公开(公告)号：CN116286403A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202211121153.2

申请日：2022-09-15

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 沈其荣 ,  刘东阳 ,  朱瀚 ,  李驰 ,  李托 ,  刘洋

IPC: C12N1/15 ,  C12N15/12 ,  C12N15/31 ,  C12N15/65 ,  G01N21/64 ,  C12R1/885

Abstract: 本发明公开了一种丝状真菌氧化还原指示传感器及其构建方法和应用。本发明所涉及的传感器，以avGFP为原型，通过定点突变氨基酸位点并在avGFP的149和202位引入一对半胱氨酸最终形成相应序列；以哈茨木霉NJAU 4742的基因组DNA为模板，克隆长度为1308 bp的U3基因片段，基因合成潮霉素B抗性表达片段，以哈茨木霉NJAU 4742的基因组DNA为模板，克隆长度为532bp的U3基因上游同源臂，克隆长度为1663bp的强启动子片段，以pUC57质粒为模板扩增的氧化还原指示传感器功能性片段以及长度为1185bp的U3基因下游同源臂，并将6个片段利用融合PCR技术进行融合，再通过转化的方式最终形成氧化还原指示荧光菌株。本发明的传感器，将为实现丝状真菌胞内氧化还原状态的可视化操作提供理论和应用基础。