一种突变型逆转录酶及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN111849938A

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN202010503289.4

    申请日:2020-06-05

    Abstract: 本发明公开了一种突变型逆转录酶及其制备方法与应用。本发明公开的突变型逆转录酶是野生型莫洛尼鼠白血病病毒逆转录酶经定点突变改造而成。所述的突变型逆转录酶不但完整保留了野生蛋白结构,具有野生型逆转录酶的聚合酶活性,而且,其RNase H水解活性丧失。所述突变型逆转录酶耐抑制剂、耐热能力强,以RNA为模板逆转录合成cDNA的效率高。所述突变型逆转录酶对应用体系中存在的各类抑制剂均具有很高的耐受性,在基因检测中能有效防止抑制剂干扰cDNA合成而造成假阴性,提高了检测的准确性。所述突变型逆转录酶可用于RNA扩增和检测,普通及长链cDNA的快速合成,以及具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。

    一种基于深度共熔溶剂提取金线莲苷的方法

    公开(公告)号:CN113817006B

    公开(公告)日:2023-08-18

    申请号:CN202111160733.8

    申请日:2021-09-30

    Inventor: 胡松青 苑歆 侯轶

    Abstract: 本发明公开了一种基于深度共熔溶剂提取金线莲苷的方法,属于植物有效成分提取领域。本发明方法包括以下步骤:S1、原料的预处理;S2、深度共熔溶剂‑水溶液的制备;S3、向所得金线莲粉末加入深度共熔溶剂‑水溶液,混合均匀,进行超声提取或柱提取,得到提取液;提取液分离纯化,得到金线莲苷。本发明采用的深度共熔溶剂由氢键受体试剂和氢键供体试剂以1~3∶3~1的比例制备而成,为绿色溶剂,具有不易挥发,热稳定性高、氢键稳定、生物相容性高等优点。本发明方法原料利用率高,提取溶剂用量少,提取效率高,提取与固液分离一次完成;提取过程中无需加热,操作条件温和,避免了高温高压对活性物质的破坏,且设备工艺简单。

    一种直扩型热启动DNA聚合酶及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN111826366A

    公开(公告)日:2020-10-27

    申请号:CN202010503288.X

    申请日:2020-06-05

    Abstract: 本发明公开了一种直扩型热启动DNA聚合酶及其制备方法与应用。本发明公开的直扩型热启动DNA聚合酶是野生型Taq DNA聚合酶经缺失、定点突变、融合非特异性双链DNA结合蛋白结构域生物突变,并用化学修饰改造而成。本发明直扩型热启动DNA聚合酶可大幅提高DNA聚合酶稳定性,可耐受高浓度的荧光染料和各种抑制剂,可应用于各种来源、组成复杂样本的直接PCR或qPCR检测,使得PCR相关反应和检测更加便利。本发明还公开了一种qPCR反应试剂盒,检测特异性高、荧光信号强,适用于低含量粗提取核酸的快速定量检测,可应用于食品掺杂、微生物检测、转基因植物筛查。

    一种基于深度共熔溶剂提取金线莲苷的方法

    公开(公告)号:CN113817006A

    公开(公告)日:2021-12-21

    申请号:CN202111160733.8

    申请日:2021-09-30

    Inventor: 胡松青 苑歆 侯轶

    Abstract: 本发明公开了一种基于深度共熔溶剂提取金线莲苷的方法,属于植物有效成分提取领域。本发明方法包括以下步骤:S1、原料的预处理;S2、深度共熔溶剂‑水溶液的制备;S3、向所得金线莲粉末加入深度共熔溶剂‑水溶液,混合均匀,进行超声提取或柱提取,得到提取液;提取液分离纯化,得到金线莲苷。本发明采用的深度共熔溶剂由氢键受体试剂和氢键供体试剂以1~3∶3~1的比例制备而成,为绿色溶剂,具有不易挥发,热稳定性高、氢键稳定、生物相容性高等优点。本发明方法原料利用率高,提取溶剂用量少,提取效率高,提取与固液分离一次完成;提取过程中无需加热,操作条件温和,避免了高温高压对活性物质的破坏,且设备工艺简单。

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