公开(公告)号：CN111826366A

公开(公告)日：2020-10-27

申请号：CN202010503288.X

申请日：2020-06-05

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  黄丽芳 ,  苑歆 ,  刘光毅 ,  何贤蓉 ,  侯轶 ,  樊壬水

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/6851 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种直扩型热启动DNA聚合酶及其制备方法与应用。本发明公开的直扩型热启动DNA聚合酶是野生型Taq DNA聚合酶经缺失、定点突变、融合非特异性双链DNA结合蛋白结构域生物突变，并用化学修饰改造而成。本发明直扩型热启动DNA聚合酶可大幅提高DNA聚合酶稳定性，可耐受高浓度的荧光染料和各种抑制剂，可应用于各种来源、组成复杂样本的直接PCR或qPCR检测，使得PCR相关反应和检测更加便利。本发明还公开了一种qPCR反应试剂盒，检测特异性高、荧光信号强，适用于低含量粗提取核酸的快速定量检测，可应用于食品掺杂、微生物检测、转基因植物筛查。

公开(公告)号：CN103044243A

公开(公告)日：2013-04-17

申请号：CN201210513337.3

申请日：2012-12-04

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  穆燕 ,  张婷婷 ,  李琳 ,  张喜梅 ,  侯轶 ,  刘光毅

IPC: C07C65/21 ,  C07C59/52 ,  C07C59/64 ,  C07C51/42 ,  C07D311/30 ,  C07D311/40 ,  A61K8/368 ,  A61K8/365 ,  A61K8/36 ,  A61K8/49 ,  A61Q19/02

Abstract: 本发明公开了一种从千日红中提取分离酪氨酸酶抑制剂的方法，以水、甲醇或乙醇及其混合溶液从中提取具有酪氨酸酶抑制活性的千日红粗提物，采用有机溶剂从千日红粗提物中获得萃取部位，进一步采用硅胶柱层析、羟丙基葡聚糖凝胶柱层析、十八烷基硅烷键合硅胶柱层析从萃取部位中精制获得具有酪氨酸酶抑制活性的单体化合物。本发明在丰富了千日红来源酪氨酸酶抑制组分的同时，可以根据不同要求调节提取分离流程获得相应的酪氨酸酶抑制组分，而且采用不同溶剂提取的千日红粗提物不但具有较好的酪氨酸酶抑制活性，其溶液还呈现出不同颜色。

公开(公告)号：CN113604450B

公开(公告)日：2023-08-18

申请号：CN202110947469.6

申请日：2021-08-18

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  何贤蓉 ,  刘光毅 ,  侯轶

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种KOD DNA聚合酶突变体及其制备方法与应用，属于生物技术领域。本发明的KOD DNA聚合酶突变体KOFU‑S是将野生型KODDNA聚合酶进行缺失、定点突变、嵌合以及融合双链核酸结合蛋白Sso7d改造而成。本发明的KOD DNA聚合酶突变体与野生型KODDNA聚合酶相比，具有较高的保真度，同时扩增速率、延伸能力和耐抑制剂能力等PCR扩增性能提高，将拓宽该聚合酶在分子生物学领域的应用。

公开(公告)号：CN113604450A

公开(公告)日：2021-11-05

申请号：CN202110947469.6

申请日：2021-08-18

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  何贤蓉 ,  刘光毅 ,  侯轶

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/10 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种KOD DNA聚合酶突变体及其制备方法与应用，属于生物技术领域。本发明的KOD DNA聚合酶突变体KOFU‑S是将野生型KODDNA聚合酶进行缺失、定点突变、嵌合以及融合双链核酸结合蛋白Sso7d改造而成。本发明的KOD DNA聚合酶突变体与野生型KODDNA聚合酶相比，具有较高的保真度，同时扩增速率、延伸能力和耐抑制剂能力等PCR扩增性能提高，将拓宽该聚合酶在分子生物学领域的应用。

公开(公告)号：CN109006917B

公开(公告)日：2021-09-21

申请号：CN201811004480.3

申请日：2018-08-30

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  张亚萍 ,  侯轶 ,  刘光毅

IPC: C12N9/08 ,  A21D8/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/81

Abstract: 本发明公开一种小麦过氧化氢酶在改善面粉加工品质中的应用，属于基因工程和谷物科学领域。本发明采用真核表达的方法，获得了具有生物活性的重组小麦过氧化氢酶，具备表达量高，纯化简便，易于放大，适合工业化应用等特点。本发明还提供一种单独应用重组小麦过氧化氢酶改善面粉加工品质的方法，该重组酶能有效增强面粉粉质特性，改善面包的比容、硬度等烘焙品质。且应用过程中不需再添加其它酶制剂，简化了生产工序，有利于降低生产成本。本发明提供的重组小麦过氧化氢酶属于小麦内源酶，所添加酶制剂在面制品蒸煮、烘焙过程会失活降解为多肽或氨基酸，因此，本发明为面制品加工业提供了一种绿色、安全的新型生物面粉改良剂，用于面制品加工行业。

公开(公告)号：CN119592539A

公开(公告)日：2025-03-11

申请号：CN202411785671.3

申请日：2024-12-06

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  向荣 ,  刘光毅 ,  侯轶

IPC: C12N9/12 ,  C07K19/00 ,  C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/6848 ,  C12Q1/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种兼具高DNA聚合酶活性与逆转录酶活性的重组Bst DNA聚合酶及其制备与应用。本发明对来源于鸡绒毛蛋白的Headpiece结构域截短体Hp47和来源于嗜热古菌Sulfolobus tokodaii的Sto7d结构域进行了序列重排，并融合至Bst DNA聚合酶大片段的氨基末端，构建了新型Bst DNA聚合酶重排突变体HpSt‑G23。本发明得到的重组聚合酶HpSt‑G23兼具高聚合酶活性与逆转录酶活性，且能够耐受尿素、氯化钠等抑制剂。HpSt‑G23可与TthRecA构建检测体系，同一体系仅用两条引物即可完成DNA或RNA扩增，且大幅提高了RNA模板的检测灵敏度，在核酸检测领域具有良好的发展前景。

公开(公告)号：CN117070492A

公开(公告)日：2023-11-17

申请号：CN202310576763.X

申请日：2023-05-22

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  袁家惠 ,  刘光毅 ,  侯轶

IPC: C12N9/12 ,  C07K19/00 ,  C12N15/54 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/70 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种融合双链DNA结合蛋白Sto7dm的Taq DNA聚合酶及其制备方法与应用，属于生物技术领域。本发明Taq DNA聚合酶Taq‑Sto是在野生型Taq DNA聚合酶的C端融合一段双链DNA结合蛋白Sto7dm结构域改造而成。本发明的融合型聚合酶Taq‑Sto兼具高pH稳定性、快速延伸性能和增强的抑制剂耐受能力，不仅能实现超快速TaqMan探针法qPCR扩增，缩短检测时间，而且对猪肉、组织或粪便等复杂样本具有良好的耐受性，可以省略核酸提取步骤直接对复杂样本进行检测，大大简化检测流程。由此构建的TaqMan探针法qPCR检测体系检测速度快、灵敏度高、准确性好，具有良好的发展前景。

公开(公告)号：CN115094047B

公开(公告)日：2023-06-20

申请号：CN202210722107.1

申请日：2022-06-24

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  张金桂 ,  刘光毅 ,  侯轶

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/6844 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种直扩型Bst DNA聚合酶及其制备方法与应用。本发明公开的直扩型StoL3Bst是野生型BstDNA聚合酶经截短突变、融合非特异性双链DNA结合蛋白结构域，并采用适当长度的连接子进行连接而成。本发明StoL3Bst可大幅提高DNA聚合酶的延伸速率和抑制剂耐受能力，可耐受高浓度的常见抑制剂，可应用于各种来源的、组成复杂的样本检测，还可直接利用血液样本进行免提取LAMP或qLAMP检测，使得LAMP相关检测更加便捷。本发明还公开了一种qLAMP反应试剂盒，检测特异性高、重复性好，适用于粗提取核酸样本的快速检测，可应用于微生物检测、食品掺假检测、动植物疾病筛查等。

公开(公告)号：CN113621585A

公开(公告)日：2021-11-09

申请号：CN202110947350.9

申请日：2021-08-18

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  叶安徒 ,  刘光毅 ,  侯轶

IPC: C12N9/00 ,  C12N9/12 ,  C12N9/22 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/686 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种Taq DNA聚合酶与核酸内切酶嵌合体及其制备方法与应用，属于生物技术领域。本发明的嵌合体是野生型Taq DNA聚合酶经缺失突变和定点突变，以及在N末端融合一段高效亲和双链DNA结构域和瓣状核酸内切酶1等方式改造而成。本发明的嵌合体在野生型Taq DNA聚合酶的基础上，大幅提高了在PCR反应中的扩增效率和延伸速率，经化学修饰热启动后，适用于各类常规PCR、快速PCR、长片段PCR和热启动PCR。同时，该嵌合体具有5’‑3’核酸外切酶活性，可应用于探针法qPCR中。该嵌合体对PCR抑制剂具有较强的耐受能力，适合在抗凝血或常规滤纸收集的血液中直接扩增DNA。

公开(公告)号：CN109022387B

公开(公告)日：2020-12-22

申请号：CN201810999861.3

申请日：2018-08-29

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 胡松青 ,  黄丽芳 ,  刘光毅 ,  黄菁菁 ,  侯轶

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/686 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种突变型Pfu DNA聚合酶及其制备方法与应用。该突变型Pfu DNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。该突变型Pfu DNA聚合酶大幅提高了DNA聚合酶的扩增速率、延伸能力和保真性，适用于各类常规PCR、高保真PCR、长片段PCR及高GC模板的PCR。同时，该突变型Pfu DNA聚合酶对血液中存在的PCR抑制剂具有很高的耐受性，可直接利用血液样品进行PCR检测，无需事先提纯DNA，节约了时间且避免了核酸提取过程中的交叉污染现象。本发明的突变型Pfu DNA聚合酶适合在抗凝血或常规滤纸收集的血液中直接扩增DNA，适用于基因型疾病诊断和亲子鉴定分析。