团头鲂原代肝细胞的分离培养方法

    公开(公告)号:CN109161515A

    公开(公告)日:2019-01-08

    申请号:CN201810886568.6

    申请日:2018-08-06

    Abstract: 本发明公开了团头鲂原代肝细胞的分离培养方法。选取健康、体重为30-50g的团头鲂幼鱼,用1%高锰酸钾进行全身消毒,从尾静脉采血后,无菌解剖采取肝脏。用胶原酶消化后经200目细胞筛过滤得到细胞悬液,经红细胞裂解液去除肝细胞中多余的红细胞,再经梯度离心去除细胞碎片。向得到的细胞沉淀加入适量完全培养基悬浮细胞,然后用细胞计数仪计算并调整细胞浓度,铺板后,放入28℃,5%CO2的细胞培养箱培养,48小时后观察贴壁情况。本发明创新性结合了研究物种的特点来分离培养肝细胞,得到的细胞活率高达90%以上,符合原代培养要求,为进一步开展团头鲂原代肝细相关实验提供理论依据及技术支持。

    团头鲂原代肝细胞的分离培养方法

    公开(公告)号:CN109161515B

    公开(公告)日:2021-12-03

    申请号:CN201810886568.6

    申请日:2018-08-06

    Abstract: 本发明公开了团头鲂原代肝细胞的分离培养方法。选取健康、体重为30‑50g的团头鲂幼鱼,用1%高锰酸钾进行全身消毒,从尾静脉采血后,无菌解剖采取肝脏。用胶原酶消化后经200目细胞筛过滤得到细胞悬液,经红细胞裂解液去除肝细胞中多余的红细胞,再经梯度离心去除细胞碎片。向得到的细胞沉淀加入适量完全培养基悬浮细胞,然后用细胞计数仪计算并调整细胞浓度,铺板后,放入28℃,5%CO2的细胞培养箱培养,48小时后观察贴壁情况。本发明创新性结合了研究物种的特点来分离培养肝细胞,得到的细胞活率高达90%以上,符合原代培养要求,为进一步开展团头鲂原代肝细相关实验提供理论依据及技术支持。

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