS融合蛋白作为靶分子，利用噬菌体展示技术筛选与靶分子特异结合的肽，包括噬菌体12肽库的亲和筛选，噬菌体克隆的ELISA鉴定，最后噬菌体阳性克隆DNA的制备及序列测定。经试验研究表明，该短肽能不同程度的抑制囊素与杂交瘤细胞的结合。为囊素免疫佐剂以及囊素抑制肽的研究开发有着很好的应用前景。
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