公开(公告)号：CN116665779B

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202310368843.6

申请日：2023-04-07

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 林建 ,  吴耀棠 ,  吴洋 ,  杨倩

IPC: G16B30/10 ,  G16B45/00 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  A61K31/7088 ,  A61P31/14 ,  A61P31/16

Abstract: 本发明公开了一种筛选家禽RNA病毒源siRNA的方法及其应用。本发明筛选家禽病毒源siRNA方法是基于NCBI GEO数据库中GSE数据集的小RNA与相应参考文献的病毒毒株序列进行比对。其次，通过基因组可视化软件IGV比对可知，IBVM41病毒源siRNA富集区为IBV M41 NSP10siRNA富集区序列。我们将IBVM41 NSP10siRNA富集区序列克隆至能高效表达siRNA的pSilencer4.1载体中，构建成PS‑M10质粒。最后，将PS‑M10质粒转染至巨噬细胞，再进行IBVM41感染试验，荧光定量PCR以及蛋白质印迹结果表明，PS‑M10可高效抑制IBV M41的复制，限制病毒的增殖。

公开(公告)号：CN116665779A

公开(公告)日：2023-08-29

申请号：CN202310368843.6

申请日：2023-04-07

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 林建 ,  吴耀棠 ,  吴洋 ,  杨倩

IPC: G16B30/10 ,  G16B45/00 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  A61K31/7088 ,  A61P31/14 ,  A61P31/16

Abstract: 本发明公开了一种筛选家禽RNA病毒源siRNA的方法及其应用。本发明筛选家禽病毒源siRNA方法是基于NCBI GEO数据库中GSE数据集的小RNA与相应参考文献的病毒毒株序列进行比对。其次，通过基因组可视化软件IGV比对可知，IBVM41病毒源siRNA富集区为IBV M41 NSP10siRNA富集区序列。我们将IBVM41 NSP10siRNA富集区序列克隆至能高效表达siRNA的pSilencer4.1载体中，构建成PS‑M10质粒。最后，将PS‑M10质粒转染至巨噬细胞，再进行IBVM41感染试验，荧光定量PCR以及蛋白质印迹结果表明，PS‑M10可高效抑制IBV M41的复制，限制病毒的增殖。