基于PRRSV基因组dsRNA的siRNA重组质粒及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN118165990A

    公开(公告)日:2024-06-11

    申请号:CN202410588735.4

    申请日:2024-05-13

    Abstract: 本发明公开了基于PRRSV基因组dsRNA的siRNA重组质粒及其构建方法和应用。通过对猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组产生的siRNA基因片段进行测序分析,获得能够大量产生siRNA的片段,将得到的基因片段构建至真核表达载体质粒,制备重组质粒及其在猪繁殖与呼吸综合征的防治方面的应用,经实验证明,将重组质粒转染猪肺泡巨噬细胞后感染PRRSV,细胞中PRRSV复制量显著降低,PRRSV病毒的增殖被抑制。在使用仔猪进行的攻毒保护实验中,免疫组实验猪血液中具有更低的病毒载量,且实验组仔猪全部存活,攻毒对照组有实验猪死亡。因此,该重组质粒可作为种猪场净化PRRSV的候选物。

    表达猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的重组枯草芽孢杆菌

    公开(公告)号:CN105886523A

    公开(公告)日:2016-08-24

    申请号:CN201410833720.6

    申请日:2014-12-25

    Abstract: 本发明涉及表达猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的重组枯草芽孢杆菌,属于生物技术基因工程领域。本发明成功构建了猪传染性胃肠炎病毒S蛋白重组枯草芽孢杆菌整合表达质粒pIncotGSR,并成功电击转化入枯草芽孢杆菌WB800。经Western-blot验证猪传染性胃肠炎病毒S蛋白在重组枯草芽孢杆菌内可以被成功表达。口服免疫可以刺激一月龄仔猪机体产生有效的TGEV特异性免疫应答水平。重组枯草芽孢杆菌有望开发成预防猪传染性胃肠炎的基因工程口服疫苗。

    可复制IBV病毒QX亚型毒株的基因敲除细胞系及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN113980912A

    公开(公告)日:2022-01-28

    申请号:CN202111251057.5

    申请日:2021-10-26

    Abstract: 本发明公开一株IBV病毒QX亚型毒株,并公开可复制IBV病毒QX亚型毒株的基因敲除细胞系及其构建方法和应用,挑选多株传代细胞系进行IBV病毒的感染,检测IBV病毒的复制载量和滴度,初步筛选能复制IBV病毒的细胞系;对所筛选出的细胞系利用siRNA干扰方法和/或基因敲除方法,干扰和/或敲除抑制病毒复制的相关基因,筛选得到使病毒大量复制的稳定传代细胞系。本发明构建一株敲除miRNA生成过程中相关酶的稳定传代细胞系可以极显著提高传染性支气管炎病毒QX亚型的复制量。该基因敲除的细胞系有望开发成为替代传统鸡胚繁毒的工具细胞系,应用细胞系繁殖的家禽病毒纯度高,杂质少,纯化简便且可以显著降低病毒的繁殖成本。

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